聚乙烯亚胺修饰的白蛋白微泡转染CHO细胞实验研究
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江苏省卫生厅面上科研课题和医学重点学科开放课题(H200841和WK0512);南京医科大学科技发展基金重点项目(07NMUZ037);无锡市科学技术局科技发展计划项目(CSE00809)


An experimental study on transgenes into CHO cell line by polyethylenimine coated albumin microbubble
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    摘要:

    目的:制作非病毒基因转移载体,提高白蛋白微泡转基因效率-方法:采用人体白蛋白-聚乙烯亚胺(PEI)和葡萄糖按一定的质量比混合后用超声振动仪声振20 s制得PEI修饰的白蛋白微泡(PAMB),通过流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞比率以比较PEI-PEI+白蛋白-PAMB和Lipofectamine 2000的基因转移效率-结果:单纯PEI组-白蛋白+PEI组-PAMB组和Lipofectamine 2000组的平均转基因效率分别为(13.75±4.88)%-(5.20±1.15)%-(49.17±6.75)%和(53.72±5.69)%-PAMB组明显高于单纯PEI组,而与商品化Lipofectamine 2000组没有统计学差异-结论:经PEI修饰后的白蛋白微泡转基因效率明显提高,是一种有效的体外基因转移载体,本研究也可能为在体基因转移提供新的方法-

    Abstract:

    Objective:To improve efficiency of transgenes by albumin microbubble,which is a non-virus gene delivery vector. Method:Polyethylenimine coated albumin microbubble(PAMB) was prepared by sonicating the mixture of human albumin,polyethylenimine and glucose. The transgene efficiency of polyethylenimine,polyethylenimine+albumin,PAMB and Lipofectamine 2000 was compared by detecting the positive cell ratio of green fluorescent protein(GFP) using flow cytometry. Results:The average efficiency of transgene by polyethylenimine,polyethylenimine+albumin,PAMB and Lipofectamine 2000 was (13.75±4.88)%,(5.20±1.15)%,(49.17±6.75)% and (53.72±5.69)%,respectively. The efficiency of PAMB group was higher than that in polyethylenimine group(P < 0.05),however,there was no statistical significance between PAMB group and Lipofectamine 2000 group (P > 0.05). Conclusion:Albumin microbubble modified by polyethylenimine is highly effective on transgene,and it is a useful non-virus gene delivery vector. This study may provide a new method for gene transfection in vivo.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

党时鹏,王如兴,张学光,张 燕,王明元,郭冬萍,李肖蓉.聚乙烯亚胺修饰的白蛋白微泡转染CHO细胞实验研究[J].南京医科大学学报(自然科学版),2010,(5):626-631

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