Abstract:目的:研究B7-1、B7-2基因对肿瘤的免疫治疗作用.方法:应用转染有B7-1、B7-2基因的肝癌细胞株H22/B7-1、H22/B7-2,建立小鼠肝癌模型,观察小鼠成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节大小.结果:各实验组动物都发生肿瘤,接种H22/B7-1+H22/B7-2组成瘤率低,对照组动物肿瘤呈进行性生长;组间成瘤潜伏期不同,与对照组相比,凡接种有H22/B7-2的小鼠肿瘤形成有迟发性;接种转B7基因细胞的小鼠肿瘤生长都较对照组慢;同时接种H22/B7-1和H22/B7-的小鼠能负载大于107的肿瘤细胞.转基因细胞在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs的能力明显增强.结论:B7-1、B7-2都能增强肝癌细胞的免疫原性.B7-2在抗肿瘤早期发挥作用,B7-1随后起放大和调节作用.B7-1与B7-2联用效果优于单一应用.

Abstract:目的:分离、克隆卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白K8.1B全长cDNA,并将其置于真核细胞中进行表达.方法:用K8.1B基因设计一对PCR引物,其5'端分别引入BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.以佛波酯(TPA)刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增KSHV K8.1B编码序列,经双酶切后克隆进pcDNA3.1(+)载体中,构建含K8.1B cDNA的重组真核表达质粒.重组质粒经酶切鉴定、核酸序列测定和分析后转染人胚肾293细胞,经G418筛选获细胞克隆.用间接免疫荧光染色(IFA)检测K8.1B cDNA编码蛋白在293细胞中的表达状况.结果:RT-PCR分离、克隆的K8.1B cDNA全长501 bp,核酸序列分析显示,该基因与Genbank中已登记的K8.1B编码基因呈现100％同源性.经IFA证实该重组蛋白为KSHV K8.1B特异性蛋白.结论:KSHV包膜糖蛋白K8.1B编码cDNA在293细胞中获得了正确表达.

Abstract:目的:鉴定原核表达的重组急性传染性非典型肺炎(SARS)病毒M蛋白N端1～43氨基酸(aa)的抗原性,并筛选其B细胞表位.方法:Glutathione Sepharose 4B亲合层析柱纯化M融合蛋白,用SARS患者恢复期血清分别通过间接ELISA方法和Western blot鉴定M蛋白片段的抗原性.为了定位B细胞表位,进一步将M蛋白片段截短为部分重叠的2段表达,分别表达含M蛋白N端1～28aa、16～43aa的融合蛋白,通过Western blot检测B细胞表位所在位置.结果:获得了纯化的M融合蛋白;间接ELISA和Western blot结果均证实,M蛋白片段有很强的抗原性:并进一步明确B细胞表位位于M蛋白N端1～15aa片段中.结论:原核表达的SARS病毒M蛋白片段N端1～15aa含有一个很强的B细胞表位,这将有助于SARS诊断试剂的研制,也可为多肽疫苗的研制提供帮助.

Abstract:目的:研究丘脑室旁核(PV)、下丘脑室旁核(PVN)在迷走神经刺激(VNS)抑制癫癎发作的过程中c-fos蛋白表达的变化.方法:利用海人藻酸(KA)诱发大鼠癫癎,结合c-fos免疫组化,分对照组、VNS组、KA组、VNS+KA组观察PV、PVN内c-fos阳性细胞的数目变化.结果:VNS组PV、PVN内c-fos阳性细胞数高于对照组;VNS+KA组PV、PVN内c-fos阳性细胞数低于KA组.结论:PV、PVN可能参与了VNS抑制癫癎过程.

Abstract:目的:观察丙泊酚、咪唑安定在心肌缺血再灌注损伤(IR)时Fos蛋白表达的影响,从蛋白表达水平探讨其对心肌保护作用的机制.方法:健康SD大鼠36只,每组12只.分别给生理盐水(A组)、丙泊酚(B组)、咪唑安定(C组)静脉输注,在心肌缺血15 min后,恢复心肌血液灌注,分再灌注0、15、30、60、120、240 min 6个时相,各时相取2只大鼠,多聚甲醛灌注固定后取缺血心肌标本作石腊切片,免疫组化方法检测Fos蛋白表达,显微镜下观察阳性产物,拍片.结果:各组组内再灌注30、60、120 min阳性表达灰度值较再灌注0、240 min Fos蛋白表达明显增强(P＜0.05);A组再灌注30、60、120 min Fos蛋白表达均比B、C组增强(P＜0.05),统计学有显著性意义.结论:丙泊酚、咪唑安定对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用,能降低缺血再灌注心肌Fos蛋白表达,为心肌缺血再灌注损伤时安全可用的麻醉药,其作用与缺血再灌注时间有关,即在30～120 min内对缺血再灌注心肌有明显保护作用,这对临床选择合理时间窗用药有一定的指导意义.

Abstract:目的:研究依达拉奉对脑出血后神经功能缺损、细胞凋亡及caspase-3表达的影响.方法:SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组与治疗组,后2组分为6 h和1、3、5天4个亚组,每组5只,模型组与治疗组采用Ⅶ型胶原酶诱导脑出血模型,假手术组以等量生理盐水代替Ⅶ型胶原酶,治疗组予以依达拉奉3 mg/kg腹腔注射,每天1次.于6 h和1、3、5天观察大鼠神经行为学评分,应用TdT介导的原位末端标记(TUNEL)法标记断裂的DNA片段检测凋亡细胞,免疫组化方法测定caspase-3阳性细胞数.结果:与模型组比较,依达拉奉干预后3天和5天大鼠神经行为学评分明显减少(P＜0.05),1、3、5天时caspase-3阳性细胞数明显减少(1天和3天P＜0.05,5天P＜0.01),TUNEL阳性细胞数于3天和5天时明显减少(3天P＜0.05,5天P＜0.01).结论:依达拉奉能有效减轻脑出血后的细胞凋亡,改善神经功能缺损症状.

Abstract:目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)的干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-10、干扰素-γ诱生蛋白(IP)-10和IL-12的表达水平及环孢素A(CsA)和环磷酰胺(CY)对其的影响.方法:应用酶联免疫吸附法检测血清及PBMCs培养上清上述细胞因子水平;运用流式细胞术检测CD4+T细胞中分泌IFN-γ和分泌IL-10的细胞百分率.结果:SLE患者血清及PBMCs培养中IFN-γ、IL-10、IL-12和IP-10水平增高,PBMCs中表达IL-10的CD4+T细胞比例明显增高(P＜0.05),表达IFN-γ的CD4+T细胞的比例亦有所增高;CsA及CY均能抑制SLEPBMCs培养中IL-10水平,并对PHA刺激下的IFN-γ、IP-10和IL-12分泌增高有抑制作用,且CsA的抑制作用更为显著;CsA和CY还能抑制PBMCs中表达IFN-γ及表达IL-10的CD4+T细胞的比例增高,且CsA的抑制幅度更大.结论:SLE患者体内存在细胞因子网络失调.CsA与CY均能干扰SLE的细胞因子网络失调的免疫病理过程,且CsA的调节作用更为显著.

Abstract:目的:建立乙型肝炎病毒(HBV)变异基因诊断芯片,对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中出现的肝炎病毒P基因区YMDD变异进行快速准确的检测诊断.方法:设计特异性寡核苷酸探针.用点样法制备HBV变异基因诊断芯片.选择住院患者30例服用拉米夫定后,HBVDNA转阴[＜500拷贝(opies/ml)]68周后又反跳≥5 000 copies/ml的患者进行基因芯片杂交检测.同时用PCR直接测序法对30例患者血清标本进行双盲HBVDNA聚合酶活性区域测序对照.结果:30例服药后HBVDNA反跳患者中基因芯片测得HBV YMDD变异21例,其中YVDD变异11例,YIDD变异10例.直接序列测定发现有核苷酸A741变为G,使氨基酸由蛋氨酸552变为缬氨酸(氨基酸基序由YMDD变为YVDD)11例,有6例核苷酸A669变为C,使氨基酸由亮氨酸528变为蛋氨酸;核苷酸G743变为T,使氨基酸由蛋氨酸552变为异亮氨酸(氨基酸基序由YMDD变为YIDD)10例.其中有3例伴有核苷酸T781变为C,使氨基酸由亮氨酸565变为脯氨酸.其结果与基因芯片完全一致.结论:HBV变异基因诊断芯片可以同时检测YVDD、YIDD变异,同PCR直接测序法比较,准确率达100％,无假阳性.

Abstract:目的:探讨罗哌卡因对乙酰胆碱(ACH)诱发兔离体气管平滑肌收缩的影响及其作用机制.方法:取兔气管环,浸浴在克-亨氏营养液(K-H液)中,气管一端固定张力换能器,每个标本先用10-4mol/L ACH收缩,然后使其回到基线,加入药物测定其对ACH诱发的离体气管平滑肌收缩的影响.结果:10-3 mol/L罗哌卡因对ACH诱发的收缩可产生明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01).在2 min左右张力是对照组的70％,10 min左右张力降至基线,β阻滞剂普奈洛尔对罗哌卡因的作用没有明显影响.而钙通道阻滞剂地尔硫(艹卓)、佩尔地平可加强罗哌卡因的气管平滑肌舒张效应.结论:10-3mol/L罗哌卡因对兔离体气管平滑肌具有较强的舒张作用,其作用机制可能和阻滞钙通道有一定的关系.

Abstract:目的:探讨地尔硫(艹卓)对维库溴铵肌松时效的影响.方法:30例ASA Ⅰ～Ⅱ级择期手术的全麻患者,随机分为3组,每组10例.3组患者均行静脉快速诱导气管内插管,Ⅰ组静注芬太尼5 μg/kg,异丙酚2 mg/kg,和维库溴铵0.1 mg/kg(2×ED95)诱导,气管插管;Ⅱ组先缓慢静注地尔硫(艹卓)0.05 mg/kg,3 min后静注与Ⅰ组同等剂量的诱导用药,气管插管.Ⅲ组先缓慢静注地尔硫(艹卓)0.1 mg/kg,3 min后静注与Ⅰ组同等剂量的诱导用药,气管插管.Ⅱ、Ⅲ组中,静注地尔硫(艹卓)3 min后收缩压下降15％以上的病例不纳入研究,每组各选10例参与研究.3组均以异丙酚维持麻醉,用Biometer加速度仪监测肌松情况.结果:Ⅰ组的无反应期为(26.5±5.5)min,Ⅱ、Ⅲ组的无反应期分别为(35.2±4.2)min和(36.4±7.2)min,Ⅱ、Ⅲ组明显延长于Ⅰ组(P＜0.01),而Ⅱ组与Ⅲ组间无统计学差异;Ⅰ组的临床作用时间为(37.4±5.8)min,Ⅱ、Ⅲ组的临床作用时间分别为(48.5±4.4)min和(54.5±8.9)min,Ⅱ、Ⅲ组显著长于Ⅰ组(P＜0.01),Ⅱ组短于Ⅲ组,但无统计学意义:起效时间与恢复指数各组间无统计学差异.结论:地尔硫(艹卓)能延长维库溴铵的无反应期与临床作用时间.

Abstract:目的:通过检测幽门螺杆菌(Hp)感染儿童胃黏膜中白细胞介素(IL)-12、IL-12 mRNA及IL-10、IL-10mRNA的变化,对Hp感染过程中细胞免疫反应进行研究.方法:胃镜下取胃窦黏膜活检标本,用ELISA法和RT-PCR定量法测定胃窦黏膜中IL-12、IL-10和IL-12mRNA、IL-10mRNA的表达量.结果:Hp阳性者胃黏膜中IL-12和IL-12mRNA分别为(66.42±15.15)pg/mg蛋白、(59.21±15.03)％;Hp阴性患儿胃黏膜中IL-12和IL-12mRNA分别为(22.22±8.79)pg/mg蛋白和(17.94±7.39)％.Hp阳性组明显高于Hp阴性组,两组比较差异有显著性(P＜0.01);Hp阳性患儿胃黏膜中IL-10和IL-10 mRNA分别为(2.79±1.29)pg/mg蛋白和(12.54±4.37)％;Hp阴性患儿胃黏膜中IL-10和IL-10 mRNA分别为(6.94±2.97)pg/mg蛋白和(31.21±13.47)％.Hp阳性组明显低于Hp阴性组,两组比较差异有显著性(P＜0.01);但IL-12、IL-10在不同炎症程度的胃黏膜中的表达差异无显著性(P＞0.05).结论:Hp阳性胃炎患儿胃黏膜IL-12分泌增高,IL-10降低,提示在Hp感染性胃部疾病中选择TH1为优势应答.

Abstract:目的:研究孕妇孕晚期营养素摄入与新生儿出生体重的关系.方法:调查宫内发育迟缓(IUGR)组、巨大儿组和正常儿组孕妇孕晚期连续3日营养素摄入量,并对孕晚期营养素摄入量及父母身高体重等因素和新生儿出生体重作相关性检验和多元回归分析.结果:孕晚期巨大儿组热能摄入、碳水化合物、蛋白质、锌、硒摄入量明显高于正常儿组(P＜0.05),IUGR组蛋白质、硒、核黄素、胆固醇、动物性蛋白、动物性脂肪、动物性维生素A、肉禽鱼来源铁、动物性来源热能的摄入量明显低于正常儿组(P＜0.05),而钙的摄入量明显高于正常儿组(P＜0.05).巨大儿组孕妇身高、孕前体重、产妇实足年龄均显著高于正常儿组(P＜0.05);IUGR组的胎龄和配偶体重明显低于正常儿组(P＜0.05).对影响新生儿体重的上述独立因素作多元逐步回归分析,得到方程:Y(出生体重)=-7079.359+16.22 X1(蛋白质)+30.78 X2(孕前体重)+25.85X3(胎龄);R2=0.454.结论:孕晚期蛋白质摄入量、母亲孕前体重、胎龄对新生儿出生体重有显著影响.

Abstract:目的:总结应用Snodgrass手术方式(尿道板纵切卷管尿道成形术)治疗小儿尿道下裂的经验.方法:在26个月中对18例尿道下裂患儿施行Snodgrass手术.患儿年龄19个月至14岁,其中阴茎体型15例,阴茎阴囊型3例;3例为尿道成形手术失败患儿,5例患儿阴茎下弯先行阴茎背侧折叠术.结果:术后随访4～28个月,手术治愈15例(833％),术后并发尿瘘3例(16.7％),均已修补成功.结论:Snodgrass手术可应用于多种类型的尿道下裂.手术操作简便易行,手术成功率高,易掌握推广.

Abstract:目的:总结与评价种植体支持的覆盖义齿临床应用的经验和效果.方法:用种植体支持的杆-卡或球-帽附着体为20例全口或部分无牙颌患者行种植体支持的覆盖义齿修复,共植入62枚种植体,随访观察1～6年,定期摄X线片及口腔检查,观察种植体骨愈合及口腔黏膜情况,并对患者进行满意度调查分析.结果:观察期内无种植体松动、脱落,X线片显示所有种植体无异常骨吸收;满意度分析显示:与旧义齿相比食物受限、咀嚼无力、疼痛、松动组差异有显著性∽＜0.05),美学和语言组差异无显著性(P＞0.05).结论:种植体支持的覆盖义齿稳固,美观,咀嚼功能强,对重度牙槽嵴萎缩的无牙颌患者是一种行之有效的修复方法,患者满意度较高.

Abstract:目的:研究Phadiatop在诊断变态反应性(变应性)鼻炎中的应用价值.方法:以常年性变应性鼻炎的患者168例作为试验组,另取60例健康成人作为对照组1,60例非鼻科疾病非变应性疾病的同期我科患者为对照组2,分别对他们进行血清Phadiatop检测、变应原皮肤针刺试验、变应原鼻激发试验、鼻分泌物涂片检查嗜酸粒细胞.所得结果均进行统计学处理.结果:Phadiatop检测结果在变应性鼻炎组和对照组1、2之间均存在显著性差异(阳性率分别为83.93％和3.33％及5％,P＜0.01).变应性鼻炎组Phadiatop检测阳性率(83.93％)明显高于变应原皮肤针刺试验结果(70.83％)、变应原鼻激发试验(50.60％)、鼻分泌物涂片检查嗜酸性粒细胞(56.55％),P＜0.01.结论:Phadiatop检测能初步明确患者是否存在过敏反应,是一种较好的变态反应性疾病过筛试验,阳性率显著高于变应原皮肤针刺试验、变应原鼻激发试验、鼻分泌物涂片检查嗜酸粒细胞.且仅需抽血检查,患者痛苦少,无风险,依从性高,具有良好的临床使用价值.

Abstract:目的:探讨独生和非独生武警新兵的心理健康状况的差异,为部队的教育、训练提供科学的依据.方法:对253名入伍6个月、演习后1周的士兵进行抑郁自评量表(SDS)、艾森克人格问卷(EPQ)、多伦多述情量表(TAS)、自杀问卷(QSA)、防御方式问卷(DSQ)、A型行为问卷调查.结果:武警新兵中独生子女和非独生子女之间在抑郁自评分、A型行为的时间匆忙感因子、防御问卷的掩饰因子方面存在差异.结论:武警新兵心理健康状况良好,部队心理教育应加强自我认知教育、挫折心理应对和意志品质信心的干预、人际交往的心理调试,通过沟通、合作、互助来增强信任、凝聚力,从而加强战斗力.