摘要:目的:在人外周血中有效地诱导、培养树突状细胞(dendriticcells,DC),并鉴定其表面分子的表达.方法:采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞,在6孔板上贴壁2h,然后吸去悬浮细胞,用粒细胞-巨噬细胞集落群体刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)细胞因子组合,刺激树突状细胞(DC)增殖、分化.用标有荧光素的单抗标记培养细胞,在激光共聚焦显微镜下拍摄标记有荧光素的细胞,在流式细胞仪上分析所培养的细胞.结果:该细胞直径在10～20μm,培养14天后,CD1a\++48％,CD83\++97％,CD40\++33％,人体主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ\++95％,CD80\++98％,CD86\++93％,CD83是DC的成熟标记.结论:该方法是一种可靠的诱导和培养DC的方法,对于乳腺癌患者还可通过动员等措施进一步提高DC的分离率.
