Cloning and sequence analysis of a novel deltamethrin-resistance associated gene NYD-MLC2 from Culex pipiens pallens
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目的:获取淡色库蚊抗药性相关基因NYD-MLC2的cDNA全长序列并鉴定其在抗性品系和敏感品系中的表达差异.方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗药性相关NYD-MLC2基因片段序列设计引物,采用快速扩增cDNA末端法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增NYD-MLC2基因3'、5'端,经对位拼接获得全长序列,并进行生物信息学分析;荧光定量PCR验证此基因在抗性和敏感品系的表达差异.结果:获得淡色库蚊NYD-MLC2 cDNA全长序列,开放阅读框为630·bp(GenBank/NCBI DQ140391),编码210个氨基酸.蛋白质序列分析显示,NYD-MLC2与冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)一个未知功能的蛋白同源性最高,为91%;实时荧光定量PCR结果显示,NYD-MLC2在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系的4.08倍.结论:获得淡色库蚊抗药性相关NYD-MLC2基因cDNA全长序列,并证实其在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达,提示NYD-MLC2与淡色库蚊溴氰菊酯抗药性相关,值得进一步研究.
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钱瑾,孙静,孙立新,孙艳,胡小邦,马磊,朱昌亮,QIAN Jin, SUN Jing, SUN Li-xin, SUN Yan, HU Xiao-bang, MA Lei, ZHU Chang-liang.淡色库蚊抗药性相关基因--NYD-MLC2基因的克隆与分析[J].南京医科大学学报(自然科学版),2006,26(7):