Page 29 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第1期 骆长亮，张秋红，孙林春. Caspase⁃3抑制剂所致氧化应激状态下肾小管上皮细胞差异表达
2023年1月 基因的筛选及功能验证［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（01）：017-026 · 23 ·

A 200 B
*
*# 3 4 * 4 *
150
（ % ） * 3 *# 3
细胞增殖率 100 caspase抑制剂+CTNNB1组 caspase抑制剂+CTNNB1 NC组 cleaved⁃caspase 蛋白相对灰度值 2 1 * cleaved⁃PARP 2 1 * *#

50

0 caspase抑制剂组 CTNNB1组 0 0
CTNNB1组
对照组
CTNNB1组
CTNNB1组
对照组
对照组
caspase抑制剂+CTNNB1组
caspase抑制剂+CTNNB1 NC组
caspase抑制剂+CTNNB1组
caspase抑制剂+CTNNB1组
caspase抑制剂+CTNNB1 NC组
caspase抑制剂+CTNNB1 NC组
caspase抑制剂组 cleaved⁃caspase⁃3 对照组 25 kDa caspase抑制剂组 caspase抑制剂组
112 kDa
cleaved⁃PARP
C GAPDH 42 kDa
对照组 caspase⁃3抑制剂组
10 4 10 4
10 3 10 3 25
*
PI 10 2 PI 10 2 20
（ % ） 15 *#
10 1 10 1
10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 *
ANEXIN V ANEXIN V 细胞凋亡率 5
CTNNB1组 caspase⁃3抑制剂+CTNNB1组 caspase⁃3抑制剂+CTNNB1 NC组
0
caspase抑制剂组
10 4 10 4 10 4 对照组
caspase抑制剂+CTNNB1 NC组
10 3 10 3 10 3 CTNNB1组
PI 10 2 PI 10 2 PI 10 2 caspase抑制剂+CTNNB1组
10 1 10 1 10 1
10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
ANEXIN V ANEXIN V ANEXIN V
A：细胞增殖；B：cleaved⁃caspase⁃3和cleaved⁃PARP蛋白表达；C：细胞凋亡；与对照组相比，P < 0.05；与caspase⁃3抑制剂组相比，P < 0.05（n=5）。
*
#
图4 各组细胞增殖和凋亡检测
Figure 4 Detection of proliferation and apoptosis in each group

白（β⁃catenin）是经典 Wnt 信号通路的核心组分， 通路也能激活 Nox4，通过产生 ROS 产物引起氧化
Wnt/β⁃catenin 通路是一条非常重要的信号通路， 应激，都从侧面印证了β⁃catenin 与氧化应激的关
在人类诸多生理活动和病理过程中都有广泛的调 系。Wnt/β⁃catenin 通路与肾脏疾病的关系已经有
节作用。在结肠癌中，活化 caspase⁃3 能特异性降 大量研究，Zhou 等 ［14］ 报道 Wnt/β⁃catenin 能将氧化
解β⁃catenin，抑制 Wnt/β⁃catenin 通路诱导的细胞凋 应激与肾足细胞损伤和蛋白尿联系起来。考虑到
亡 ［11］ ；而抑制Wnt/β⁃catenin 通路信号能加速H2O2诱 Wnt/ β ⁃catenin 通 路 在 人 类 疾 病 中 的 重 要 作 用 、
导的成纤维细胞凋亡 。 β⁃catenin 与氧化应激的关系，以及芯片和定量 PCR
［12］
H2O2诱导ROS依赖的信号转导能抑制β⁃catenin 结果都证实了其在H2O2处理的HK⁃2细胞中异常表
下游转录因子的活性 ［13］ 。在恶性肿瘤中存在 达，提示β⁃catenin可能参与氧化应激状态下肾小管
β ⁃catenin 信号转导和 ROS 积累的复杂相互作用。 细胞损伤，值得更多研究。
可见，β⁃catenin 和氧化应激存在关联。β⁃catenin 参 我们关注的重点是β⁃catenin 对 ROS 和线粒体
与了RAC1信号通路和RhoA信号通路，过度激活的 途径的细胞凋亡之间的调控。用 Ac⁃DEVD⁃CHO

RACl 参与了氧化应激和炎症反应过程，而 RhoA 联合 H2O2处理 HK⁃2 细胞，细胞中 ROS 水平较对照