稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立
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江苏省高校自然科学重大基础研究项目(06KJA31027)


Establishment of a stable GlyRα1-expressed HEK293 cell line
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    目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系-方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系-真核细胞中GlyRα1的表达分别用RT-PCR与Western blot方法检测-结果:在7株转染并经G418 反复筛选的HEK293细胞系中,有4株细胞系明显表达GlyRα1的mRNA及其蛋白质,其余3株细胞表达较弱或者没有表达-结论:用pcDNA3.1-GlyRα1转染的HEK293细胞经G418筛选,可成功建立GlyRα1稳定表达系-

    Abstract:

    Objective:To establish a stable glycine receptor alpha 1(GlyRα1)-expressed HEK293 cell line. Methods:The pcDNA3.1-GlyRα1 plasmid was constructed and transfected into HEK293 cells with lipofectin. The stable transfectants were screened by G418. The mRNA expression of GlyRα1 was identified using RT-PCR. The protein expression was analyzed by Western blot. Results:Selected by G418, 4 out of 7 transfected cell lines showed high expression level of GlyRα1, as demonstrated by RT-PCR and Western blot analysis. No or low expression of GlyRα1 was shown in other 3 cell lines. Conclusion:A HEK293 cell line stably expressing GlyRα1 was constructed successfully.

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引用本文

蒋玲琳,刘丽,朱含章,杨青,范乐明,陈琪.稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立[J].南京医科大学学报(自然科学版),2007,(7):647-650

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  • 收稿日期:2007-01-08
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