文章摘要
曹 青,李卓璇,倪 帅,李铁梅,刘 晨.DNA甲基化修饰对非洲爪蛙胚层分化的影响[J].南京医科大学学报,2020,(12):1756~1760
DNA甲基化修饰对非洲爪蛙胚层分化的影响
Effects of DNA methylation on germ layer differentiation of Xenopus laevis
投稿时间:2020-04-30  
DOI:10.7655/NYDXBNS20201203
中文关键词: 5⁃AZA⁃CdR  DNMT1  非洲爪蛙  胚层分化
英文关键词: 5⁃AZA⁃CdR  DNMT1  Xenopus laevis  germ⁃layer differentiation
基金项目:河南科技大学博士启动基金(13480027);南京医科大学科技发展基金重点项目(2015NJMUZD002);江苏省高校自然科学研究面上项目(16KJB180020);江苏省自然科学基金青年基金项目(BK20171053);国家自然科学基金青年科学基金项目(81702747)
作者单位
曹 青 河南科技大学基础医学院医学遗传学教研室河南 洛阳 471000 
李卓璇 河南科技大学基础医学院医学遗传学教研室河南 洛阳 471000 
倪 帅 河南科技大学基础医学院医学遗传学教研室河南 洛阳 471000 
李铁梅 河南科技大学基础医学院医学遗传学教研室河南 洛阳 471000 
刘 晨 南京医科大学医学遗传学系江苏 南京 211166 
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中文摘要:
      目的:探讨DNA甲基化修饰对非洲爪蛙三个胚层分化的影响。方法:用30 μmol/L 的5?氮杂?2’?脱氧胞苷(5?AZA?CdR)处理胚胎,抑制早期胚胎细胞内DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)的活性,观察胚胎的表型,并收集原肠期胚胎通过原位杂交检测三胚层标记基因的表达情况;显微注射DNMT1特异的反义寡核苷酸(DNMT1MO)以敲降胚胎细胞内DNMT1的表达,然后通过原位杂交检测胚层标记基因的表达情况。结果:5?AZA?CdR处理导致胚胎早期发育异常,抑制中胚层标记基因Xbra的表达。敲降DNMT1促进背部中胚层标记基因GSC和Chordin的表达,抑制腹部中胚层标记基因Wnt8的表达。结论:DNA甲基化转移酶参与调节非洲爪蛙三胚层分化形成的过程。
英文摘要:
      Objective:This study aims to investigate the effects of DNA methylation on germ layer differentiation of Xenopus laevis. Methods:Embryos were treated with 30 μmol/L 5?aza?2’?deoxycytidine(5?AZA?CdR)to inhibit DNA methyltransferase 1(DNMT1)in early embryonic cells,then observe the phenotype. Gastrula embryos were collected and the expression of three germ?layer marker genes was detected via in situ hybridization. To knock down endous DNMT1,the specific DNMT1 antisense oligonucleotide(DNMT1MO)were injected into 2?cell stage embryos,and then the expression of three germ?layer marker genes was detected by in situ hybridization. Results:5?AZA?CdR treatment led to abnormal development of embryos and inhibited the expression of the mesoderm marker gene Xbra. Knockdown of DNMT1 promotes expression of the dorsal mesodermal marker genes GSC and Chordin,and inhibits the expression of the ventral mesoderm marker gene Wnt8. Conclusion:DNA methyltransferase is involved in the regulation of the differentiation of the three germ layers of Xenopus laevis.
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