Page 8 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第1期
· 2 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年1月

infiltration in lung tissues of COPD patient. RT⁃qPCR and ELISA results showed that A2M levels were down⁃regulated in peripheral
blood of COPD patients，and were correlated with lymphocytes and monocytes in COPD patients. ROC curve analysis showed that A2M
had a diagnostic value for COPD. Further pathway analysis suggested that A2M might be associated with macrophages and other
regulatory immune pathways. Knocking down of A2M in M2 macrophages resulted in decreased expression of Arg⁃1. Conclusion：The
expression of A2M is decreased in lung tissue and peripheral blood of COPD patients and is closely related to the immune cell counts
and immune cell infiltration in COPD patients. A2M may play an important role in the polarization of macrophages to the M2 phenotype.
［Key words］ chronic obstructive pulmonary disease；alpha 2 macroglobulin；immune cell infiltration
［J Nanjing Med Univ，2024，44（01）：001⁃011，059］

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary 本研究从GEO数据库中筛选出一个COPD微阵
disease，COPD）是一种以不完全可逆的气流阻塞为 列数据集。在健康样本和COPD样本之间进行差异
特征的肺部状态。有呼吸困难、慢性咳嗽或咳痰， 表达基因（differential expressed gene，DEG）分析。
存在反复发作的下呼吸道感染史或有危险因素史 鉴定 A2M 在 DEG 里的表达，使用 CIBERSORT 分析
的患者均应考虑 COPD。目前 COPD 的诊断和气流 免疫细胞基因表达，CIBERSORT成功地鉴定和定量
受限的严重程度分级主要由肺功能检查确定，吸入 了在COPD和对照样本中渗入肺实质的各种免疫细

支气管舒张剂后1秒钟用力呼气量（forced expiratory 胞，此外，本研究还描述了免疫细胞和 A2M 之间的
volume in one second，FEV1 ）/用力肺活量（forced vital 关系。
capacity，FVC）<0.7 提示存在不完全可逆的气流受
1 对象和方法
［1］
限即确诊 COPD 。COPD 发病机制复杂且存在多
［2］
种表型 ，当前的诊断方法无法解释COPD 的病因， 1.1 对象
难以确定COPD特异性治疗靶点。大量研究发现生 本研究选取 2022 年 1 月—2023 年 1 月于南京
物学标志物与疾病的发生、发展密切相关 ［3-4］ ，因此 医科大学附属常州第二人民医院呼吸与重症医学
在高危人群和 COPD 患者中寻找分子生物学标志 科就诊的 25 例稳定期 COPD 患者作为研究对象。
物，有助于COPD的诊断与治疗。 入选标准：①符合 2022 年 COPD 全球倡议中的诊
COPD 的特征在于下呼吸道的异常免疫反应， 断标准 ［12］ ；②临床稳定至少 3 个月，无急性发作；
其进展与形成淋巴滤泡的先天和适应性炎症免疫细 ③年龄≥40 岁。这些患者的影像学检查结果符合
胞对肺的浸润有关。近年来，越来越多的证据强调了 COPD，吸入β2 激动剂后，支气管扩张试验呈阴性，
免疫细胞浸润在COPD发生发展中的重要性 ［5-7］ 。因 FEV1/FVC<70%。本研究中所有 COPD 患者根据肺
此，在免疫细胞成分中寻找有效的 COPD 诊断生物 功能分为4组（Ⅰ：FEV1%pred≥80%；Ⅱ：50%≤FEV1%
标志物是一种很有意义的研究途径。我们前期研 pred<80%；Ⅲ：30%≤FEV1%pred<50%；Ⅳ：FEV1%
究表明α2 巨球蛋白（alpha 2 macroglobulin，A2M）是 pred<30%）。所有受试者均需排除感染、支气管扩
COPD的生物标志物且与炎症反应密切相关 ［8- 9］ ，本 张、结核病、哮喘、恶性肿瘤和其他混杂的炎症性疾
研究进一步探讨了 A2M 与 COPD 中免疫细胞的相 病，如关节炎、结缔组织疾病或炎症性肠病。另选
关性，并探究其潜在的功能及通路。 取本院同期进行体检的健康志愿者 26 例作为健康
A2M 是一种急性期蛋白，当与蛋白酶反应时， 对照组。入选标准：①年龄≥40岁；②肺功能正常。排
A2M被转化并获得与细胞因子、生长因子和细胞受 除标准为：①临床资料不完整；②有高血压、糖尿病、
体结合的能力 ［10］ 。因此，A2M在维持蛋白酶介导的 呼吸系统疾病、自身免疫性疾病等。本研究获得常
细胞因子和生长因子的稳态方面发挥重要作用。 州市第二人民医院伦理委员会批准（2022KY113⁃01），
此外，A2M还参与控制肺蛋白酶活性 ［11］ 。肺泡巨噬 所有参与者均签署知情同意书。
细胞在肺内局部合成 A2M 的能力以及 A2M 蛋白酶 1.2 方法
复合物的吞噬作用在减少肺蛋白酶负荷中可能发 1.2.1 采集血液样本
挥了重要作用。我们推测，A2M可能与免疫细胞的 用EDTA抗凝管收集患者和健康对照的静脉外
肺部浸润有关。 周血 10 mL，其中 5 mL 低速离心机 3 000 r/min 离心