糖尿病（diabetes mellitus，DM）是世界上最常见的代谢性疾病，由胰岛素缺乏及作用减弱引起^[1]。目前全球有10%的人患有DM^[2]。DM会引起微血管并发症，例如糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy， DR）、肾病和神经病变^[3]。据报道，超过 30% 的DM 患者患有DR^[4-5]，即使积极治疗，仍有10%的 DR患者不可避免地会失明^[6]。虽然早期检测和治疗对于防治DR非常重要，但是目前可用于 DR早期发现和风险预测的诊断性生物标志物仍需要探索。

长链非编码RNA（long non⁃coding RNA，lncRNA） 是指转录本超过200 nt的单链RNA，参与调控许多生物过程^[7]。已有研究表明，lncRNA与DR发生和发展密切相关，可作为DR诊断和治疗的潜在靶点^[8-9]。例如，Liu等^[10] 研究揭示了lncRNA MALAT1敲低可以抑制高糖（high glucose，HG）环境下的人视网膜微血管内皮细胞（human retinal microvascular endothelial cell，hRMEC）的小管形成。Zhang 等^[11]研究显示 lncRNA AK077216过表达显著抑制人视网膜色素上皮细胞（human retinal pigment epithelial cell，hRPE） 的凋亡。lncRNA VIM 反义 RNA 1（LncRNA VIM Antisense RNA 1，lncRNA VIM⁃AS1）之前被鉴定为癌症相关的 lncRNA^[12]。最近有研究显示，lncRNA VIM⁃AS1 在 DM 患者中异常表达^[13]。更重要的是， lncRNA VIM⁃AS1在DM合并DR患者中表达明显降低，lncRNA VIM ⁃AS1 过表达明显抑制 HG 处理的 hRPE 的细胞凋亡^[14]，表明其在 DR 中起关键作用。但 lncRNA VIM⁃AS1 在 DR 中的具体作用机制有待进一步探讨。

微小RNA（microRNA，miRNA）是一种长度约为 22 nt的非编码单链RNA分子，参与基因表达的转录后调控^[15]。先前的一项研究显示，miR⁃497在DM大鼠的胰腺中显着上调，这表明miR⁃497可能在DM进展中充当某种作用^[16]。此外，Li等^[17] 研究显示miR⁃ 497⁃5p在HG处理的视网膜神经胶质细胞中显著上调，miR⁃497⁃5p 过表达显著促进 HG 处理的视网膜神经胶质细胞的凋亡。

F⁃box 和 WD⁃40 结构域蛋白（F⁃box and WD⁃40 domain proteins，FBXW7）作为泛素⁃蛋白酶体降解途径的关键识别因子之一，被证实在调节 DR 进展中起关键作用。Shao等^[18] 证明了 FBXW7 敲低可以促进 DR 中的新生血管形成。据报道，DR 小鼠和HG 处理的 hRMEC 中 FBXW7 表达显著降低，并且 FBXW7过表达可以抑制HG诱导的血管生成^[19]。因此，本研究对 lncRNA VIM ⁃ AS1、miR ⁃ 497 ⁃ 5p 和FBXW7 在 DR 发展中的调控关系及作用机制进行探讨。

1 材料和方法

1.1 材料

ARPE⁃19 购自美国模式培养物集存库（Ameri⁃ can type culture collection，ATCC）。 lncRNA VIM ⁃ AS1 的过表达质粒（overexpression plasmid of ln⁃ cRNA VIM⁃AS1，OE⁃VIM⁃AS1）、短发夹⁃FBXW7（sh⁃ FBXW7）、miR⁃497⁃5p 模拟物（miR⁃497⁃5p mimics）、 miR⁃497⁃5p 抑制剂（miR⁃497⁃5p inhibitror）及其阴性对照组（pcDNA3.1、shRNA、mimics/inhibitror NC）（上海吉玛基因）。双荧光素酶报告基因测定系统（北京Promega公司）。细胞计数试剂盒⁃8（cell counting kit⁃8，CCK⁃8）（上海生工公司）。Annexin V⁃FITC凋亡检测试剂盒、BCA 试剂盒（Beyotime 公司，上海）。SYBR 试剂盒（Thermo Fisher Scientific 公司，美国）。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养和处理

所有细胞均在含有10%胎牛血清（FBS）（Thermo Fisher Scientific公司，美国）和 1% 青霉素/链霉素溶液（上海生工）的 DMEM（Thermo Fisher Scientific 公司，美国）中于37℃ 5% CO₂培养。HG处理为细胞用 30 mmol/L D⁃葡萄糖（Sigma⁃Aldrich公司，美国）处理 48 h。使用 600 μg/mL 晚期糖基化终末产物（ad⁃ vanced glycation end products，AGE）（Biovision 公司，美国）处理细胞，并将其作为HG处理的阳性对照组。

1.2.2 细胞转染

使用 Lipofectamine^TM 3000（Invitrogen 公司，美国）将OE⁃VIM⁃AS1、sh⁃FBXW7和miR⁃497⁃5p mim⁃ ics/inhibitror 及其阴性对照组（pcDNA3.1、shRNA、 mimics/inhibitror NC）转染 ARPE⁃19细胞。

1.2.3 双荧光素酶报告基因检测

使用常见的在线工具预测 lncRNA VIM⁃AS1、 miR⁃497⁃5p 和 FBXW7之间的结合位点。 PCR扩增人 lncRNA VIM⁃AS1/FBXW7 片段。使用定点突变试剂盒（Stratagene 公司，美国）对lncRNA VIM⁃AS1/ FBXW7 片段中的 miR⁃497⁃5p 结合位点进行定点突变检测。将 lncRNA VIM⁃AS1/FBXW7 序列的野生型（wild type，wt）和突变型（mutate，mut）报告质粒克隆到pmirGLO载体（上海吉玛基因）中。用 lncRNA VIM ⁃AS1⁃ wt/FBXW7⁃ wt 或 lncRNA VIM ⁃AS1⁃ mut/ FBXW7 ⁃ mut 质粒和 miR ⁃ 497 ⁃ 5p mimics 或 mimics NC 或 miR⁃497⁃5p inhibitor或inhibitor NC 共转染细胞Lipofectamine^TM 3000。使用双荧光素酶报告基因测定系统检查荧光素酶活性。

1.2.4 伤口愈合试验

将细胞接种到6孔板（Corning公司，美国）。当细胞融合程度达到约90%时，使用200 μL移液器吸头在融合的细胞单层中产生人工伤口。用PBS洗涤细胞3次并加入无血清培养基培养细胞，使用显微镜（Olympus公司，日本）在0 h和24 h拍摄图像。

1.2.5 CCK⁃8检测

将细胞接种在 96 孔板中，与 CCK⁃8（10 μL） 一起孵育，并在37℃的培养箱中孵育2 h。使用微孔板分光光度计（Thermo Fisher Scientific 公司，美国） 在450 nm处检测吸光度。

1.2.6 细胞凋亡测定

使用Annexin V⁃FITC凋亡检测试剂盒分析细胞凋亡。收获细胞并重新悬浮在500 μL的1×Annexin 结合缓冲液（中国Beyotime）中。细胞在黑暗条件下用 10 μL Annexin V ⁃ FITC 和 5 μL PI（中国 Beyo⁃ time）染色10 min，立即使用流式细胞仪分析样品。

1.2.7 定量实时聚合酶链反应（quantitative reverse transcription⁃PCR，qRT⁃PCR）

用 TRIzol 试剂（Thermo Fisher Scientific 公司，美国）分离总 RNA。对于 mRNA，使用逆转录酶试剂盒（Toyobo公司，日本）合成cDNA。对于 miRNA，使用第一链 cDNA 合成试剂盒合成 cDNA。然后，使用 SYBR 试剂盒将 cDNA 用于 qRT ⁃ PCR 测定。 miRNA 和 mRNA 的相对表达分别用 U6 和 GAPDH 为内参，用2^-ΔΔCT法计算。研究中使用的引物如下： LncRNA VIM⁃AS1正义：5′⁃ACTGTAATGGACTCGT⁃ GGTG ⁃3′，反义：5′ ⁃CGTCGTGTTGTCCTGATG ⁃ 3′； miR⁃497⁃5p 正义：5′⁃CCTTCAGCAGCACACTGTGG⁃ 3′，反义：5′⁃CAGTGCAGGGTCCGAGGTAT⁃3′；FBXW7 正义：5′⁃ACTGGGCTTGTACCATGTTCA⁃3′，反义：5′⁃ TGAGGTCCCCAAAAGTTGTTG⁃3′；U6 正义：5′⁃CG⁃ CTTCGGCAGCACATATAC⁃3′，反义：5′⁃AAATATG⁃ GAACGCTTCACGA⁃3′；GAPDH 正义：5′⁃TCAAGA⁃ AGGTGGTGAAGCAGG ⁃3′，反义：5′ ⁃TCAAAGGTG⁃ GAGGAGTGGGT⁃3′。

1.2.8 蛋白质印迹法

用RIPA分离蛋白质，用BCA试剂盒（中国Bey⁃ otime）测定蛋白质浓度。样品通过 8%~12% SDS⁃ PAGE分离，进一步转移到PVDF膜（Millipore公司，美国）。然后将膜与针对 FBXW7（1∶1 000，Abcam公司，美国）和 GAPDH（1∶10 000，Sigma⁃Aldrich 公司，美国）的抗体在4℃下孵育过夜。用PBS⁃T洗涤后，将膜与用 HRP（1∶10 000，Abcam 公司，美国）标记的相应二抗孵育60 min。通过GEL成像系统（Bio⁃ Rad公司，美国）对膜进行可视化和成像。通过软件 Image J分析蛋白质的定量。

1.3 统计学方法

本研究使用 GraphPad Prism 8 进行统计数据分析。进行的所有实验至少重复3次。测量数据表示为均数±标准差（$\stackrel{-}{x}\pm s$）。两两比较采用t检验，多组比较采用单因素方差分析。所有数据均来自至少 3个重复实验。P <0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HG处理抑制ARPE⁃19细胞的增殖和迁移，同时通过下调lncRNA VIM⁃AS1促进细胞凋亡

首先，评估了不同培养基中的ARPE⁃19细胞中 lncRNA VIM ⁃AS1 的表达，结果显示 lncRNA VIM ⁃ AS1 在 HG 及 AGE 处理后的 ARPE⁃19 细胞中的表达分别为0.40±0.05及0.45±0.06，正常培养基（NG） 组的表达为1.00±0.13，HG组及AGE组与NG相比显著下调，t值分别为7.449及6.723，P值分别为0.002 及 0.003（图1A）。为了评估 lncRNA VIM ⁃AS1 在 DR中的功能，用 lncRNA VIM⁃AS1过表达质粒转染 ARPE⁃19 细胞，并评估细胞表型。qRT⁃PCR结果显示，转染 OE ⁃VIM ⁃AS1 后 ARPE ⁃19 细胞中 lncRNA VIM ⁃AS1 的表达显著增加（4.51±0.87，t=6.481，P= 0.003，图1B）表明转染成功。CCK⁃8实验显示经过 HG 处理后，ARPE ⁃19 的细胞活力明显受到抑制 [（54.06±11.16）%，t=3.346，P=0.028，图1C]。 HG处理后，流式细胞检测结果显示Q2及Q3象限中的细胞凋亡明显增加[（18.48 ± 1.65）%，t=11.86，P <0.001]。过表达 lncRNA VIM ⁃AS1，细胞凋亡减少 [（7.69±2.28）%，t=6.640，P=0.003]。这表明 HG 处理后的ARPE⁃19 细胞的细胞增殖受到抑制，而过表达lncRNA VIM⁃AS1则逆转这一改变（图1D）。此外观察到HG处理ARPE⁃19 细胞后，伤口愈合实验显示细胞迁移受到抑制[（37.35±5.77）%，t=5.631，P= 0.005]。过表达 lncRNA VIM⁃AS1 后细胞迁移增加 [（65.60±8.87）%，t=5.299，P=0.006，图1E]。所有这些结果表明，HG 处理抑制了 ARPE⁃19 细胞的增殖和迁移，同时通过降低 lncRNA VIM⁃AS1 表达促进了细胞凋亡。

2.2 LncRNA VIM⁃AS1 在 ARPE⁃19 细胞中通过海绵化miR⁃497⁃5p抑制miR⁃497⁃5p的表达

众所周知，lncRNA 通过充当 miRNA 的海绵来实现生物学功能（即lncRNA通过与miRNA结合，减弱 miRNA 对靶基因的沉默，从而对 miRNA 的靶基因进行调控）。本研究发现在 lncRNA VIM⁃AS1 过表达后，ARPE⁃19细胞中miR⁃497⁃5p的表达显著降低（0.42 ± 0.08，t=6.768，P=0.003，图2A）。在转染 miR⁃497⁃5p mimics后，ARPE⁃19 细胞中 miR⁃497⁃5p 表达显著升高（3.31±0.30，t=11.38，P <0.001），而 miR⁃497⁃5p 在 miR⁃497⁃5p 敲低后显著下调（0.31± 0.11，t=5.911，P=0.004，图2B），表明转染成功。预测lncRNA VIM⁃AS1和miR⁃497⁃5p之间存在结合位点（图2C）。为了进一步验证这种结合关系，进行了双荧光素酶报告基因测定，结果显示 miR⁃497⁃5p mimics/inhibitor在与 lncRNA VIM⁃AS1⁃wt 质粒共转染后抑制/提高了荧光素酶活性（0.54±0.09）/（1.53± 0.21），t值分别为5.541及4.228，P值分别为0.005及 0.013。共转染 lncRNA VIM⁃AS1⁃mut 载体后没有发生显著性影响（P >0.05，图2D）。因此，lncRNA VIM⁃AS1 靶向 miR⁃497⁃5p 以负向调节 miR⁃497⁃5p 表达。

2.3 miR⁃497⁃5p过表达逆转lncRNA VIM⁃AS1过表达对HG处理的ARPE⁃19细胞迁移和凋亡的影响

首先，观察到 miR ⁃ 497 ⁃ 5p 在 HG 处理后的 ARPE ⁃19 细胞中显著上调（2.36±0.31，t=6.820，P= 0.002，图3A）。为探究 lncRNA VIM⁃AS1/miR⁃497⁃5p 在DR进展中的潜在作用，将 miR⁃497⁃5p mimics和 OE ⁃VIM ⁃AS1 共转染 HG 处理的 ARPE ⁃ 19 细胞。CCK⁃8实验显示lncRNA VIM⁃AS1过表达促进了HG 处理的ARPE⁃19细胞的活性[（181.01±26.98）%，t= 4.621，P=0.009]。在miR⁃497⁃5p过表达后细胞活性为（93.98±17.00）%（t=4.726，P=0.009），miR⁃497⁃5p 过表达能恢复lncRNA VIM⁃AS1过表达的造成的细胞活性增加（图3B）。与 HG+mimics NC+vector 组相比，HG+mimics NC+OE⁃VIM⁃AS1 组的流式细胞检测结果显示Q2及Q3象限中的细胞凋亡明显减少 [（7.92±1.94）%，t=11.33，P <0.001]。而转染 miR⁃ 497 ⁃ 5p mimics 后细胞凋亡为（19.59 ± 3.44）%（t= 5.528，P=0.005）。转染 miR⁃497⁃5p mimics 逆转了 lncRNA VIM⁃AS1 过表达引起的细胞凋亡减少（图3C）。此外，OE ⁃ VIM ⁃ AS1 转染导致 HG 处理的 ARPE⁃19 细胞迁移增加[（58.61±5.17）%，t=5.551， P=0.005]。而 miR ⁃497⁃5p 过表达的细胞迁移为 （42.03±7.75）%（t=3.083，P=0.036）。miR⁃497⁃5p 过表达能够逆转lncRNA VIM⁃AS1过表达引起的细胞迁移增加（图3D）。因此，miR⁃497⁃5p 过表达逆转 lncRNA VIM⁃AS1 过表达对 HG 处理的 ARPE⁃19 细胞迁移和凋亡的影响。

2.4 FBXW7是miR⁃497⁃5p的靶基因

qRT ⁃PCR 结果显示，FBXW7 的 mRNA 表达因 miR ⁃497⁃5p 过表达而显著降低[（0.43±0.13），t= 6.995，P=0.002]。miR ⁃ 497 ⁃ 5p 敲低后 FBXW7 的 mRNA 表达升高（2.16 ± 0.18，t=7.960，P=0.001，图4A）。免疫印迹检测结果显示显示，FBXW7的蛋白表达因 miR⁃497⁃5p 过表达而显著降低（0.16±0.04， t=6.995，P=0.002）。miR⁃497⁃5p 敲低后 FBXW7 的蛋白表达升高（0.63 ± 0.06，t=2.822，P=0.048，图4B）。使用生物信息学软件 miRanda 预测了 miR ⁃ 497⁃5p和FBXW7之间的潜在结合位点（图4C）。随后进行了双荧光素酶报告基因测定以验证miR⁃496 ⁃5p和FBXW7之间的相互作用，将FBXW7的3′UTR 区域构建至载体中报告基因luciferase的后面，构建荧光素酶质粒。然后转染至细胞中，比较过表达或干扰 miR⁃496⁃5p 后目的 FBXW7 的荧光素酶活性，发现过表达miR⁃496⁃5p后野生型FBXW7（FBXW7⁃ WT）的荧光素酶活性明显下降（0.55±0.19，t=3.702， P=0.021）。同时敲低 miR ⁃496⁃5p 后发现 FBXW7⁃ WT 的的荧光素酶活性明显上升（1.45 ± 0.11，t= 4.385，P=0.012）。miR⁃496⁃5p的过表达及敲低后突变型FBXW7的荧光素酶活性无显著改变（P >0.05，图4D）。因此，FBXW7 是 miR⁃497⁃5p 的靶基因，过表达miR⁃497⁃5p可以抑制 FBXW7的表达。

2.5 敲低miR⁃497⁃5p可以调节FBXW7的表达促进 ARPE⁃19细胞的增殖和迁移并抑制细胞凋亡

探索FBXW7对miR⁃497⁃5p介导的体外生物学功能的影响。qRT⁃PCR 检测显示，转染 sh⁃FBXW7 抑制了 FBXW7 mRNA 在 ARPE⁃19 细胞中的（0.36± 0.10，t=6.325，P=0.003，图5A）。免疫印迹检测结果显示转染 sh⁃FBXW7 抑制了 FBXW7 蛋白在 ARPE⁃ 19 细胞中的表达（0.21±0.08，t=4.590，P=0.010，图5B）。CCK⁃8检测实验的结果显示miR⁃497⁃5p的敲低促进了 HG 处理的 ARPE ⁃ 19 细胞的细胞活性 [（183.05 ± 22.38）%，t=6.269，P=0.003]。抑制 FBXW7可以逆转敲低miR⁃497⁃5p导致的细胞活性增加[（91.02±22.38）%，t=6.128，P=0.004，图5C]。此外，如图5D 所示，转染miR⁃497⁃5p inhibitor导致 HG处理的ARPE⁃19细胞凋亡减少[（7.79±1.66）%， t=9.309，P <0.001]。转染 sh⁃FBXW7后则可逆转转染miR⁃497⁃5p inhibitor导致的ARPE⁃19细胞凋亡减少[（19.43±4.02）%，t=4.636，P=0.009，图5D]。伤口愈合实验结果表明，miR⁃497⁃5p 的敲低促进了 HG 处理的 ARPE ⁃19 细胞的迁移[（62.30±7.48）%，t= 4.471，P=0.011]，抑制 FBXW7而能够逆转细胞迁移的增多[（45.42±6.13）%，t=3.024，P=0.039，图5E]。因此，敲低miR⁃497⁃5p 促进了 ARPE⁃19 细胞的增殖和迁移，并通过调节FBXW7的表达抑制细胞凋亡。

3 讨论

DM 是一种高发的慢性病，其病理和生理的改变能够引起一系列并发症，对人类健康构成巨大威胁^[20-21]。DR 常见于病程较长的 DM 患者^[5]，DR 是 DM相关失明的危险因素，中晚期DR可能会导致不可逆的病变。DR的发病机制尚不清楚，给DR的早期诊断和治疗带来了困难。本研究发现 lncRNA VIM⁃AS1 通过调节 miR⁃497⁃5p/FBXW7 轴来介导 DR中ARPE⁃19细胞的增殖、迁移和凋亡。

视网膜上皮细胞是指滋养视网膜视觉细胞^[22]。视网膜上皮细胞增殖降低和细胞凋亡增加会导致 DR患者视力丧失^[23]。正如广泛报道的那样，视网膜上皮细胞的增殖和凋亡受某些 lncRNA的调节^[24]。 LncRNA AK077216可以抑制HG处理的ARPE⁃19细胞的凋亡^[11]。此外，据报道 lncRNA MEG3 可抑制 HG处理的ARPE⁃19细胞的凋亡^[25]。此外，lncRNA VIM⁃AS1在DM和DM相关并发症中的作用之前已有报道^[13-14，26]，但在DR中的调节功能尚不清楚。最近一项研究表明，与其他DM 患者相比，DR患者的 lncRNA VIM⁃AS1表达降低^[14]，这表明 lncRNA VIM⁃ AS1 有可能成为 DR 预后和治疗的新型生物标志物。值得注意的是，据报道，lncRNA VIM⁃AS1通过 miR⁃29 抑制HG诱导的人视网膜上皮细胞凋亡^[14]。然而，lncRNA VIM⁃AS1 调控DR进展的具体分子机制仍不清楚。本研究中，lncRNA VIM⁃AS1 在HG处理的ARPE⁃19细胞中被下调，这与之前的研究完全一致^[14]。此外，lncRNA VIM⁃AS1过表达促进了HG 处理的ARPE⁃19细胞的增殖和迁移，并抑制了细胞凋亡。

lncRNA通过充当miRNA的内源诱饵发挥竞争性内源性RNA（competing endogenous RNA，ceRNA） 的作用，进而影响miRNA与其靶标的结合^[27]，这被认为是阐明lncRNA分子机制的重要途径之一。据此，科学界提出了 ceRNA 假说，这被描述为一种新的 RNA 调控机制^[28]。据报道，lncRNA MIR497HG 通过调节miR⁃128⁃3p来抑制HG处理的视网膜内皮细胞的增殖和迁移^[29]。然而，尚不清楚lncRNA VIM⁃ AS1是否通过充当miRNA海绵在DR中发挥调节作用。本研究提出了一个新的ceRNA调控网络，其中 lncRNA VIM⁃AS1海绵化了miR⁃497⁃5p。据报道，在 HG 条件下，miR⁃497的表达与胰岛素水平一致^[30]。此外，miR⁃497在糖尿病肾病患者和 HG处理的HK⁃ 2细胞中显著下调，miR⁃497过表达可以抑制HG处理的 HK⁃2 细胞的焦亡^[31]。更重要的是，据报道， miR⁃497在DM大鼠的视网膜和HG处理的Müller细胞中显著上调^[32]，表明miR⁃497在不同的糖尿病并发症中具有不同的表达。本研究证实了 miR⁃497⁃ 5p在HG处理的ARPE⁃19细胞中显著上调。此外，还发现 lncRNA VIM⁃AS1 可以通过直接靶向 miR⁃ 497⁃5p 负调控 ARPE⁃19 细胞中的 miR⁃497⁃5p。正如预期的那样，miR⁃497⁃5p mimics 逆转了 lncRNA VIM⁃AS1过表达对HG诱导的ARPE⁃19细胞表型的影响。本研究所有的结果都提供了支持DR中存在lncRNA VIM⁃AS1/miR⁃497⁃5p 调节轴的证据。

众所周知，失调的miRNA结合靶mRNA来抑制基因表达，从而调控DR进展^[33-34]。因此，本研究旨在探索 miR⁃497⁃5p在调节DR进展中的下游靶点。 FBXW7 作为胎球蛋白 A 的 E3 泛素连接酶，参与维持葡萄糖稳态，其在肥胖患者肝脏中的表达对葡萄糖代谢具有多种有益作用；同时，敲除正常肝脏中的 FBXW7会导致葡萄糖稳态受损^[35]。更重要的是，据报道，FBXW7 可抑制 DR 中的血管生成^[19]。本研究发现 HG 处理的 ARPE⁃19 细胞中 FBXW7 的表达显著降低。FBXW7 是 miR ⁃497⁃5p 的直接靶标， FBXW7调节靶蛋白泛素化和降解，FBXW7 的底物包括几种广泛研究的癌蛋白，例如 MYC、Notch、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamy⁃ cin，mTOR，mTOR），FBXW7与底物构建调控网络，可以调节细胞的增殖、凋亡及转移^[36]。FBXW7敲低消除了 miR⁃497⁃5p 抑制 ARPE⁃19 细胞生长的调节。因此，lncRNA VIM⁃AS1/miR⁃497⁃5p/FBXW7 轴可能是DR发展的关键参与者。

本研究证明了 lncRNA VIM ⁃AS1 通过海绵化 miR⁃497⁃5p 上调FBXW7。重要的是，lncRNA VIM⁃ AS1 的过表达促进了HG处理的ARPE⁃19细胞的增殖和迁移，并通过 miR⁃497⁃5p/FBXW7 轴抑制细胞凋亡，最终影响DR进展。然而，本研究仍有一些不足之处，如FBXW7调控ARPE⁃19细胞增殖、凋亡及迁移的具体通路是什么？未来需要进行体内实验来验证我们的发现。此外，需要探索lncRNA VIM⁃ AS1/miR⁃497⁃5p/FBXW7 轴对 DR 新生血管的潜在影响。

参考文献