目的:探讨一种制备、纯化重组腺辅助病毒(rAAV)载体的有效方法。方法:以质粒PDG和含有人apoAIcDNA的AAV载体共转染293T细胞,继以Iodixanol密度梯度离心结合肝素亲和层析法分离、纯化,斑点杂交鉴定rAAV病毒颗粒数;并以含人apoAIcDNA的rAAV感染C2C12细胞。结果:rAAV颗粒数为7×1010/ml;rAAV成功介导了人apoAIcDNA在C2C12细胞中的表达并持续了30天,在分化为肌管细胞后仍有此表达能力。结论:本实验采取的制备、纯化rAAV的方法简便、高效,rAAV成功介导apoAI基因在肌源性细胞C2C12中的表达。
王立峰,范乐明,陈丙莺.重组腺辅助病毒载体的制备、纯化及其介导的基因转移[J].南京医科大学学报(自然科学版),2001,21(03):