目的：探讨甲状腺细针穿刺（fine needle aspiration，FNA）在甲状腺影像报告与数据系统（thyroid imaging reporting and data system，TI-RADS）3、4类结节良恶性鉴别诊断中的应用价值，促进临床对甲状腺结节进行合理TI-RADS分级。方法：回顾性分析在南京医科大学第一附属医院超声诊断科接受甲状腺超声检查，超声报告提示为TI-RADS 3类及4类结节，同时进行了FNA的337例患者，共计381个结节。排除FNA病理结果为不满意的病例，将符合条件的326个结节的甲状腺FNA病理结果与手术病理结果进行比较。结果：381个TI-RADS 3、4类结节中，FNA细胞学诊断结果为良性76个，意义不明确的细胞非典型病变（atypia of undetermined significance，AUS）44个，不满意55个，可疑恶性44个，恶性162个；手术病理结果为，良性119个，恶性207个。FNA细胞学诊断结果与病理结果对比，差异有统计学意义（P＜0.001）。FNA诊断的灵敏度、特异度、准确度及恶性率分别为TI-RADS 3类结节66.7%、97.7%、95.7%、4.8%；TI-RADS 4A类结节：77.3%、95.2%、89.1%、27.5%；4B类结节：95.8%、73.9%、90.4%、63.4%；4C类结节：96.4%、72.7%、94.3%、87.4%。结论：FNA对TI-RADS 分级为3、4类结节的良恶性判定具有较高实用价值，有利于促进临床对甲状腺结节进行合理TI-RADS分级，减少对TI-RADS 4A、4B类结节的低估。