目的：建立用于RHD c.1227G>A基因检测的熔解曲线分析方法。方法：根据RHD c.1227G>A基因位点设计并合成序列特异性引物，在荧光定量PCR反应后对产物进行熔解曲线分析，根据熔解曲线峰值的差异进行基因检测结果判断，并与常规序列特异性引物PCR（PCR-sequence specific primer，PCR-SSP）RHD c.1227G>A基因分型方法进行比较；对与血清学结果不一致的标本进行测序分析。结果：在87例血清学初筛为RhD阴性表型的标本中，采用熔解曲线分析法，检测出16例含有RHD c.1227G>A，占比18.4%；与常规PCR-SSP分型结果一致。对1例与血清学吸收放散结果不一致的标本进行RHD exon 9测序分析，证实均为1227A纯合子。熔解曲线分析法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和总符合率均为100%，约登指数为1.0。结论：成功建立用于红细胞RHD c.1227G>A基因分型的熔解曲线分析方法，可以高效、快速地进行RHD c.1227G>A基因检测研究。