非小细胞肺癌源性外泌体提取方法探讨
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国家自然科学基金(81402483);江苏省卫生厅课题(H201410)


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    目的:比较3种提取非小细胞肺癌A549细胞培养上清中外泌体 (Exosomes) 的方法,为获得高质量的Exosomes提供参考-方法:分别采取超速离心法-进口ExoQuick-TC提取法-国产Ribo提取法提取A549细胞培养上清中的Exosomes-利用透射电镜进行形态学观察,2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠法进行蛋白定量,Western blot检测Exosomes表面标志物 CD63表达-结果:3种方法均可提取到Exosomes,电镜下可观察到圆形膜性囊泡结构-进口ExoQuick-TC提取法及国产Ribo提取法提取样本浓度显著高于超速离心法(P < 0.05);3种方法提取样本均有Exosomes特异性标志蛋白 CD63表达,超速离心法CD63表达最高-结论:超速离心法-进口ExoQuick-TC提取法-国产Ribo提取法均可成功分离Exosomes,超速离心法获得的Exosomes纯度较高,应用试剂盒方法获得的Exosomes浓度高-

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引用本文

晏 芾,于韶荣,曹海霞,井昶雯,马 蓉,冯继锋.非小细胞肺癌源性外泌体提取方法探讨[J].南京医科大学学报(自然科学版),2016,(6):726-729

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  • 收稿日期:2015-11-18
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  • 在线发布日期: 2016-06-15
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