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第43卷第1期         耿佳伟,费小明,汤 郁,等. 多西环素通过MEK/ERK信号通路促进MC3T3⁃E1细胞株体外
                  2023年1月              成骨分化[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(01):001-007,106                 · 5  ·


                A                                B                               C
                DOX(mg/L)  0    5     10         DOX(mg/L)   0        10         DOX(mg/L)   0        10
                N⁃cadherin                140 kDa   p⁃MEK                  45 kDa    p⁃ERK                  45 kDa

                  GAPDH                   37 kDa    GAPDH                  37 kDa   GAPDH                   37 kDa
                        1.6     *  *                      2.5       *                     2.0       *
                      N⁃cadherin蛋白相对表达量  1.0             p⁃MEK蛋白相对表达量  2.0               p⁃ERK蛋白相对表达量  1.5



                                                          1.5
                                                                                          1.0
                                                          1.0
                        0.5

                         0                                0.5 0                           0.5 0
                             0    5    10                        0    10                         0     10
                               DOX(mg/L)                        DOX(mg/L)                        DOX(mg/L)
                                    A:N⁃cadherin;B:p⁃MEK;C:p⁃ERK;DOX 0 mg/L为对照组,两组比较,P < 0.05,n=3。
                                                                                  *
                               图4 不同浓度的DOX处理MC3T3⁃E1细胞2 d后Western blot检测蛋白的表达情况
                Figure 4  MC3T3⁃E1 cells were treated with different concentrations of DOX for 2 days and the expression of the indicated
                        proteins was detected by Western blot



                A                               B                              C
                 U0126    0     5     10          U0126   0     5     10          U0126  0      5     10
                (μmol/L)                        (μmol/L)                        (μmol/L)
                N⁃cadherin                140 kDa  p⁃MEK                  45 kDa  p⁃ERK                  42/44 kDa

                  GAPDH                   37 kDa  GAPDH                   37 kDa  GAPDH                  37 kDa

                       2.0      *  *                    1.5     *  *                    1.5      *  *
                      N⁃cadherin蛋白相对表达量  1.5           p⁃MEK蛋白相对表达量  1.0               p⁃ERK蛋白相对表达量  1.0



                       1.0
                                                        0.5
                                                                                        0.5
                       0.5

                         0                               0                                0
                             0    5   10                      0    5   10                     0    5   10
                             U0126(μmol/L)                    U0126(μmol/L)                   U0126(μmol/L)
                   A:N⁃cadherin的蛋白表达情况及其相对灰度值;B:p⁃MEK蛋白表达情况及灰度值;C:p⁃ERK蛋白表达情况及灰度值;U0126 0 μmol/L为对
                照组,P < 0.05,n=3。
                    *
                                    图5  用U0126处理MC3T3⁃E1细胞后Western blot检测蛋白的表达情况
                Figure 5  MC3T3⁃E1 cells were treated with U0126 for 2 days and the expression of the indicated proteins was detected by
                        Western blot


                现较多的红色钙结节,成不规则片状或散在分布;
                                                                  3 讨    论
                DOX+U0126 组,红染率低于 DOX 处理组,但高于
                U0126 处理组(P < 0.05,图 7)。这一结果提示,                       在 MM 细胞与骨骼微环境的相互作用过程中,
                MEK/ERK 通路参与 MC3T3⁃E1 细胞成骨分化的调                    肿瘤细胞可引起微环境中多种细胞和非细胞成分
                节,而DOX通过MEK/ERK通路来调节MC3T3⁃E1细                     异常,其中成骨细胞成骨功能和分化的受损尤其明
                胞的成骨分化。                                           显 [2,10] 。即使MM患者经有效治疗后,成骨细胞等的
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