目的:研究融合型自杀基因Fcy::Fur联合5-FC对胶质瘤细胞株C6的杀伤效果.方法:扩增Fcy::Fur基因并构建Fcv::Fur基因重组逆转录病毒载体PLXSN-Fcv::Fur;载体转染包装细胞PT67获得高滴度病毒再转染鼠胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆;以MTT法和FCM法检测5-FC对Fcy::Fur转基因细胞的杀伤效应.结果:PCR法扩增出全长Fcy::Fur基因,经测序证实序列正确;PLXSN-Fcy::Fur滴度为3×106CFU/ml;RT-PCR检测显示Fcy::Fur转基因阳性克隆的C6细胞有效表达目的基因的mRNA;应用5-FC后FCM法检测到显著的凋亡峰,MTT法检测细胞有明显的杀伤效应.结论:融合型自杀基因Fcy::Fur联合5-FC可对胶质瘤细胞C6产生明显的杀伤作用.
FENG Lin-sen,封林森,HU Wei-xing,胡卫星,LU Chun,卢春,唐桂霞,TANG Gui-xia, SHI De-zhi,史德志,贾雪梅,JIA Xue-mei.逆转录病毒介导Fcy::Fur/5-FC基因治疗对脑胶质瘤杀伤作用的研究[J].南京医科大学学报(自然科学版),2006,26(1):