摘要:目的:建立犬肾细胞(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞缺氧模型,进一步阐明甘氨酸对缺氧细胞增殖活性的影响及其作用机制-方法:将MDCK细胞置于体积分数为95% N2和5% CO2的有机玻璃调节性密闭容器中,分别培养24-36-48-72 或84 h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测甘氨酸对缺氧性损伤MDCK细胞增殖活性的影响-将MDCK细胞分为正常组-缺氧组和甘氨酸处理组,加药后孵育1-2 或3 h后,收集细胞总蛋白,用Western blot检测细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase 1 and 2,ERK1/2)-p38MAPK和Akt的磷酸化活性-结果:在所观察的所有缺氧时段内,MDCK细胞MTT活性均较正常对照组明显下降(P < 0.01)-加入甘氨酸后,缺氧24-36或48 h后细胞的增殖能力比缺氧组有明显增强,差异有统计学意义-在缺氧72 或84 h后,甘氨酸未能显示明显的保护作用-缺氧时ERK1/2和Akt的磷酸化活性明显降低,p38MAPK的磷酸化活性明显增高-将甘氨酸加入到缺氧细胞中,ERK1/2和Akt又重新被激活,p38MAPK被抑制-结论:甘氨酸可保护MDCK细胞免于早期缺氧性损伤,该作用可能通过激活ERK1/2和Akt,抑制p38MAPK而实现-