全人源抗MAGE-A1单链抗体的筛选及免疫活性鉴定
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Screening and identification of human ScFv antibody against MAGE-A1
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    目的:从全人源单链噬菌体抗体库中筛选出抗MAGE-A1特异性单链抗体并进行免疫活性鉴定.方法:以纯化MAGE-A1为抗原,经过五轮吸附-洗脱-扩增,从单链噬菌体抗体库中筛选出特异性抗MAGE-A1噬菌体抗体,ELISA、Dot Blotting检测其抗原结合能力,并对特异性较强的克隆提取质粒,表达可溶性抗体.Western Blotting、Dot Blotting、免疫细胞化学检测其抗原结合活性,非竞争ELISA法检测其亲和常数.结果:从单链噬菌体抗体库中筛选出噬菌体抗体并进行富集,经鉴定为抗MAGE-A1的特异性噬菌体抗体.抗MAGE-A1可溶性抗体分子量约为30 kD,与MAGE-A1特异性结合,其亲和常数约为1.432×106 L/mol.结论:所得全人源抗MAGE-A1单链抗体保留完整抗体分子结合抗原的特异性,免疫原性弱,是肿瘤导向治疗的理想载体.

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引用本文

丁贵鹏,朱进,朱毅,孙景军,张建平,冯振卿,管晓虹.全人源抗MAGE-A1单链抗体的筛选及免疫活性鉴定[J].南京医科大学学报(自然科学版),2005,25(7):

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