• 2006年第11期文章目次
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    • >南京医科大学学报(自然科学版)
    • 人源日本血吸虫Fab抗体库的构建及抗独特型抗体的筛选、鉴定

      2006(11):997-1000. DOI: 10.7655

      摘要 (2065) HTML (44) PDF 0.00 Byte (137) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:构建人源日本血吸虫Fab抗体库,筛选出日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定。方法: 以3名晚期血吸虫患者切除的脾脏为源,构建人源日本血吸虫Fab抗体库。并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达。结果:构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,库容为4.3 × 106,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。经过5轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取60个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(A3、B6、C4、C17),其中B6经SDS-PAGE电泳显示插入片断正确。结论:成功构建了人源日本血吸虫Fab抗体库, 并从中获得人源日本血吸虫抗独特型抗体B6,为研制用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础。

    • 4-1BBL分子在人恶性血液病细胞系的表达

      2006(11):1001-1004. DOI: 10.7655

      摘要 (1930) HTML (47) PDF 0.00 Byte (96) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究共刺激分子4-1BBL分子在人恶性血液病细胞系的表达及其生物学意义。方法:流式细胞仪检测4-1BBL分子在不同的人恶性血液病细胞系的表达;用可介导4-1BBL逆向信号的鼠抗人4-1BBL单抗(mAb 1F1)作用于8个不同的人恶性血液病细胞系,细胞计数法和3H-TdR掺入法评价细胞系的体外生长和增殖。结果:FACS结果显示4-1BBL分子在人恶性血液病细胞系上有不同程度的表达,其中髓性白血病细胞系U937、HL60及B淋巴瘤细胞系Raji、Daudi上呈现较高水平的表达。细胞计数和3H-TdR掺入实验结果表明mAb 1F1对髓性白血病细胞系U937和HL60,具有较强的促增殖效应。结论:共刺激分子4-1BBL分子在髓性白血病细胞系和B淋巴瘤细胞系上表达率较高;4-1BBL分子可通过介导逆向信号促进髓性白血病细胞系U937和HL60的生长和增殖。

    • CD2AP和α-actinin-4在大鼠阿霉素肾病模型中的表达

      2006(11):1005-1008. DOI: 10.7655

      摘要 (1931) HTML (39) PDF 0.00 Byte (104) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:观察CD2相关蛋白(CD2AP)和α-actinin-4这两种足细胞相关分子在大鼠阿霉素肾病模型中蛋白表达水平的变化,探讨它们与蛋白尿发生发展的相关性。方法:30只SD大鼠随机分为肾病模型组和正常对照组,建立阿霉素肾病模型,在2、4、6、8周,应用光镜、电镜观察肾组织的病理改变,BCA法检测24 h尿蛋白排泄量,半定量Western Blot的方法检测大鼠肾皮质中CD2AP和α-actinin-4的表达。结果:随着肾病模型组大鼠尿蛋白量逐渐增加,肾组织病理改变逐步加重,肾皮质CD2AP的表达量先明显增加,后逐渐降至对照组水平,2、4、6周分别为对照组的3.0、1.8、1.2倍,而α-actinin-4的表达量无明显变化。结论:阿霉素肾病模型大鼠肾皮质CD2AP和α-actinin-4这两种足细胞相关分子的蛋白表达规律不同,前者与蛋白尿的发生发展有一定程度的相关性,后者则与尿蛋白量的变化无关。

    • 大鼠单侧输尿管梗阻后肾脏Notch1/Jagged1的表达及其意义

      2006(11):1009-1014. DOI: 10.7655

      摘要 (2085) HTML (44) PDF 0.00 Byte (97) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:观察大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)后不同时期Notch1/Jagged1、纤维连接蛋白(FN)表达的变化,探讨在肾脏间质纤维化发病机制中的意义。方法:建立大鼠UUO模型,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和western blotting 动态观察(第1、3、7、14天)梗阻侧肾脏及假手术对照组Notch1/Jagged1mRNA、蛋白和FN的表达。结果:UUO模型梗阻侧肾脏Notch1/Jagged1 mRNA蛋白及FN蛋白在输尿管结扎后第1、3、7、14天不同时间点均显著高于对照组和非梗阻侧肾脏(P < 0.05或P < 0.01),Notch1/Jagged1 mRNA在第7天达高峰,但Jagged1于第1天达高峰,Notch1、FN在第14天达高峰。结论:在整体条件下,随着肾间质纤维化程度的加重,FN聚积也随之增加,同时Notch1/Jagged1表达增强,提示Notch1/Jagged1信号通路在肾间质纤维化发病机制中起重要作用。

    • 早期T细胞激活过程中NF-κB活化的研究

      2006(11):1015-1017. DOI: 10.7655

      摘要 (2177) HTML (38) PDF 0.00 Byte (112) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究T细胞在CD3/CD28双信号通路共刺激活化早期,细胞中NF-κB的活化以及三氧化二砷对该活化作用的影响。方法:用CD3/CD28单克隆抗体(浓度分别为10 μg/ml和5 μg/ml)双信号通路对Hut-78细胞进行共刺激30 min,采用TransAM的方法观察Hut-78细胞内p65的表达状况,并研究三氧化二砷对该表达的影响。结果:Hut-78细胞在CD3/CD28双信号通路共刺激30 min后,细胞核中p65的表达显著下降(P < 0.05)。三氧化二砷组p65表达要高于单纯CD3/CD28作用组。全细胞蛋白提取液中的p65表达水平的趋势与细胞核提取液类似。结论:T细胞经过CD3/CD28共刺激,细胞内NF-κB不能得到迅速活化,反而有下降的趋势。三氧化二砷能够促进NF-κB的早期活化。

    • 支气管哮喘大鼠模型的建立与气道反应性的测定

      2006(11):1018-1020. DOI: 10.7655

      摘要 (3143) HTML (50) PDF 0.00 Byte (155) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:为了探讨支气管哮喘的发病机制,建立一种由卵蛋白(OVA)致敏并诱发的支气管哮喘大鼠模型。方法:24只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组和哮喘模型组,每组12只。予卵蛋白腹腔注射并雾化吸入制作SD大鼠支气管哮喘模型。予乙酰胆碱(Ach)行支气管激发试验;以动物呼吸机测定呼气相气道阻力(Re);以病理图像分析系统测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数。结果:比较2组大鼠Re以及支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数,结果显示造模成功;相关分析显示,在80~160 μg/kg浓度梯度的Ach激发后,哮喘模型组Re值与其病理形态学改变正相关(P < 0.01)。结论:该方法能制备支气管哮喘大鼠模型;通过80~160 -滋g/kg浓度梯度的Ach激发后,Re的倍增可直接代表造模的成功。

    • 缬沙坦对哮喘大鼠气道炎症及气道反应性的影响

      2006(11):1021-1024. DOI: 10.7655

      摘要 (1980) HTML (41) PDF 0.00 Byte (91) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对哮喘大鼠气道炎症及气道反应性的干预作用。方法: 50只Wistar大鼠随机分成5组,每组10只:A组(正常对照组)、B组(哮喘组)、C组[15 mg/(kg·d)缬沙坦]、D组[30 mg/(kg·d)缬沙坦]和E组[50 mg/(kg·d)缬沙坦]。应用动物肺功能仪测定大鼠气道反应性,支气管肺泡灌洗液测定细胞总数及嗜酸性粒细胞( eosinophil,EOS)计数。结果:①与A组比,B组肺泡灌洗液中细胞总数和EOS计数增高(P < 0.05,P < 0.01),与B组比,缬沙坦干预后的C组、D组和E组肺泡灌洗液中细胞总数和EOS计数均减少(P < 0.05 ~ 0.01);与C组比,D组肺泡灌洗液中细胞总数和EOS计数均减少(P均 < 0.05)。②当氯化乙酰胆碱(ACH)以较低(10 ~20 μg/ml)浓度激发时,各组大鼠气道阻力(Re)比较差异无统计学意义(P均 > 0.05);Re在ACH(40~320 μg/ml)浓度时,哮喘组的Re较高,与对照组、A组、B组和C组比较差异有统计学意义(P均 < 0.05,320 μg/ml ACH时P < 0.01)。结论:缬沙坦可能是通过抑制AT1受体抑制哮喘气道炎症和降低气道反应性。

    • 组织因子抑制子基因局部转移对兔颈总动脉内膜增生的影响

      2006(11):1025-1027. DOI: 10.7655

      摘要 (2136) HTML (49) PDF 0.00 Byte (99) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 研究组织因子抑制子(TFPI)基因局部转移对兔颈总动脉损伤后内膜增生的影响。方法:36只新西兰纯种雄性大白兔随机分为腺病毒空载组,包载组织因子抑制子(TFPI)基因腺病毒组和生理盐水组(每组12只)。用球囊导管对实验兔行颈总动脉损伤,术后14天取病变血管,免疫组化染色观察表明TFPI在转移局部表达成功;病变最明显处取标本进行HE染色,光学显微镜下观察血管内膜增生,以计算机图像分析系统分析血管内膜﹑中膜和腔面积的变化,计算内膜增生细胞核抗原增殖指数。结果:TFPI基因局部转移后血管内膜面积明显减少,中膜面积不变,血管腔面积增大。结论:TFPI基因局部转移显著抑制颈总动脉损伤处血管内膜的增生,有可能防治再狭窄。

    • 冠状静脉窦腔内电图与局部肌袖电位的关系探讨

      2006(11):1028. DOI: 10.7655

      摘要 (2213) HTML (48) PDF 0.00 Byte (99) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨冠状静脉窦(冠状窦,coronary sinus, CS)腔内电图与局部肌袖电位的关系。方法:室上性心动过速行射频消融术的患者42例。窦性心律下,于冠状窦近端发放递减刺激。观察冠状窦A波激动顺序、波形变化、双电位的有无、冠状窦激动时间。结果:窦性心律时67%的患者的冠状窦远端A波为先正向后负向,波形较宽,成分多。递减刺激首先夺获窦口的A波,使之提前,激动方向改变为先负向后正向。但此时冠状窦远端的A波形态不变、不提前。随刺激的逐渐提前,冠状窦中段、远段的A波提前,且波形改变。窦性心律时,冠状窦激动时间为(24.37 ± 9.41)ms。刺激完全夺获冠状窦时,冠状窦激动时间为(34.62 ± 10.40)ms。两者有非常显著的差异。结论:冠状窦A波不是单纯的心房波,而是肌袖电位和左心房电位的融合波。

    • 高压负荷性心衰幼鼠病理生理及卡维地洛的干预

      2006(11):1032-1034. DOI: 10.7655

      摘要 (1874) HTML (44) PDF 0.00 Byte (108) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨后负荷过高的幼鼠慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)发生发展的病理生理及卡维地洛的干预。方法: 腹主动脉缩窄术制备幼鼠CHF模型。术后4周随机分3组:假手术对照组、CHF组、卡维地洛组。直接灌胃给药,8周后行血流动力学、心肌病理分析、心肌细胞凋亡及其检测血清中脂质过氧化物(LPO)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果:与假手术组比较,左、右心室相对重量(LVRW,RVRW)、收缩压(SBP)、 舒张压(DBP)、左室收缩压(LVSP) 、左室舒张末压( LVEDP)、凋亡指数(AI)、LPO均显著升高(P < 0.01~0.05);左室内压最大收缩率(+dp/dtmax) 、左室内压最大舒张率(-dp/dtmax) 、SOD均显著降低(P < 0.01)。与CHF组比较,卡维地洛组LVRW、RVRW、SBP、DBP、LVSP、LVEDP 、AI、LPO显著下降, +dp/dtmax、-dp/dtmax、SOD显著升高(P < 0.01)。 结论:心室重构、心肌细胞凋亡及氧化应激参与幼鼠CHF发生、发展的病理生理过程,而卡维地洛能延缓、抑制这一过程。

    • 冷保存时间对部分肝移植肝再生影响的实验研究

      2006(11):1035. DOI: 10.7655

      摘要 (2019) HTML (45) PDF 0.00 Byte (105) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:建立大鼠部分肝移植模型基础上,研究不同冷保存时间对移植肝再生相关细胞因子表达的影响。方法: 实验分为:冷保存30 mim部分肝移植组、冷保存4 h部分肝移植组和冷保存10 h部分肝移植组,观察各组生存率并分别于术后1、2、4天取肝组织,免疫组化检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)、TNF-α、IL-6的表达。结果:冷保存30 mim部分肝移植组、冷保存4 h部分肝移植组和冷保存10 h部分肝移植组存活率分别为79%、71%、29%,和其他实验组相比:冷保存10 h部分肝移植组PCNA、TNF-α、IL-6表达降低(P < 0.05)。 结论:随着冷保存时间的延长,降低了部分肝移植术后的肝再生能力和生存率。冷保存时间影响移植肝TNF-α和IL-6的表达,移植物中细胞因子TNF-α和IL-6的表达对移植肝肝再生过程中起重要的调控作用。

    • 11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因微卫星多态性与2型糖尿病的相关性研究

      2006(11):1038-1042. DOI: 10.7655

      摘要 (1785) HTML (42) PDF 0.00 Byte (94) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法: 选择11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因内含子4内高杂合度微卫星DNA多态标记,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探讨这一微卫星多态在中国南京汉族人群121例正常健康者和150例2型糖尿病患者之间等位基因频率分布差异。结果: 该多态位点存在8种等位基因,CA重复序列分别重复13、14、15、16、17、18、19和20次,病例-对照群体分析结果表明,两组间等位基因频率总体分布差异无显著性(χ2 = 8.9944, Ρ = 0.253)。但(CA)15等位基因糖尿病组频率高于正常组,有统计学意义(χ2 = 4.990,P = 0.025),可以初步认为(CA)15等位基因可能是糖尿病发生的危险因素。结论: 南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性可能与2型糖尿病有一定关系。

    • PON1基因微卫星多态性与2型糖尿病的关联研究

      2006(11):1043-1047. DOI: 10.7655

      摘要 (2073) HTML (56) PDF 0.00 Byte (136) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨南京地区汉族人群中对氧磷酶1基因(PON1)多态性与2型糖尿病是否存在相关性。方法:选择PON1基因附近高杂合度微卫星DNA多态标志,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探察这一微卫星多态在正常对照组与2型糖尿病组中的基因频率分布。结果:该多态位点存在4种等位基因,GT重复序列分别重复12、15、17、20次,病例与对照分析结果表示,两组间等位基因频率总体分布差异有显著性(χ2 = 14.10, P < 0.01)。两组间基因型频率总体分布差异有显著性(χ2 = 12.72,P < 0.01)。结论: 南京地区汉族人群中对氧磷酶1基因多态性可能与2型糖尿病相关。

    • 建立模式翻转视觉诱发电位推算外伤性视神经病变后视敏度的数学模型

      2006(11):1048-1050. DOI: 10.7655

      摘要 (2031) HTML (54) PDF 0.00 Byte (119) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨运用视觉诱发电位推算外伤性视神经病变视敏度的方法及价值。方法:对四川大学华西医院眼科门诊外伤性视神经病变病例42例42眼进行黑白方格翻转视觉诱发电位检查,刺激时间频率2.9 Hz、对比度100%,采用117、59、28、14、7 s大小的5个不同空间频率,记录各阈刺激时P1波潜伏期与波幅,采用直线相关与回归等统计分析。结果:阈刺激空间频率(X)与视敏度的对数值(Y)之间关系密切,两者之间的数学模型为■= -0.114-0.010X(r = 0.756,P﹤0.01),通过PRVEP推算的视敏度与平均视敏度之间无差别(P > 0.05)。阈刺激时PRVEP P1波潜伏期(X)与视敏度(Y)的对数值存在较好相关性,回归方程如下:■= -1.485 + 0.008X (r = 0.621, P﹤0.01)。结论:在常规眼科检查的基础上,应用PRVEP阈刺激空间频率与视敏度关系的数学模型估算外伤性视神经病变后视敏度有利于客观、准确地判断视功能障碍的程度。

    • 肝移植术后营养支持对移植肝功能影响

      2006(11):1051-1055. DOI: 10.7655

      摘要 (2180) HTML (48) PDF 0.00 Byte (104) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨非全肠外营养(TPN)、传统TPN及添加丙氨酰谷氨酰胺(Ala-Gln)的TPN对肝移植后移植肝功能的影响。方法:将35例肝移植患者随机分3组:术后未经TPN(饮食组)、不添加Ala-Gln的TPN组(传统组),添加Ala-Gln的TPN组(二肽组)。TPN于术后第2天予以等热量(每千克体重104.6 kJ)、等氮量(每千克体重0.16 g)共7天。 监测术后第2、9天肝功能指标。结果: 移植后第9天,二肽组的胆碱酯酶(CHE)与饮食组和传统组比较有更显著的升高(P < 0.01);传统组、二肽组的载脂蛋白B(APOB)与饮食组比较有更显著的升高(P < 0.01);二肽组的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)与饮食组和传统组比较有更显著的下降(P < 0.01、P < 0.05)。结论:肝移植术后进行TPN治疗,有利于移植肝合成功能的改善和缺血再灌注损伤的修复;而添加Ala-Gln的TPN治疗则更为有利。

    • 原位肝脏移植术后胆道并发症的诊治

      2006(11):1056. DOI: 10.7655

      摘要 (1911) HTML (43) PDF 0.00 Byte (79) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨原位肝移植术后胆道并发症的诊断和治疗。方法:总结2004年10月~2006年4 月在本院接受原位肝脏移植的117 例患者的临床资料,分析肝移植术后胆道并发症的诊断和治疗方法。结果:术后发生胆道并发症15 例(12.82%),其中7例发生胆道狭窄,1例胆道吻合口梗阻,2 例吻合口胆漏,T 管拔除后胆瘘2 例,胆泥瘀积或结石3 例,除1 例行再次移植外,其余经过引流、介入等治疗均获得满意的疗效。结论:肝移植术后胆道并发症发生的病因机制仍有许多方面值得研究探讨,及时预防、诊断、处理胆道并发症将明显地提高肝移植患者的生存期和生活质量。

    • 1,25-(OH)2-D3大剂量间隙疗法治疗中重度继发性甲旁亢

      2006(11):1058-1060. DOI: 10.7655

      摘要 (2899) HTML (48) PDF 0.00 Byte (198) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:观察1,25-(OH)2-D3大剂量间隙疗法治疗中重度继发性甲旁亢的临床疗效。方法:回顾性分析1996~2005年93例全段甲状旁素(iPTH) > 500 pg/ml的接受小剂量1,25-(OH)2-D3(0.25 -滋g ,每日1次,口服)治疗8周无效而改用大剂量1,25-(OH)2-D3(2 -滋g ,每周2次,口服)间隙疗法的患者资料,包括性别、年龄、平均透析年限、治疗前后iPTH、碱性磷酸酶(AKP)的平均水平,1,25-(OH)2-D3的剂量、疗程。治疗过程中血清钙、磷、AKP的水平以及相关的影像学资料。结果: 经口服2 -滋g、每周2次1,25-(OH)2-D3 8周的治疗,有74例患者iPTH有明显下降,差异有统计学意义;19例因高钙磷乘积退出观察,疗效不明显。经B超、ECT检查发现17例甲状旁腺增生,行甲状旁腺全切加自身前臂种植术,术后疗效良好。结论:1,25-(OH)2-D3大剂量间隙疗法治疗中重度继发性甲旁亢是一种行之有效的方法。对于治疗无效患者,如有甲状旁腺增生者可考虑手术治疗。

    • Pemberton关节囊周围髂骨截骨术治疗儿童发育性髋关节脱位

      2006(11):1061-1063. DOI: 10.7655

      摘要 (2724) HTML (48) PDF 0.00 Byte (157) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨Pemberton关节囊周围髂骨截骨术治疗儿童发育性髋关节脱位的手术适应证及治疗经验。方法: 回顾分析1999年6月以来本院采用Pemberton关节囊周围髂骨截骨术治疗的165例,192髋儿童发育性髋关节脱位病例。其中男31例,女134例。双侧23例,左侧79例,右侧67例。手术年龄18月~6岁63髋,6岁~12岁129髋。Tonnis分级,Ⅰ°12髋,Ⅱ°46髋,Ⅲ°95髋,Ⅳ°39髋。术中65髋使用同种异体皮质骨板。结果:术后随访4个月~7年,平均3年2个月。按Mckay标准评定髋关节功能,询问有无髋关节疼痛、跛行,检查髋关节活动程度以及Trendelenburg征,术后优良率达92.71%。按Severin标准评定X线表现,观察头、臼形态和相互关系及测量CE角,术后优良率达91.66%。结论: Pemberton关节囊周围髂骨截骨术手术疗效满意,为治疗儿童发育性髋关节脱位的一种重要术式。

    • 子宫平滑肌肉瘤27例临床分析

      2006(11):1064-1066. DOI: 10.7655

      摘要 (2790) HTML (48) PDF 0.00 Byte (101) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨子宫平滑肌肉瘤(leiomyosarcoma, LMS)的临床特点及影响预后的因素,以达到早期诊断、提高疗效及生存率。方法:对27例LMS临床特点、临床分期、疗效及预后等进行回顾性分析和总结。结果: ①子宫平滑肌肉瘤的发病年龄多在40~60岁(63%);LMS的主要临床表现为不规则阴道流血(29.6%)、月经不规则(18.5%)、腹痛(18.5%)、下腹部包块(11.1%)等。②术前或术中确诊7例,占25.9%;误诊为子宫肌瘤、子宫肌腺瘤17例,卵巢肿瘤3例,误诊率达74.1%。③8例Ⅰ期行单纯手术治疗,19例Ⅱ期及以上患者行手术加用化学治疗。④Ⅰ期患者5年生存率为87.5%,Ⅱ、Ⅲ期患者5年生存率分别为70.0%、20.0%,Ⅳ期为0%。结论:LMS发病年龄及临床表现无特异性,易被误诊,早期诊断较困难,手术是LMS的主要治疗方式;LMS预后与年龄、临床分期有关。力争术前或术中确诊,术后加以辅助治疗以减少复发和提高生存率。

    • 幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞动力学影响的研究

      2006(11):1067. DOI: 10.7655

      摘要 (1911) HTML (40) PDF 0.00 Byte (113) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞的凋亡/增殖比及凋亡相关基因表达的影响,从细胞动力学角度来探讨幽门螺杆菌的致病机制。方法:采用免疫组织化学和TUNEL法检测胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡和凋亡相关基因bcl-2、bax、c-Myc的表达变化,分析凋亡/增殖比、凋亡相关基因表达与幽门螺杆菌感染的关系。结果:幽门螺杆菌阳性胃溃疡、幽门螺杆菌阳性十二指肠球部溃疡、幽门螺杆菌阴性正常胃黏膜、幽门螺杆菌阳性慢性萎缩性胃炎、幽门螺杆菌阳性胃癌的胃上皮细胞凋亡/增殖比逐渐下降,依次为0.527 ± 0.148、0.452 ± 0.141、0.286 ± 0.034、0.182 ± 0.073、0.042 ± 0.004(P < 0.01),幽门螺杆菌阳性慢性浅表性胃炎与幽门螺杆菌阴性正常对照胃上皮细胞凋亡/增殖比差异无显著性(P > 0.05)。Bax、c-Myc在幽门螺杆菌阳性慢性浅表性胃炎组中的表达明显高于幽门螺杆菌阴性慢性浅表性胃炎组(P < 0.01);Bcl-2在幽门螺杆菌阳性和阴性的慢性浅表性胃炎均极少表达。结论:幽门螺杆菌可能通过影响Bax和c-Myc等凋亡相关基因表达而诱导胃上皮细胞凋亡,并进而导致胃黏膜上皮细胞动力学紊乱,这可能是幽门螺杆菌的致病机制之一。

    • 24 h食管pH及胆红素监测在胃食管反流诊治中的应用

      2006(11):1070-1073. DOI: 10.7655

      摘要 (2068) HTML (46) PDF 0.00 Byte (138) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨酸、胆汁与反流症状、消化不良症状、消化道以外的症状间关系以及24 h食管pH和/或胆红素监测在新型术式客观评价中的作用。方法:应用24 h食管pH及胆红素监测方法对68例有典型反流症状者,50例有消化不良症状者,20例咽部不适及哮喘,32例食管贲门癌不同术式患者进行监测。结果: ①68例有典型反流症状者发生反流占95.5%,而在50例有消化不良症状如有反胃、上腹饱胀、嗳气等而无典型反流症状者中发生反流占72%。②典型酸反流症状者中混合反流占51.4%,即发生反流者中有一半为酸和胆汁反流同时存在。③24 h食管pH监测,结果提示保留贲门的食管癌根治间置结肠代食管术治疗的患者发生酸反流者明显少于经典式食管癌根治术治疗者(29.4% vs 66.7%,P < 0.05)。结论:24 h食管pH及胆红素监测为临床诊断胃食管反流或十二指肠胃食管反流的存在提供了客观依据,为食管癌根治新术式的评价提供客观依据。

    • 仙地液对大鼠溃疡性结肠炎结肠组织中ICAM-1表达的影响

      2006(11):1074-1076. DOI: 10.7655

      摘要 (1704) HTML (42) PDF 0.00 Byte (85) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:检测大鼠结肠组织中的ICAM-1,观察中药灌肠对ICAM-1蛋白表达的影响,探讨中药灌肠治疗溃疡性结肠炎可能的作用机制及环节。方法:大鼠随机分为6个实验组,自由饮用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)水溶液诱导UC模型,以仙地液灌肠干预后,用Western Blotting免疫印迹增强化学发光的方法,以Actin为内参照半定量检测大鼠结肠黏膜及组织中ICAM-1蛋白的表达情况。结果:经中药灌肠干预后的大鼠与模型组相比结肠黏膜及组织中的ICAM-1含量均明显下降,P < 0.05。结论:中药灌肠可能通过下调溃疡性结肠炎结肠组织中的ICAM-1表达实现其治疗作用。

    • 介入化疗对消化道肿瘤患者血清sICAM和bFGF的影响及临床意义

      2006(11):1077-1079. DOI: 10.7655

      摘要 (1930) HTML (51) PDF 0.00 Byte (86) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨消化道肿瘤患者介入治疗前后血清可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化和临床意义。方法:采用双抗体夹心法(ELISA)测定35例中晚期消化道肿瘤患者介入化疗前后血清sICAM-1和bFGF的改变,并与30例健康对照组比较分析。结果:介入化疗组治疗前sICAM-1和bFGF均明显增高,与健康对照组比较差异显著(P < 0.01),伴有转移者显著高于不伴转移者(P < 0.05);化疗后介入化疗组sICAM-1和bFGF显著降低,治疗前后差异显著(P < 0.01)。其中介入化疗前sICAM-1和bFGF高表达者,半年后全部出现新的转移灶、病情恶化。结论: 介入化疗能显著降低肿瘤患者血清sICAM-1和bFGF的水平,联合检测sICAM和bFGF有助于判断肿瘤患者的预后。

    • 奥沙利铂联合ELF治疗40例晚期胃癌的临床近期疗效及不良反应观察

      2006(11):1080-1081. DOI: 10.7655

      摘要 (1942) HTML (45) PDF 0.00 Byte (85) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究奥沙利铂(L-OHP) 联合鬼臼乙叉甙(VP-16)、醛氢叶酸(CF)和5-氟尿嘧啶(5-Fu) 治疗晚期胃癌的疗效和不良反应。方法:晚期胃癌患者40例,化疗方案为:奥沙利铂 130 mg/m2静滴2 h(第1 天) , 醛氢叶酸100 mg/m2 静滴2 h(第1~5 天),5-Fu 500 mg/m2 静滴22 h(第1~5 天), 鬼臼乙叉甙 60 mg/m2静滴(第1~3 天)。每4周重复1次。结果:完全缓解(CR)3 例(7.5%),部分缓解(PR)23 例(57.5%),总有效率(CR + PR)为65 %,无变化(NC)10 例(25%),进展(PD)4 例(10%)。疾病中位进展时间(TTP)为6.1个月(2~15个月)。毒副反应以骨髓抑制及感觉性神经毒性为主,无Ⅳ°不良反应。Ⅰ°~ Ⅱ°反应中,神经毒性表现较明显,无化疗相关死亡。结论:奥沙利铂联合鬼臼乙叉甙、CF/5-FU治疗晚期胃癌疗效肯定,即使对于老年晚期胃癌的患者也表现出了较好的耐受性。值得临床进一步观察试用。

    • 应用组织多普勒成像技术评价右心室起搏室壁收缩功能

      2006(11):1082-1085. DOI: 10.7655

      摘要 (2165) HTML (45) PDF 0.00 Byte (84) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:应用组织多普勒成像(TDI)技术检测组织运动速度、应变与应变率等参数,评价其在右室心尖起搏(VVI)与房室顺序起搏(DDD)的改变规律对节段性心肌功能的影响。方法:选择近期安装永久起搏器行VVI起搏的患者30例归入VVI组,房室顺序起搏的患者32例归入DDD组,年龄匹配的正常人32例归入对照组,分析3组之间TDI指标的变化及其变化规律。结果:正常组、DDD组及VVI组各节段的PSV、PSS及PSSR测值均依次降低,但PSSR在3组之间无显著性下降,而PSV与PSS显著下降的节段数多为右心室壁节段。起搏组左心室节段PSVT、PSST及PSSRT显著延长,右心室壁则显著缩短。结论:TDI可以作为起搏后早期评价患者节段心肌收缩运动的无创指标。起搏后患者心肌运动速度与应变下降早于应变率下降。早期的右心室心尖起搏,左室节段收缩功能较正常并无显著性差异;而VVI起搏患者的右心室壁节段收缩功能较正常及房室顺序起搏显著减低。

    • 心肌梗死患者自体骨髓干细胞移植后近、中期心肌代谢及收缩功能的变化

      2006(11):1086. DOI: 10.7655

      摘要 (2191) HTML (49) PDF 0.00 Byte (85) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 研究自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)和单个核细胞(BMMNCs)经梗死相关冠状动脉(冠脉)移植对冠心病、心肌梗死患者近、中期心功能、心肌存活的影响及其安全性。方法:本项前瞻性、非随机、对照研究入选14例冠心病伴心肌梗死患者(其中8例患者为细胞治疗组,6例为常规治疗组)。细胞移植组患者,通过冠脉转运将BMSCs和BMMNCs植入心肌梗死区。两组患者均于术前和术后3、8个月分别行双核素SPECT心肌显像、二维超声心动图、6 min步行试验及动态心电图检查。结果:移植组患者在梗死相关冠脉开通后注入干细胞,8例心功能从Ⅱ~Ⅳ级提高至Ⅰ~Ⅱ级,6 min步行试验从320.72 ± 60.47 m提高至(406.88 ± 68.31)m,6个月后又提高至(484.79 ± 81.00)m。6例前壁心梗患者3、8个月后 LVEF由术前的42.5%提高至49.5%和54.0%;心肌双核素检查缺损区占整个心肌体积术后3、8个月由术前的45.5%减少至39.0%和25.0%。6例对照组患者术后3个月EF较术前提高,心肌双核素检查缺损区占心肌体积减少,术后8个月与术后3个月无明显改变。2例下壁心肌梗死患者经干细胞移植临床效果不明显。结论:自体BMSCs和MMNCs经冠脉移植治疗冠心病心肌梗死,可以显著改善前壁心肌梗死患者左室收缩功能和心肌代谢,移植术后8个月仍能观察到重建心肌效应。

    • 国产室间隔封堵器治疗膜部室间隔缺损的临床观察及长期随访

      2006(11):1090-1091. DOI: 10.7655

      摘要 (1888) HTML (51) PDF 0.00 Byte (93) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:应用国产“心健”室间隔封堵器治疗膜部室间隔缺损并对其疗效进行观察和长期随访。方法:膜部室间隔缺损患者25例,年龄(14.18 ± 12.22)岁,室缺直径(4.76 ± 2.31)mm,经鞘管送入国产“心健”室间隔缺损封堵器对室缺进行封堵,术中和术后应用左心室造影和超声心动图观察封堵效果;术后6月、1年和2年进行心脏超声和动态心电图随访。 结果:术中和术后应用左心室造影和超声心动图观察无残余分流和并发症;术后6个月、1年和2年随访,未见残余分流,伞型无变化,各腔室径恢复正常,血流动力学恢复正常,未见并发症。结论:国产“先健封堵器”治疗膜部室间隔缺损成功率高,疗效可靠、安全,远期效果稳定。

    • 纤维支气管镜检查在肺不张诊断中的应用(附65例报告)

      2006(11):1092-1094. DOI: 10.7655

      摘要 (2188) HTML (49) PDF 0.00 Byte (136) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨纤维支气管镜检查在肺不张病因诊断中的应用价值。方法:回顾性分析65例肺不张患者纤维支气管镜检查的临床资料,镜检过程中行常规的内镜取材技术,如腔内钳取活检、支气管刷检、选择性支气管灌洗,而且镜检后留痰进行细胞学和细菌学检查。结果:纤维支气管镜对肺不张的诊断率为87.7%(57/65),肺不张分别位于右肺43例(66.2%)、左肺22例(33.8%),尤其在右中叶容易发生(32.3%),肺不张最主要的病因是肺癌(56.9%)和感染性炎症(24.6%)。钳取活检、支气管刷检和选择性支气管灌洗的诊断率分别为55.4%, 50.7%和30.8%,镜检后痰检可增加诊断率9.2%。结论: 纤维支气管镜检查对肺不张病因有较高的诊断价值,镜检后痰检有助于提高诊断率。

    • 联合应用常规及改良超滤对儿童体外循环围手术期细胞黏附分子及细胞因子的影响

      2006(11):1095-1099. DOI: 10.7655

      摘要 (1905) HTML (47) PDF 0.00 Byte (101) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨儿童体外循环(CPB)心脏直视手术围手术期细胞黏附分子及细胞因子变化规律,以及联合应用常规和改良超滤对炎症介质的影响,并对联合超滤作用的临床意义进行讨论分析。方法:抽取儿童心脏直视手术患者19例,随机分为对照组与超滤组,对照组10例,超滤组9例,常规进行CPB心脏直视手术。超滤组在主动脉开放后开始常规超滤,CPB结束时进行改良超滤。分别于麻醉诱导后、主动脉阻断、主动脉开放或超滤前、CPB结束或超滤后、术后24 h抽血检测血浆白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的变化及超滤的影响。结果:对照组血IL-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1均在CPB结束时达到高峰,显著超过CPB前水平(P < 0.01)。使用联合超滤能够明显降低血浆IL-6、IL-8及ICAM-1的浓度。与对照组相比,在超滤结束时明显降低(P < 0.05,P < 0.01,P < 0.05)。而对VCAM-1影响较小,在CPB结束时两组间无差异(P > 0.05)。结论: 低温体外循环可以引起术后细胞黏附分子表达和细胞因子释放增多,联合应用常规及改良超滤不仅能减轻CPB术后组织水肿,提高血球压积和血红蛋白,同时能降低术后血浆细胞黏附分子及细胞因子的浓度。

    • 成人法洛四联症的围手术期治疗

      2006(11):1100-1102. DOI: 10.7655

      摘要 (1874) HTML (33) PDF 0.00 Byte (132) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:总结回顾15岁以上法洛四联症患者的围手术期治疗经验。方法:1997年10月~2006年1月手术治疗50例15岁以上法洛四联症患者,年龄15~57岁,平均(21.96 ± 7.42)岁。手术治疗的关键是妥善疏通右心室流出道,用涤纶补片修补室间隔缺损并矫正主动脉骑跨,11例行不跨瓣流出道补片,30例行跨瓣流出道补片。结果:手术死亡1例(2%),其余患者心功能及临床表现均得到明显改善。结论:完善的外科矫治与修复及严密的围手术期处理是手术成功的关键,随访结果显示近期和远期效果满意。

    • 中央型肺癌手术治疗体会(附78例报告)

      2006(11):1103-1105. DOI: 10.7655

      摘要 (2002) HTML (45) PDF 0.00 Byte (93) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:总结采用以支气管袖状成形肺叶切除术为核心的多种切除重建术式治疗78例中央型肺癌的临床疗效。方法:1988 年6月至2005年6月,对78例中央型肺癌患者施行以支气管袖状成形肺叶切除术为核心的多种切除重建手术。支气管环状切除成形及支气管袖状成形肺叶切除术57例;支气管肺动脉双袖状成形肺叶切除术15例;气管隆突及半隆突切除重建合并肺叶切除术6例。结果:本组无手术死亡病例。发生手术并发症7例次,发生率为8.86%。术后1、3、5和10年生存率分别为78.5%、59.5%、35.4%和17.7%。结论: 以支气管袖状成形肺叶切除术为核心的多种切除重建术式最大限度地保留了肺功能,提高了中央型肺癌的治愈率和远期生存率。

    • 无创血流动力学监测系统在子痫前期的临床应用

      2006(11):1106-1108. DOI: 10.7655

      摘要 (2159) HTML (51) PDF 0.00 Byte (100) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨数字化无创血流动力学监测系统在子痫前期患者心功能测定方面的临床应用价值。方法:采用Bioz com数字化无创血流动力学监测系统检测177例妊娠晚期孕妇(重度子痫前期66例、轻度子痫前期64例、健康孕妇47例)心率(HR)、平均动脉压(MAP)、心脏指数(CI)、心输出量(CO)、每搏指数(SI)、每搏量(SV)、周围血管阻力指数(SVRI)、周围血管阻力(SVR)、心肌加速度指数(ACI)、速度指数(VI)、胸液水平(TFC)、左心作功指数(LCWI)、收缩时间比率(STR),同时48 h动态监测25例重度子痫前期患者治疗前后的血流动力学变化,分析各项参数与临床征象的关系。结果:①与健康孕妇比较,子痫前期患者MAP、SVRI、SVR、TFC 显著增高(P < 0.01),CI、CO、SI、SV、ACI、VI显著降低(P < 0.01),HR、LCWI、STR差异无显著性(P > 0.05)。②与轻度子痫前期组比较,重度子痫前期组MAP、SVR、SVRI和TFC显著增高(P < 0.01),CI、CO、VI显著降低(P < 0.01,P < 0.05,P < 0.05),SV、SI、ACI、LCWI、STR差异无显著性(P > 0.05)。③48 h动态监测25例重度子痫前期患者治疗前、后的血流动力学各项指标,差异均无显著性(P > 0.05)。结论:无创血流动力学监测系统可以实时、连续评价心脏血管功能,为临床诊断和治疗提供依据。

    • 头孢羟氨苄胶囊人体生物利用度及生物等效性研究

      2006(11):1109. DOI: 10.7655

      摘要 (2122) HTML (43) PDF 0.00 Byte (98) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究头孢羟氨苄胶囊在健康志愿者体内的生物利用度及生物等效性。方法:20例健康志愿者随机交叉口服2种头孢羟氨苄胶囊各1 000 mg,以对氨基苯甲酸为内标,采用反相HPLC法测定血中药物浓度。结果:健康志愿者口服2种头孢羟氨苄胶囊1 000 mg后Cmax分别为(23.37 ± 3.64)μg/ml和(23.62 ± 3.15)μg/ml;Tmax分别为(1.6 ± 0.3 h)和(1.7 ± 0.3)h;AUC 0--8分别为(84.61 ± 10.93)μg·h/L和(88.24 ± 10.99)μg·h/L;T1/2分别为(1.74 ± 0.28)h和(1.68 ± 0.21)h。各参数经统计学双单侧t检验,均差异有显著性(P < 0.05)。结论:2种头孢羟氨苄胶囊在健康志愿者体内的药动学参数相似,具有生物等效性。

    • 肾脏疾病患者血液低凝状态及其临床意义

      2006(11):1112-1114. DOI: 10.7655

      摘要 (2648) HTML (60) PDF 0.00 Byte (182) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨肾脏疾病患者血液低凝状态及其临床意义。方法:检测 633例肾脏疾病患者凝血4项指标:凝血酶原时间 (PT)、活化的部分凝血活酶时间 (APTT)、纤维蛋白原含量测定(FIB) 和凝血酶时间(TT),对其中指标异常者增加检测了纤溶酶原(PLG)、DIII二聚体(DIIID)、抗凝血酶--Ⅲ(AT-Ⅲ)、血管性假性血友病因子(vWF) 、肾功能的尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)。结果:633例患者中,39例患者(6.2%)的上述指标均有不同程度的延长或增加,即呈现低凝状态, 其中蛋白尿5例(0.8%)、慢性肾功能衰竭17例(2.7%)、急性肾功能衰竭4例(0.6%)和肾病综合征13例(2.1%)。结论:有约6.2%肾脏疾病患者处于低凝状态,建议在临床常规治疗前增加检测抗凝指标和纤溶指标,避免这类患者出现出血现象或使出血的症状意外加重。

    • 术中动脉瘤破裂的原因探讨及处理

      2006(11):1115-1116. DOI: 10.7655

      摘要 (2049) HTML (37) PDF 0.00 Byte (101) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:分析和总结颅内动脉瘤术中破裂的原因及处理措施。方法:对近10年手术的326例脑动脉瘤发生术中破裂的31例患者进行了回顾性分析。结果:本组发生率为9.5%,其原因主要有:①剪开硬脑膜(6.5%);②脑组织过度牵拉 (16.1%);③血肿清除(16.1%):④解剖分离载瘤动脉和动脉瘤颈(38.7%);⑤放置和调整动脉瘤夹(22.6%)。且早期破裂较晚期预后差(P < 0.05),破裂持续时间与预后密切相关(P < 0.01)。双吸引器吸引,临时阻断以及小止血纱布压迫出血部位是控制出血的有效方法,超早期破裂往往需迅速切除部分脑叶以尽快达到出血部位。结论:对动脉瘤术中破裂随时要有充分思想准备,并根据不同原因采取相应措施。采用显微手术、临时阻断载瘤动脉、避免过度钝性牵拉瘤体可减少术中破裂的发生。

    • 三种食管贲门癌手术疗效总结

      2006(11):1117-1118. DOI: 10.7655

      摘要 (1799) HTML (49) PDF 0.00 Byte (102) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 右腋下小切口在房室间隔缺损手术中的应用

      2006(11):1118-1119. DOI: 10.7655

      摘要 (2225) HTML (52) PDF 0.00 Byte (82) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 局部晚期分化型甲状腺癌的外科治疗

      2006(11):1120-1121. DOI: 10.7655

      摘要 (2042) HTML (59) PDF 0.00 Byte (78) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 电视胸腔镜下胸交感神经切断术治疗手汗症的临床应用

      2006(11):1121-1122. DOI: 10.7655

      摘要 (2059) HTML (42) PDF 0.00 Byte (80) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 胫骨平台骨折关节镜辅助下手术治疗

      2006(11):1123-1124. DOI: 10.7655

      摘要 (1821) HTML (41) PDF 0.00 Byte (83) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 逆行髓内扩张式自锁钉治疗肱骨干骨折32例

      2006(11):1124-1125. DOI: 10.7655

      摘要 (1789) HTML (47) PDF 0.00 Byte (80) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 经尿道前列腺电切术后尿道狭窄的治疗体会

      2006(11):1126-1127. DOI: 10.7655

      摘要 (1903) HTML (47) PDF 0.00 Byte (77) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 后腹腔镜肾囊肿手术30例疗效观察

      2006(11):1127-1128. DOI: 10.7655

      摘要 (1857) HTML (44) PDF 0.00 Byte (112) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 功能性鼻内镜手术治疗鼻黏膜接触性头痛

      2006(11):1128-1129. DOI: 10.7655

      摘要 (1856) HTML (42) PDF 0.00 Byte (81) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 99mTc-MIBI乳腺亲肿瘤显像的临床应用

      2006(11):1130-1131. DOI: 10.7655

      摘要 (2058) HTML (50) PDF 0.00 Byte (87) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 原发性直立性低血压1例

      2006(11):1132-1133. DOI: 10.7655

      摘要 (1898) HTML (44) PDF 0.00 Byte (75) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 经腹膜外腹腔镜前列腺癌根治术的护理

      2006(11):1133-1134. DOI: 10.7655

      摘要 (2648) HTML (41) PDF 0.00 Byte (94) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 法洛四联症患儿术后循环和呼吸的护理体会

      2006(11):1134-1135. DOI: 10.7655

      摘要 (1815) HTML (52) PDF 0.00 Byte (77) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 重度有机磷农药中毒呼吸肌麻痹机械通气的护理

      2006(11):1135-1137. DOI: 10.7655

      摘要 (1642) HTML (41) PDF 0.00 Byte (77) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 糖尿病足危险因素的分析和预防

      2006(11):1137-1138. DOI: 10.7655

      摘要 (1682) HTML (40) PDF 0.00 Byte (82) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 大面积烧伤患者气道湿化的护理体会

      2006(11):1139-1140. DOI: 10.7655

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      摘要:

    • 腹腔镜下胰腺假性囊肿内引流术2例的护理体会

      2006(11):1140-1141. DOI: 10.7655

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      摘要:

    • 室间隔缺损封堵术后并发机械性溶血的护理

      2006(11):1142-1142. DOI: 10.7655

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    • 手术室护士职业性损伤防护现状调查与对策

      2006(11):1143-1144. DOI: 10.7655

      摘要 (1711) HTML (50) PDF 0.00 Byte (71) 评论 (0) 收藏

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