体外鉴定甲状旁腺激素相关蛋白与Bmi-1的相互作用
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中加合作项目(KY1010111091110254)


Interaction between parathyroid hormone related protein with Bmi-1 in vitro
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    摘要:

    目的: 探索并鉴定甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)与Bmi-1的结合作用,为进一步研究PTHrP相关信号转导通路提供线索-方法:应用RT-PCR方法体外扩增鼠源性PTHrP基因,经测序后重组人原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确的pGEX-2TK/mPTHrP原核表达载体转化E.coli BL21,IPTG诱导表达-表达产物经活性鉴定,通过体外GST pull-down技术和免疫印迹实验,检测PTHrP与Bmi-1蛋白的相互作用-结果:成功构建和表达了重组载体pGEX-2TK/mPTHrP;通过体外蛋白质结合实验证实了PTHrP与Bmi-1蛋白可以相互作用-结论:PTHrP与Bmi-1蛋白之间存在相互作用,此结果为研究PTHrP介导的下游信号转导通路的机制奠定了基础-

    Abstract:

    Objective: To identify the interaction between protein PTHrP and Bmi-1, and to further explore the underlying signaling pathway of PTHrP. Methods: The PTHrP gene was amplified by RT-PCR and inserted into corresponding sites of expression vector pGEX-2TK, and the fusion protein expressed in E.coli BL21 induced by IPTG. After identifying, the interactions between protein PTHrP and Bmi-1 were characterized by GST pull-down assay and Western Blot. Results:The new recombinant expression vector pGEX-2TK/mPTHrP was constructed and expressed successfully our. experiment confirmed the interactions between the protein PTHrP and Bmi-1. Conclusion:PTHrP specifically interacted with Bmi-1, which may modulate PTHrP downstream signaling pathway.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

王子露,苗登顺,季 吉.体外鉴定甲状旁腺激素相关蛋白与Bmi-1的相互作用[J].南京医科大学学报(自然科学版),2010,(12):1718-1721

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