摘要:目的：通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术构建卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(lecithin-cholesterolacyltransferase,LCAT)基因敲入C57BL/6小鼠并与肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠配繁得到肝脏特异性敲入Lcat基因C57BL/6小鼠模型。为研究Lcat基因在肝脏相关代谢疾病发生机制的研究提供动物模型。方法：利用CRISPR/Cas9技术构建Lcat基因敲入小鼠；利用肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠与Lcat基因敲入小鼠交配得到肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠；通过PCR法鉴定小鼠的基因型 ；利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)技术验证Lcat基因在mRNA和蛋白水平的表达。结果：PCR结果显示肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠的构建成功；qPCR结果显示Lcat基因在肝脏中特异性高表达；WB结果显示LCAT蛋白在肝脏特异性敲入Lcat小鼠肝脏中有明显更高的表达。结论：成功构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠,为在动物水平探索Lcat基因在肝脏相关代谢疾病中的功能及相关发病机制提供研究平台。
