摘要:目的:构建含人类疱疹病毒6A亚型DR7基因的慢病毒,研究DR7基因表达对神经胶质瘤细胞U87增殖-迁移-侵袭能力的影响。方法:PCR扩增DR7基因,克隆至慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-EGFP,构建pLenti6.3-DR7-IRES2-EGFP重组慢病毒载体,经293T细胞包装重组病毒转染至神经胶质瘤细胞U87,经blasticidin筛选建立稳定表达株,通过细胞增殖实验-细胞周期实验-细胞划痕及Transwell实验研究稳定表达DR7基因对U87细胞的增殖-迁移及侵袭能力的影响。结果:成功构建了pLenti6.3-DR7-6 × His-IRES2-EGFP慢病毒表达载体,筛选了稳定表达DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞株,CCK-8细胞增殖实验显示,稳定表达DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞与阴性对照细胞U87-NC-EGFP-U87细胞相比,细胞增殖活性明显增高,差异具有统计学意义(P < 0.001)。细胞周期检测发现U87-DR7-EGFP细胞S-G2/M期细胞所占比例多于U87-NC-EGFP-U87细胞:S期的比例分别为(34.73 ± 1.12)%-(24.89 ± 0.93)%-(25.39 ± 0.96)%,差异具有统计学意义(P < 0.001);G2/M期分别为(17.35 ± 1.61)%-(11.36 ± 1.50)%-(13.17 ± 1.95)%,差异具有统计学意义(P < 0.05)。细胞划痕实验表明,U87-DR7-EGFP细胞愈合能力明显强于U87-NC-EGFP-U87细胞,划痕6 h愈合率分别为:(33.55 ± 2.83)%-(23.50 ± 3.18)%-(22.03 ± 1.47)%,差异具有统计学意义(P < 0.01);划痕12 h愈合率分别为(70.50 ± 5.39)%-(53.60 ± 4.67)%-(55.09 ± 2.83)%,差异具有统计学意义(P < 0.001)。Transwell实验表明,U87-DR7-EGFP细胞的穿膜数量明显多于U87-NC-EGFP-U87细胞,分别为:(543.00 ± 22.94)-(387.00 ± 15.63)-(412.00 ± 20.30)个,差异具有统计学意义(P < 0.001)。结论:人类疱疹病毒6A亚型DR7基因表达能在体外促进人神经胶质瘤细胞U87增殖-迁移及侵袭,提示其在神经胶质瘤的发生和发展中可能起一定作用。