Construction of the recombinant adenovirus vector carrying antisense multidrug resistance-associated protein with AdEasy system
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目的:应用腺病毒载体AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)的重组腺病毒载体.方法:将MRP基因片段反向克隆到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183体内进行同源重组,经293细胞包装、扩增后得到携带反义MRP的重组腺病毒AdEasy-GFP-ASmrp.结果:成功地构建了携带反义MRP的重组腺病毒载体系统,经测定病毒滴度可达2.5×109efu/ml,感染复数(multiplicity of infection,MOI)为100时对SMMC7721/ADM细胞株转导效率可达90%以上.结论:腺病毒载体AdEasy系统能简便、有效地产生重组腺病毒,且生成的病毒滴度高、转导效率好,为进一步研究肝癌耐药机制及其逆转方式提供实验基础.
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陈琳,苟兴华,严律南,韩蕾,李德华,赵永恒,胡海洋,CHEN Lin, GOU Xin-hua, YAN Lü-Nan, HAN Lei, LI De-hua, ZHAO Yong-heng, HU Hai-yang.应用AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白的重组腺病毒的实验研究[J].南京医科大学学报(自然科学版),2005,25(11):