目的:获取淡色库蚊抗药性相关NYD-GBE基因cDNA全长序列并验证其在抗性品系和敏感品系中的表达差异.方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗性相关NYD-GBE基因片段设计引物,采用快速扩增cDNA末端法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增糖原分支酶基因5'、3'端,经对位拼接获得全长序列,并用相应的软件进行生物信息学分析.结果:获得淡色库蚊NYD-GBE cDNA全长序列,开放阅读框为2070 bp(GeneBank/NCBI DQ102 393),编码689个氨基酸.蛋白质序列分析显示,NYD-GBE与冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)和拟暗果蝇(Drosophila pseudoobscura)一个未知功能的蛋白同源性最高,为82%和72%,与人糖原分支酶的基因同源性次之为60%.荧光定量PCR结果显示,NYD-GBE在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系的19.7倍.结论:获得淡色库蚊抗药性相关NYD-GBE基因全长cDNA序列,并证实其在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达,提示NYD-GBE与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关,值得进一步研究.
孙静,钱瑾,孙立新,胡小邦,孙艳,马磊,朱昌亮,SUN Jing, QIAN Jin, SUN Li-xin, HU Xiao-bang, SUN Yan, MA Lei, ZHU Chang-liang.淡色库蚊抗性相关基因--NYD-GBE基因的克隆与分析[J].南京医科大学学报(自然科学版),2006,26(7):