Abstract:目的:探讨甲状旁腺全切加前臂移植术治疗慢性肾衰致重症继发性甲状旁腺功能亢进的临床疗效.方法:对1995年12月～2001年9月经此方法治疗的10例患者资料进行回顾性分析,并从定位诊断、手术适应证、围手术期处理等方面进行讨论.结果:10例患者共切除增生的甲状旁腺38枚,全部移植腺体成活,临床症状改善,各项化验结果逐步恢复正常.结论:对内科治疗无效的重症继发性甲状旁腺功能亢进进行甲状旁腺全切加前臂移植是一种安全、有效的治疗方法.

Abstract:目的:研究10例患者行"甲状旁腺全切(PTX)加前臂移植术"对红细胞生成素治疗肾性贫血的有益作用.方法:观察10例继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)患者手术前、后3～56个月平均血细胞比容(HCT)和重组人类红细胞生成素(rHuEPO)的使用剂量,同时检测血清全段甲状旁腺素(iPTH)并与术前3个月的HCT、rHuEPO的使用剂量作相关分析.结果:8例患者PTX 1个月后,血HCT开始上升,术后3个月,10例患者的平均HCT由术前(21.4±1.8)％升至(29.1±1.9)％,rHuEPO的平均剂量由术前每周(100.0±8.3) U/kg(60～150 U/kg)降至(70.4±6.1) U/kg(60～85 U/kg).随访2～5年,疗效稳定可靠.PTX前、后rHuEPO的剂量及HCT的各自改变差异均有显著性(P<0.05).iPTH也由术前(1 484.75±72.40) pg/ml降为(50.13±9.30) pg/ml.HCT与iPTH呈负相关.结论:PTX能明显改善慢性肾功能衰竭(CRF)患者合并SHPT的贫血,提高rHuEPO的疗效.

Abstract:目的:探讨慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠甲状旁腺细胞凋亡的变化以及钙三醇的调控作用.方法:研究对象为SD大鼠,分3组:A组:CRF组;B组:CRF加用钙三醇组,每天皮下注射钙三醇50 ng;C组:假手术对照组.术后8周,采用流式细胞术检测大鼠甲状旁腺凋亡细胞比率(APO)和细胞周期,同时检测血清肌酐(SCr)、Ca2+、P3-、碱性磷酸酶(ALP)、全段甲状旁腺素(iPTH)以及尿内生肌酐清除率(CCr).结果:A组和B组大鼠CCr均较C组下降了近一半;A组ALP和iPTH显著高于B组和C组(P<0.01),而B组和C组差异无显著性(P>0.05);A组APO、S期细胞比率(SPR)和增殖指数(PI)分别为(0.23±0.19)％、(11.99±2.73)％和(16.93±3.42)％,B组分别为(1.32±0.51)％、(2.95±1.58)％、(5.24±2.29)％,C组分别为(1.29±0.45)％、(0.73±0.46)％、(1.76±0.70)％,A组APO显著低于B组和C组(P<0.01),A组SPR和PI显著高于B组和C组(P<0.01),但B组SPR和PI仍高于C组(P<0.05).结论:5/6肾大部分切除大鼠甲状旁腺细胞过度增殖,至少部分与细胞凋亡减少有关,钙三醇可一定程度地抑制甲状旁腺细胞增殖和诱导细胞凋亡.

Abstract:目的:研究继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)患者甲状旁腺增生的临床意义.方法:7例对内科治疗抵抗的严重患者的甲状旁腺19枚,苏木精-伊红染色,光镜下统计单位面积甲状旁腺细胞数.结果:SHPT组甲状旁腺总重量比正常人明显增加约16.1倍,组织学呈弥漫性和结节性增生.SHPT组腺体平均细胞数是正常对照组的1.86倍,其中结节性增生比弥漫性增生细胞增殖更加旺盛(P<0.001).结论:在临床上对严重的SHPT患者进行甲状旁腺自身移植时应选用弥漫性增生的组织,最好选用重量较小的组织,以防术后复发.

Abstract:目的:探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)在家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia, FH)研究中的应用价值.方法:提取FH患者外周血基因组DNA,进行PCR-SSCP及DNA序列分析.结果:对1家2例临床诊断为FH的患儿及其父母从基因水平明确了诊断.LDL受体基因突变是位于第6外显子的移框突变.结论:PCR-SSCP可以从基因水平对FH患者明确诊断,并可对先证者家系成员早期诊断,以便提供咨询和指导.

Abstract:目的:探讨白细胞介素10(IL-10)在不同临床类型紫癜性肾炎(HSPN)发病中的作用.方法:应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及双抗体夹心ELISA法检测了40例HSPN患儿活动期和恢复期外周血单个核细胞(PBMC)在植物血凝素(PHA)刺激下IL-10 mRNA和蛋白水平的变化.结果:①HSPN活动期PBMC中IL-10 mRNA和蛋白水平均显著高于正常对照组[(0.48±0.12)比(0.39±0.10)和(1 023.90±158.78) pg/ml比(895.51±141.06) pg/ml,P分别＜0.01及0.05],恢复期与正常对照组相比差异无显著性[(0.42±0.13)比(0.39±0.10)和(941.25±165.36) pg/ml比(895.51±141.06) pg/ml,P均>0.05].②临床上表现为蛋白尿型、肾病综合征型及急性肾炎综合征型者,活动期PBMC中IL-10 mRNA和蛋白水平均显著高于正常对照组,而表现为单纯血尿型者与正常对照组相比差异无显著性.结论:HSPN患儿活动期IL-10表达异常且与临床类型有一定的关系.IL-10在其发病中具有一定的保护作用.

Abstract:目的:探讨细胞膜表面蛋白CD44在大鼠进行性肾小球硬化和肾小管间质损害中的作用.方法:应用原位杂交及彩色病理图像分析系统观察柔红霉素所致的大鼠进行性肾小球硬化模型不同时相肾组织中CD44 mRNA表达,及其与进行性肾小球硬化、肾小管间质损害病理形态学改变的关系.结果:大鼠肾小球硬化和肾小管间质损害中CD44 mRNA表达显著增高,主要位于足细胞、肾小囊上皮细胞、肾小管上皮细胞以及部分系膜细胞和内皮细胞.大鼠进行性肾小球硬化中肾小球内CD44 mRNA阳性细胞百分数增高,且与肾小球硬化程度正相关.结论:CD44可能在进行性肾小球硬化和肾小管间质损害的发病机制中发挥重要的作用.

Abstract:目的:检测胃粘膜病变组织的端粒酶活性,探讨端粒酶活化在胃癌发生发展中的作用,并阐明它的临床意义.方法:采用非放射性的PCR-ELISA法检测胃粘膜活检标本的端粒酶活性.结果:93例胃粘膜活检标本中,慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌的端粒酶阳性率分别为0％(0/10)、28.13％(9/32)、16.67％(2/12)、30.00％(3/10)、86.21％(25/29).胃癌组织端粒酶阳性率与性别、肿瘤部位、大体类型及组织学分类无明显相关.结论:端粒酶活性的检测对胃癌的诊断可能具有重要意义,有望成为一种理想的胃癌标志物.

Abstract:目的:通过测定异种肝细胞脾内移植后受体血清白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的浓度,初步探讨其排斥反应机理.方法:向用D-氨基半乳糖(D-GI)诱导的肝衰大鼠脾内移植豚鼠肝细胞.脾内注入生理盐水为对照.观察2周生存率,在术后不同时间作受体脾病理组织学检查及酶联免疫双抗体夹心法(Sandwich-ELISA)测定大鼠血清IL-2和TNFα的浓度.结果:2周生存率比较,移植组(80.0％)显著高于对照组(21.4％,P＜0.05).移植的肝细胞在移植早期(1～2天)消失,移植后第3天炎症细胞浸润显著增多.移植组与对照组大鼠血清IL-2、TNFα浓度均无显著差别(P＞0.05);与正常大鼠比较,差异亦无显著性(P＞0.05).结论:在异种肝细胞脾内移植中,细胞免疫的发生较迟和(或)较弱,移植受体血清IL-2及TNFα的浓度无显著变化.

Abstract:目的:探讨更完善的活体供肾的切取方式.方法:对1例母亲供肾亲属肾移植的供者实施腹腔镜活体供肾切取并随访供受体1个月.结果:供肾者无明显并发症,术后住院及恢复工作时间明显缩短,术后疼痛明显减轻;受者肾功能恢复良好.结论:腹腔镜活体供肾切取术是一种有效而安全的活体供肾切取方法.

Abstract:目的:研究帕金森病黑质多巴胺神经元的死亡机理.方法:用四甲基偶氮唑盐(MTT)法及流式细胞仪观察囊泡单胺类转运(VMAT)功能抑制对大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞凋亡的影响.结果:单独作用的VMAT抑制剂利血平对PC12细胞无毒性作用;超过一定浓度的多巴胺(0.3 mmol/L)对PC12细胞有毒性作用;利血平协同多巴胺明显增加多巴胺的毒性,使同样浓度的多巴胺诱发PC12细胞的凋亡率明显增加,致使较低浓度的多巴胺(0.15 mmol/L)就可降低PC12细胞生存率.结论:VMAT功能抑制引发了多巴胺的内源性毒性,进而诱发多巴胺神经元的凋亡,可较好地解释帕金森病的发病机理.

Abstract:目的:为将人γ -干扰素(huIFN-γ) 基因尽快用于临床基因治疗,寻求基因导入的有效方法.方法:利用阳离子脂质体Lipofectamine将huIFN-γ基因导入人大肠癌细胞株,利用PCR、RT-PCR对该基因的整合和表达进行鉴定,并对细胞培养上清中γ-干扰素的活性进行了检测.结果: 该基因已经有效地进入细胞内并实现了表达.结论:利用脂质体可以有效地将huIFN-γ基因导入肿瘤细胞内,基因表达的持续时间可以满足肿瘤基因治疗的需要.不同细胞株其上清中huIFN-γ的分泌量不同.

Abstract:目的:研究As2O3对哮喘豚鼠肺内核因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)表达的影响及其作用机制.方法:豚鼠30只随机分为3组,即对照组、哮喘组和As2O3(2 mg/kg)治疗组.采用免疫组织化学染色技术,即小鼠抗大鼠p65单克隆抗体(F-6)、生物素化马抗小鼠IgG、二氨基联苯胺(DAB)显色检测豚鼠气道壁NF-κB;计算机图像分析技术对气道壁NF-κB表达进行定量检测.结果:对照组豚鼠整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个NF-κB阳性(NF-κB+)细胞网络,其中支气管壁胞核NF-κB+细胞密度为(220±72)/mm2上皮面积;与对照组相比,哮喘组豚鼠气道壁胞核NF-κB+细胞密度显著增加(P＜0.01);哮喘豚鼠经As2O3处理后,气道壁胞核NF-κB+细胞密度显著下降(P＜0.01),但与对照组相比仍较高(P=0.018).结论:NF-κB激活增加是支气管哮喘重要的发病机制之一;下调肺内NF-κB激活细胞数量可能是As2O3治疗哮喘的一个重要机制.

Abstract:目的:探讨蛋白激酶C(PKC)信号传导系统在气管平滑肌张力调节中的作用及氯胺酮、咪唑安定对其的影响.方法:研究不同浓度的PKC激动剂PMA(3×10-7～3×10-5 mol/L)对静息状态下气管平滑肌张力的影响;研究两种浓度的PMA(3×10-6,3×10-5 mol/L)及特异性PKC阻滞剂H-7(3×10-5 mol/L)对乙酰胆碱(10-4 mol/L)诱发气管平滑肌收缩力的调节作用及H-7、氯胺酮、咪唑安定对PMA效应的抑制作用.结果:3×10-7～3×10-5 mol/L的PMA对静息状态下的气管平滑肌张力无明显影响,3×10-6 mol/L的PMA可明显增强乙酰胆碱诱发张力的峰值和平台值,然而3×10-5 mol/L的PMA并不能进一步增加乙酰胆碱的作用,张力平台值有所下降;3×10-5 mol/L的H-7可完全抵消3×10-6 mol/L的PMA效应.10-3 mol/L氯胺酮和10-4 mol/L咪唑安定和H-7有相似的效果.结论:PKC信号传导系统的激活并不能单独诱发离体气管平滑肌的收缩,但可使乙酰胆碱的收缩效应增加,氯胺酮和咪唑安定对PKC信号传导系统有抑制作用.

Abstract:目的:研究B细胞性非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织中CD44变异体CD44V6的表达及其临床意义.方法:采用免疫组化方法,检测49例B淋巴细胞性NHL,6例淋巴结反应性增生的CD44V6表达情况.结果:B细胞性NHL CD44V6基因蛋白表达阳性率明显高于淋巴结反应性增生,CD44V6阳性表达与病理分期、恶性度有一定关系.结论:CD44V6与B细胞性NHL的发生、发展相关,可作为判断肿瘤预后的指标.

Abstract:目的:克隆IκB-α基因,构建IκB-α的真核表达载体.方法:RT-PCR扩增IκB-α的cDNA,然后将其克隆入真核表达载体pShuttle,并转入大肠杆菌JM109.结果:通过PCR和重组质粒酶切分析等方法,筛选出重组阳性克隆.结论:此重组质粒可用于真核表达等进一步研究.

Abstract:目的:观察大鼠中缝背核(DR)内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元向中央杏仁核(CeA)的投射,为进一步阐明一氧化氮(NO)参与情绪、疼痛、内脏心血管活动的中枢调节机制提供形态学资料.方法:用黄递酶(NADPH-d)组织化学染色结合辣根过氧化酶(HRP)逆行追踪技术,观察大鼠DR内向CeA投射的NOS阳性神经元的分布与形态.结果:DR内有一定数目的NOS/HRP双标阳性神经元,主要分布在外侧部与背正中部.结论:DR内有部分NOS阳性神经元向CeA投射,提示NO在DR至CeA上行感觉传导通路中起重要的神经递质作用.

Abstract:目的:了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶(NOS)变化与脑细胞凋亡的关系,探索阻断脑细胞凋亡的时间窗.方法:用线栓法建立局灶性脑缺血模型,大脑中动脉阻塞(MCAO)的时间分别为15、30、60、90、120 min,再灌注24 h.用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组化法,检测局灶性脑缺血再灌注后缺血中心区(顶叶皮层和尾壳核)NOS活性变化.用苏木精-伊红和TUNEL染色法检测缺血中心区脑细胞凋亡情况.结果:NOS阳性神经元数于30 min时增多最显著,90～120 min时急剧减少.各组凋亡细胞数随缺血时间延长而增多.结论:局灶性脑缺血再灌注过程中神经型NOS(nNOS)对缺血早期的脑损伤尤其是细胞凋亡起主要作用.

Abstract:目的:回顾性分析介入性经皮肝穿刺胆道内支架置入术治疗恶性梗阻性黄疸的技术与疗效.方法:对29例患者采用经皮肝穿刺胆道内支架置入术治疗恶性梗阻性黄疸.胆道梗阻部位位于胆总管9例、肝总管11例,左右肝管汇合部9例.结果:29例共置入金属内支架36枚,其中7例置入2枚.术后1周复查血清生化指标,总胆红素(TBIL)从术前的(483.7±191.8) μmol/L降至(221.3±131.7) μmol/L(P<0.001),碱性磷酸酶与丙氨酸转氨酶均下降明显(P均<0.001).3例于术后1个月内死亡,均与胆道引流无直接因果关系.术后1个月,3项血清生化指标均有更为显著的下降.跟踪随访23例,平均随访6.0个月,8例仍存活.随访期内14例(60.9％)TBIL降至正常范围;8例(34.8％)TBIL下降至术前的半数以下.结论:经皮肝穿刺胆道金属内支架置入术是对恶性梗阻性黄疸的一种安全、有效的姑息性治疗方法,可明显缓解黄疸,改善肝脏功能,提高生存质量,并可有限地延长生存时间.

Abstract:目的:了解南京市区妇女骨丢失率及骨吸收指标与绝经时间的关系,为早期防治骨质疏松提供依据.方法:随机测定576例妇女骨吸收指标尿吡啶酚(Pyr)浓度,其中233例同时测量腰椎2～4、左髋部股骨颈骨密度.按中青年、围绝经期、绝经早期、绝经晚期分4组.结果:①腰椎2～4、股骨颈骨密度年下降率:围绝经期与绝经前相似为0.6％、0.5％;绝经早期为2.3％、0.9％;绝经晚期为1.0％、1.6％.②围绝经期、绝经早期及绝经晚期与中青年尿Pyr/Cr(肌酐)比较均升高,差异有显著性(P＜0.01),后3组间比较差异无显著性(P＞0.05).各组骨质疏松伴发率分别为0、2.2％、22.8％、67.6％.③围绝经期及其后妇女中,骨量正常、骨量减少及骨质疏松3组间尿Pyr/Cr比较差异无显著性(P＞0.05).结论:①围绝经期及其后妇女骨吸收指标处于稳定的高水平.②围绝经期骨丢失率与绝经前相当;绝经早期妇女以松质骨为主的腰椎骨量丢失最快,以后下降处于稳定状态;随年龄增长,股骨颈骨量年丢失率逐渐增加.③骨密度与骨吸收指标之间无相关关系.

Abstract:目的:从乳腺癌患者淋巴结中分离和定向诱导培养扩增树突状细胞(DC),观察其经自身肿瘤细胞抗原冲击后对自身细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)杀伤活性的影响.方法:取手术切除肿瘤周围转移的淋巴结,提取单个核细胞,将贴壁生长的细胞用细胞因子基因重组粒巨集落生长因子(rhGM-CSF)、基因重组白介素4(rhIL-4)、基因重组α-肿瘤坏死因子(rhTNF-α)联合诱导培养DC,然后用自身肿瘤细胞抗原冲击DC并作用CIK,最后检测CIK杀伤3种靶细胞(自身乳腺癌细胞、K562和SGC-7901细胞)的活性.结果:乳腺癌患者转移淋巴结中的贴壁细胞,经细胞因子联合诱导培养,DC含量可达15.3％～37.0％.经自身肿瘤抗原冲击的淋巴结DC活化的CIK,杀伤自身肿瘤细胞活性达71.3％,单纯CIK为37.0％,两者比较差异有显著性(P<0.01);而对K562和SGC-7901细胞杀伤活性无明显差异.结论:肿瘤周围转移淋巴结贴壁细胞在体外能定向诱导扩增出大量DC;DC经自身肿瘤抗原冲击后能明显提高CIK对自身肿瘤细胞的杀伤活性.