摘要:目的:构建及鉴定载入金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)的重组腺相关病毒载体.方法:应用基因重组的方法构建含全长TIMP-1的重组腺相关病毒骨架质粒(pAAV-TIMP-1),利用磷酸钙沉淀法将腺相关病毒载体质粒共转染入HEK293细胞中,分别装配成rAAV-TIMP-1和rAAV-hrGFP,将rAAV-hrGFP转导HT1080细胞测定重组病毒的滴度,Western blot方法检测rAAV-TIMP-1在HT1080细胞中的表达情况.结果:成功构建rAAV-TIMP-1,病毒滴度达到109TU/ml,转导细胞后,转导组TIMP-1的表达水平高于对照组.结论:构建的rAAV-TIMP-1,为基因修饰胰岛移植提供了新的手段.
