HCV不同编码区重组基因的蛋白表达丰度分析
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南京医科大学科技发展基金(NY0583);南京医科大学科技发展基金重点项目(07NMUZ034)


The abundance assay of protein expression from different recombinant gene fragments of hepatitis C virus
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    摘要:

    目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)不同基因片段重组载体在pET大肠杆菌系统中的蛋白表达情况-方法:分别将构建好的含有HCV C-NS3-NS5片段基因的pET重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,通过卡那霉素抗性筛选转化子-经过IPTG诱导表达相应的重组蛋白,通过Ni-NTA凝胶亲和层析纯化各目标蛋白,并分别计算各重组蛋白的浓度-结果:分别诱导表达含有HCVC-NS3-NS5片段基因的重组蛋白,各蛋白的浓度分别为:3.557(1型NS3)-4.238(6型NS3)-2.087(NS5)-1.490 g/L(C)-结论:在相同条件下,诱导表达含有HCV不同基因片段的重组载体,所得到的蛋白丰度存在差异-

    Abstract:

    Objective:To explore the abundance of recombinant proteins expressed by the pET/E.coli system from different HCV gene regions. Methods:The four recombinant plasmids(pET-C\pET-NS5\pET-NS3-1\pET-NS3-6) were all transformed into the E.coli BL21(DE3) and screened by Kanamycin(50 -滋g/ml). After induced by isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside(IPTG),the four expression products of fusion proteins were detected by 15% sodium dodecyl sulfate(SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE),and were purified by Ni-NTA Resin chromalography. The absorbances of the four recombinant proteins were measured by spectro photometer,and then the every protein concentration was calculated,respectively. Results:The four recombinant protein concentrations were 3.557(NS3 type 1),4.238(NS3 type 6),2.087(NS5) and 1.490 g/L(C),respectively. Conclusion:The result indicated that the abundance of four recombinant proteins was apparently different,derived by pET/E.coli system with different HCV gene fragments in the same condition.

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    引证文献
引用本文

乔伟振,孟继鸿,董 晨,谢 平,杨 燕,李小雯. HCV不同编码区重组基因的蛋白表达丰度分析[J].南京医科大学学报(自然科学版),2008,28(6):722-725766

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  • 收稿日期:2007-11-29
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