摘要:目的:构建pEGFP-HDGF 真核表达质粒,转入胶质瘤U87细胞中,对其表达及生物学活性进行检测-方法:PCR扩增HDGF编码区序列,构建pEGFP-HDGF真核表达质粒,脂质体转染U87细胞,G418筛选稳定表达单克隆,荧光显微镜观察绿色荧光,RT-PCR及Western blot检测融合蛋白在转染细胞中的整合及表达-通过U87细胞增殖实验对HDGF-GFP融合蛋白进行初步功能鉴定-结果:pEGFP-HDGF表达质粒转染U87细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光,RT-PCR-Western blot结果证实在U87细胞中有HDGF-GFP融合蛋白的表达-细胞增殖实验的结果显示,稳定表达pEGFP-HDGF的U87细胞生长速率明显高于对照空载组细胞(P=0.006)-结论:pEGFP-HDGF真核表达质粒构建成功,且HDGF对于胶质瘤U87细胞株有着生长刺激作用,这将有助于胶质瘤发生发展的分子机制研究-