摘要:目的:克隆爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因,进一步研究其基因工程疫苗.方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出EBV B95.8株LMP2A全部编码蛋白的基因,并克隆至载体pGEM-T中,通过α-插入失活、PCR及EcoR Ⅰ、Sma Ⅰ限制性内切酶双酶切等鉴定重组质粒;采用Sanger双脱氧终止法测定cDNA片段的核苷酸序列.结果:克隆出LMP2A第1个外显子到第8个外显子的全部编码蛋白的cDNA,测序结果与EB病毒B95.8原型株LMP2A cDNA作同源比较,完全一致.结论:本实验克隆了LMP2A基因的全部编码蛋白的cDNA全长片段.
