摘要:目的:观察盐酸小檗碱对乳腺癌MDA－MB－231细胞抑制增殖及诱导凋亡的作用,并探讨其可能的机制。方法:不同浓度(0-25-50-75-100 μmol/L)盐酸小檗碱处理MDA－MB－231细胞不同时间(48-72 h),MTT法检测盐酸小檗碱对细胞的增殖抑制率,选择盐酸小檗碱50 μmol/L作为机制研究浓度,Annenxin Ⅴ/PI EGFP染色流式细胞仪检测盐酸小檗碱对细胞凋亡的影响;2,7-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH－DA)荧光探针检测盐酸小檗碱对细胞内活性氧簇的影响;5,5′,6,6′-四氯-1,1′,3,3′-四乙基苯丙咪唑羰花青碘化物(JC－1)荧光探针检测盐酸小檗碱对细胞线粒体膜电位的影响;Caspase3试剂盒检测盐酸小檗碱对细胞内Caspase3活性的影响。结果:盐酸小檗碱作用MDA－MB－231细胞48-72 h,呈浓度及时间依赖性抑制MDA－MB－231细胞增殖。盐酸小檗碱(50 μmol/L)呈时间依赖性诱导MDA－MB－231细胞凋亡并诱导MDA－MB－231细胞内活性氧簇大量生成,线粒体膜电位降低,Caspase3活性增高。结论:盐酸小檗碱对MDA－MB－231细胞的增殖抑制作用可能是通过诱导细胞内活性氧簇的生成-降低线粒体膜电位,升高Caspase3活性,由线粒体途径诱导细胞凋亡。
