目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因.方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-T easy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因.酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养.用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性.结果:表达产物相对分子量约为32 kU,表达量约为7.0 mg/L,H0-1活性为2.386 U/(mg·h).结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠H0-1.
吴长毅,庞庆丰,曾因明,王俊科,杨光,高新跃,WU Chang-yi, PANG Qing-feng, ZENG Yin-ming, WANG Jun-ke, YANG Guang, GAO Xin-yue.大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达[J].南京医科大学学报(自然科学版),2006,26(2):