Page 28 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第1期
· 22 · 10.5 南 京 医 科 大 学 学 报 10.0 2023年1月

16.0
10.0
FIS1基因表达水平 9.5 EZR基因表达水平 10.0 * COL7A1基因表达水平 15.5 * RPL5基因表达水平 9.5 *
9.0
9.0
9.5
8.5
8.5
9.0
15.0
8.0
8.0
8.5
*
7.5
8.0
7.0
7.0
14.0
7.5 14.5 7.5
对照组 caspase⁃3 对照组 caspase⁃3 对照组 caspase⁃3 对照组 caspase⁃3
抑制剂组 抑制剂组 抑制剂组 抑制剂组
MAP4基因表达水平 13 9 * SNRPB基因表达水平 8.0 * CEBPB基因表达水平 14 * CTNNB1基因表达水平 15.8 *
15.6
12
7.8
12
15.4
11
7.6
15.2
7.4
10
10
15.0
7.2
14.6
6.8
7 8 7.0 8 14.8
对照组 caspase⁃3 对照组 caspase⁃3 对照组 caspase⁃3 对照组 caspase⁃3
抑制剂组 抑制剂组 抑制剂组 抑制剂组
与对照组相比，P < 0.05。
*
图3 定量PCR验证候选基因的表达
Figure 3 Quantitative PCR to verify the expression of candidate genes
2.4 候选基因的定量PCR验证 2.45）%、（7.21±0.98）%、（22.24±1.21）%、（12.17±1.67）%
由图3可见，显著性排名前10的DEG中，FIS1、 和（6.90±0.48）%。caspase⁃3 抑制剂组凋亡率低于
EZR、COL7A1、RPL5、MAP4、CEBPB 和 CTNNB1 对照组（P < 0.05），CTNNB1 组凋亡率高于对照组
mRNA 在 对 照 组 细 胞 中 高 表 达（P 均 < 0.05）， （P < 0.05）；caspase⁃3 抑制剂+CTNNB1 组凋亡率高
SNRPB mRNA 在对照组细胞中低表达（P < 0.05）， 于 caspase⁃3 组（P < 0.05），但低于对照组（P < 0.05，
与芯片结果一致。 图4B、C）。
2.5 CTNNB1 对 caspase⁃3 抑制剂处理的氧化应激 2.6 CTNNB1 对 caspase⁃3 抑制剂处理的氧化应激
状态HK⁃2细胞增殖和凋亡的影响 状态HK⁃2细胞ROS的影响
由图 4A 可见，对照组、caspase⁃3 抑制剂组、 由图5可见，对照组、caspase⁃3抑制剂组、CTN⁃
CTNNB1组、caspase⁃3抑制剂+CTNNB1组和caspase⁃3 NB1 组、caspase⁃3 抑制剂+CTNNB1 组和 caspase⁃3
抑 制 剂 + CTNNB1 NC 组 的 细 胞 增 殖 率 为 分 别 抑制剂+CTNNB1 NC 组细胞中 ROS 平均荧光强度
（125.20±5.24）%、（166.21±3.85）%、（116.43±3.08）%、 分别为 1 615±112、1 212±69、1 798±85、1 476±101
（140.27±7.31）%和（170.45±8.23）%。结果显示， 和 1 179±76。caspase⁃3 抑制剂组 ROS 水平较对照
caspase⁃3 抑制剂组增殖率高于对照组（P < 0.05）； 组降低（P < 0.05），CTNNB1组ROS水平较对照组升
CTNNB1 组增殖率低于对照组（P < 0.05），caspase⁃3 高（P < 0.05），caspase⁃3 抑制剂+CTNNB1 组细胞中
抑制剂+CTNNB1 组增殖率较 caspase⁃3 抑制剂组低 ROS 水平较 caspase⁃3 抑制剂组高（P < 0.05），但仍
（P < 0.05），但仍高于对照组（P < 0.05）。 高于对照组（P < 0.05）。

Caspase⁃3抑制剂组cleaved⁃caspase⁃3和cleaved⁃
3 讨 论
PARP 蛋白水平低于对照组（P < 0.05）；CTNNB1 组
cleaved⁃caspase⁃3 和 cleaved⁃PARP 蛋白水平高于对 我们在对照组和 caspase⁃3 抑制剂组中共筛选
照 组（P < 0.05）；caspase ⁃ 3 抑 制 剂 + CTNNB1 组 到 185 个 DEG，可见无论在 caspase⁃3 抑制剂处理
cleaved⁃caspase⁃3 和 cleaved⁃PARP 蛋白水平均较 还是氧化应激状态下，肾小管上皮细胞内时刻都
caspase⁃3 抑制剂组高（P < 0.05），但低于对照组 在发生着大量复杂的生物学事件。KEGG 分析主

（P < 0.05）。对照组、caspase⁃3 抑制剂组、CTNNB1 要富集到的有 RAC1 信号通路、RNA 代谢通路、
组、caspase⁃3 抑制剂+CTNNB1 组和 caspase⁃3 抑制 RhoA 信号通路、糖尿病途径和细胞蛋白的凋亡裂

剂+CTNNB1 NC 组细胞的凋亡率分别为（16.35± 解通路。CTNNB1 基因的编码产物——β⁃连环蛋