摘要:目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系-方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系-真核细胞中GlyRα1的表达分别用RT-PCR与Western blot方法检测-结果:在7株转染并经G418 反复筛选的HEK293细胞系中,有4株细胞系明显表达GlyRα1的mRNA及其蛋白质,其余3株细胞表达较弱或者没有表达-结论:用pcDNA3.1-GlyRα1转染的HEK293细胞经G418筛选,可成功建立GlyRα1稳定表达系-

摘要:目的:构建pEGFP-N1-heNOS真核表达重组质粒-方法:应用基因重组手段,根据人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)基因序列和表达载体pEGFP-N1质粒上的多克隆位点设计了1对引物,对含有heNOS基因的质粒pBluescript Ⅱ SK-heNOS进行了PCR扩增,得到了约3.6 kbp的目的片段-将其插入到载体启动子下游,与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因融合,重组质粒经菌液PCR-限制性内切酶酶切和测序进行鉴定-结果:用PCR方法成功从质粒pBluescript Ⅱ SK-heNOS中扩增出heNOS基因片段,经菌液PCR-酶切及测序鉴定,heNOS基因成功插入到载体pEGFP-N1质粒中,插入目的基因的真核表达载体的酶切图谱与预期一致,并且heNOS基因与Genbank所提供的序列完全一致-结论:成功构建了pEGFP-N1-heNOS真核表达重组质粒-

摘要:目的:采用逆转录病毒载体系统构建荧光标记的K562细胞模型-方法:将增强绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA插入载体pCMV-hyg,构建重组质粒pCMV-EGFP-hyg,并与逆转录病毒载体质粒pCMV-G和pCMV-GP共转染293T细胞生产重组逆转录病毒,感染K562细胞;通过Hyg筛选建立EGFP自身标记的K562细胞模型-应用流式细胞仪及荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达-比较EGFP-K562细胞与K562细胞生长曲线-通过外周血淋巴细胞的NK活性试验观察EGFP-K562能否用于有关实验研究-结果:应用EGFP cDNA成功构建pCMV-EGFP-hyg,与逆转录病毒载体系统质粒共转染293T细胞后产生含EGFP的重组逆转录病毒,48 h收集的病毒滴度达1.5 ×106 CFU/ml-重组逆转录病毒感染K562细胞后,经Hyg筛选,98%以上稳定表达EGFP-长期培养20代,EGFP表达稳定,对K562细胞生长无影响-以EGFP-K562为靶细胞的NK活性试验显示40 ∶ 1 效靶比,孵育4 h最敏感-结论:应用逆转录病毒载体系统成功构建稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP-K562细胞模型,NK活性试验提示EGFP-K562可用作实验研究的新型靶细胞模型-

摘要:目的:探讨游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及其可能的作用机制-方法:用FFA(100 μg/ml)刺激小鼠成纤维细胞株3T3-L1;构建11-茁-羟化类固醇脱氢酶1(11-茁-hydroxysteroid dehydrogenase type 1, 11-茁-HSD1)的SiRNA 表达质粒pGCsilencerTM H1/TetO1-11-茁-HSD1转染到3T3-L1细胞中并稳定表达,Western blot验证转染效率;采用荧光定量PCR检测脂肪细胞分化相关标志基因:过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ),CAATT增强子结合蛋白α(CAATT enhancer binding proteins α,C/EBPα),脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)和脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS) mRNA表达量的改变以及FFA刺激时11-茁-HSD1的基因表达水平-结果:FFA刺激后,分化指标PPARγ-C/EBPα-LPL和FAS的mRNA表达量增加,促进了脂肪细胞的分化(P < 0.01); 同时11β-HSD1基因的表达增加(P < 0.05);11β-HSD1基因沉默后,分化指标的mRNA表达量降低,脂肪细胞的分化能力下降(P < 0.01)-结论:FFA和11-茁-HSD1都能促进脂肪细胞分化,FFA的成脂作用可能通过增加11-茁-HSD1的表达实现-

摘要:目的:探讨舒林酸在预防消化道肿瘤中对人γδT细胞的影响-方法:异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞-不同浓度的舒林酸诱导γδT细胞和胃腺癌细胞(SGC-7901),流式细胞术检测培养前后的γδT细胞表面标记及检测舒林酸诱导的γδT细胞和SGC-7901细胞凋亡百分率-乳酸脱氢酶法测定γδT细胞的杀伤活性-结果:γδT细胞培养10天时从扩增前4.21%增加到70.35%,CD44达94.0%-舒林酸在100 -滋mol/L时对γδT细胞的生长抑制率达42.1%,明显高于对SGC-7901抑制率(7.4%)-γδT细胞和胃腺癌细胞SGC-7901细胞经不同浓度的舒林酸诱导24 h后杀伤SGC-7901细胞作用在12.5 μmol/L时最强-舒林酸浓度在100 -滋mol/L时对γδT细胞作用24 h的凋亡率(52.71%)显著高于SGC-7901细胞(7.88%)-结论:舒林酸在临床常规使用的药物浓度时可增强γδT细胞杀伤瘤细胞作用,超过这一浓度可明显抑制γδT细胞的增殖能力和杀伤活性,而对胃癌细胞株抑制作用不明显-这一结果为临床非甾体类药物预防消化道肿瘤的用量提供了实验依据-

摘要:目的:观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者血清中的IL-6对脐血CD34+造血干细胞(Hematopoietic precursor cells,HPCs)来源的树突状细胞(Dendritic cells, DCs)分化发育的影响-方法:免疫磁珠法(MACS)分离纯化脐血CD34+ HPCs,GM-CSF+IL-4+TNF-α方案诱导其分化形成DCs-在培养过程中,分别加入正常人血清和IL-6水平升高的SLE血清,并通过IL-6抗体的中和作用,观察IL-6对DCs分化发育的影响-流式细胞术检测DCs表型(HLA-DR-CD80-CD86-CD83-CD1a),细胞增殖/毒性试剂盒(CCK-8)分析DCs刺激同种异体T细胞增殖的能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测DCs分泌IL-12-IL-10-IFN-γ的水平-结果: SLE患者血清中的IL-6水平较正常人升高;在高IL-6的SLE血清作用下,脐血CD34+ HPCs可分化形成不表达IL-10-IFN-γ的DCs,其HLA-DR-CD80-CD86的表达上调,刺激同种异体T细胞增殖的能力增强,但IL-12的分泌水平却有所下降-结论:SLE血清中显著升高的IL-6对CD34+造血干细胞来源的DCs的分化发育产生了异常影响,改变了DCs的特性,可能参与SLE的发生和发展-

摘要:目的:探讨从健康人外周血中体外诱导培养出成熟树突状细胞(dendritic cell, DC)的方法-方法:用密度梯度离心法分离人外周单个核细胞(PBMC),再用贴壁法获取单核细胞后加入GM-CSF和IL-4,培养5天后分5组:第1组为对照组,仅含有上述细胞因子;第2组,加入多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸[Poly(I:C)];第3组,加入钙离子载体(A23187);第4组,加入Poly (I:C)和CI;第5组,加入TNF-α-显微镜下观察培养细胞形态,流式细胞术检测DC表型,体外同种混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC刺激T细胞的增殖活性-结果:第四组细胞具有典型的树突状细胞的特征,且高表达CD83-CD80-CD86和CD40分子,具有更强的刺激T细胞增殖能力-结论:经过组合细胞因子诱导能够培养出PBMC来源的DC,且经CI和Poly(I:C)进一步诱导后获得更成熟和功能更强DC-

摘要:目的:研究脊髓损伤后轴突导向因子slit-2的表达变化,同时观察大鼠行为学及脊髓形态学的变化特点-方法:40只成年SD大鼠随机分为正常组,假手术组和手术1-3-7-14-21-28天组,制作脊髓右侧半横断损伤模型,BBB法进行右下肢功能评分,HE染色观察损伤脊髓不同时期的形态学变化,原位杂交法观察slit-2 mRNA的表达变化,计算阳性细胞灰度值,并进行统计学分析-结果: 大鼠脊髓损伤后,肢体瘫痪从第7天开始明显恢复直至第28天;形态学显示了从局部血肿形成,到周围炎性细胞浸润再到损伤位点远端和近端的脊髓组织逐渐发生空泡变性的过程;原位杂交结果为正常组和假手术组脊髓前角运动细胞slit-2 mRNA的表达较低,脊髓损伤后第3天,损伤位点近端前角运动神经元中slit-2 mRNA的表达明显增加,第7天与第14天前角运动神经元中slit-2 mRNA的表达较前一时间组明显下降,并持续表达至28天,各组较假手术组表达明显增高,同时,第7天组损伤位点周围反应性增生的细胞中slit-2 mRNA的表达明显上升- 结论:成年哺乳动物脊髓损伤是一个动态变化的复杂过程,轴突导向因子slit-2可能通过介导炎性细胞的迁移及与炎性细胞分泌的若干介质和因子相互作用排斥新生轴突的生长,阻止其穿过损伤部位与远端重建突触联系;损伤切口周围反应性增生的细胞中slit-2 mRNA的表达上升提示了其可能参与损伤后的胶质瘢痕及抑制性微分子环境的形成-

摘要:目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在急性肝损伤大鼠肝脏内移植情况-方法:首先行大鼠骨髓间充质干细胞提取-分离和培养,传代扩增后用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU )标记,用D-氨基半乳糖(1.5g/Kg)腹腔注射制备大鼠急性肝损伤模型,试验分三组(A-B-C组),经阴囊上静脉向肝损伤组(A组)及肝脏正常(C组)的大鼠移植标记BrdU的BMSCs 1~1.5×106,同时向肝损伤组(B组)的大鼠移植等量的生理盐水-2周后观察大鼠的存活率及肝功能恢复情况,并通过免疫组织化学方法检测大鼠肝脏中BrdU+细胞数量及分布-结果:移植2周A组-B组动物存活率-肝功能恢复情况无明显差异,肝损伤组(A组)及肝脏正常组(C组)大鼠肝脏均可检测到BrdU+细胞分布,A组与C组相比,A组BrdU+细胞数较多,分布更广,差异有统计学意义(P < 0.05)-结论:骨髓间充质干细胞可以在受损的肝脏及正常肝脏定植,定植的数量可能和肝脏是否受损伤相关-

摘要:目的:研究尾静脉注射人骨髓间质干细胞(hMSCs)移植治疗实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠的疗效及移植后hMSCs在EAE大鼠体内的状况-方法:分离和纯化hMSCs-用豚鼠脑脊髓匀浆免疫Wistar大鼠制备EAE大鼠模型,分别在免疫后10-15-21天经尾静脉注射移植未分化的hMSCs入大鼠体内,通过电镜,动物模型神经功能评分,病理观察hMSCs对EAE大鼠的疗效,利用免疫组化方法观察移植后的hMSCs在EAE大鼠体内存活-迁徙-分化的状况-结果:免疫后10天和15天hMSCs移植组大鼠自移植后10天起其神经功能评分显著低于对照组(P < 0.05);在电镜下治疗组髓鞘超微结构改变明显轻于对照组;病理上各移植组在移植后10-30天脑内脱髓鞘病灶数目明显少于对照组(P < 0.05)-hMSCs移植组各时间点大鼠脑组织切片中均可见Brdu-NSE-GFAP-CNPase染色阳性细胞,CNPase(+)的少突胶质细胞比例随时间的延长而逐渐增多-结论:hMSCs移植能有效改善EAE动物的神经功能评分,减少脱髓鞘病灶数目,并且在体内微环境改变信号的影响下分化成神经元-星型胶质细胞-少突胶质细胞-

摘要:目的:建立一种高效,稳定的从小鼠骨髓中同时分离培养间充质干细胞(MSC)和内皮祖细胞(EPC)的方法-方法:从小鼠骨髓分离单个核细胞,经差速贴壁结合专用血清或特殊培养基分别扩增MSC和EPC-以成骨-成脂诱导分化鉴定MSC,并以流式细胞术(FCM)检测MSC纯度;以Dil-ac-LDL-FITC-UEA-1荧光双标,结合vWF-CD31免疫组化染色鉴定EPC,并计算其纯度-结果:早期贴壁细胞48 h换液时即可见明显集落形成,1周后即达80%融合,传至第3代后经诱导能够向成骨细胞和脂肪细胞分化,FCM检测CD29-CD34-CD45-CD90阳性率分别为(93.86 ± 1.12)%,(0.48 ± 0.38)%,(1.89 ± 1.49)%,(94.11 ± 3.32)%;2次贴壁细胞经EGM-2 MV专用培养基培养后,第3天开始伸展,第5天可见集落形成,约2周左右可融合近80%,传代后Dil-ac-LDL-FITC-UEA-1双荧光染色阳性率(75.2 ± 4.5)%,vWF-CD31免疫组化染色阳性率分别为(55.7 ± 4.7)%和(52.5 ± 3.6)%-结论:采用该方法可以同时培养扩增骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞,效率高,稳定性和重复性好-

摘要:目的:探讨大鼠妊娠不同阶段胰岛形态及β细胞增殖的变化-方法:采用5-溴尿脱氧嘧啶核苷(BrdU)及抗胰岛素抗体免疫组化双染法,通过形态学及量化分析,研究大鼠妊娠10.5-12.5-14.5-18.5和20.5天时胰岛形态的改变及β细胞的增殖率的改变-结果:与正常对照组相比, 大鼠妊娠12.5天时胰岛素染色阳性区域平均光密度-胰岛素相对浓度(IRC)-胰岛素阳性表达细胞密度(PCD)以及胰岛β细胞增殖指数(PI)均明显增高,并于孕14.5天到达高峰,而后逐渐下降至对照组水平-此外,大鼠妊娠14.5天至20.5天时胰岛素阳性表达细胞面积亦明显高于正常水平-结论:大鼠妊娠期胰岛β细胞的增殖能力和胰岛素表达,均从孕12.5天开始发生改变,孕14.5天变化最为显著,并持续至孕晚期(孕20.5天)-

摘要:目的:比较乳腺癌患者血清抗酒石酸酸性磷酸酶(Tracp5b)-糖类抗原-153(CA-153)及癌胚抗原(CEA)诊断乳腺癌骨转移的临床价值-方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)及电化学发光法检测18例健康女性-26例无骨转移的乳腺癌患者及32例乳腺癌骨转移患者的血清Tracp5b-CA-153及CEA水平-结果:乳腺癌骨转移组的血清Tracp5b水平较无骨转移组及健康对照组明显升高,差异有统计学意义(P < 0.05);血清Tracp5b诊断乳腺癌骨转移的敏感性为78.13%,特异性为86.36%;CA-153的敏感性为37.50%,特异性为77.27%;CEA的敏感性为21.88%,特异性为84.09%;Tracp5b的敏感性较CA-153-CEA高,差异有统计学意义(P < 0.05)-结论:Tracp5b可以作为诊断乳腺癌骨转移的血清标记物之一-

摘要:目的:比较紫杉醇脂质体与紫杉醇注射液对S180腹水瘤小鼠的肿瘤抑制效果-方法:采用逆向蒸发法及超声法制备紫杉醇脂质体,以激光粒度散射仪测定粒径,以反向高效液相法测定脂质体中紫杉醇药物含量-采用S180细胞昆明鼠腹腔内注射形成腹水瘤模型,肿瘤种植24 h后随机分成4组,分别为空白对照组-空白脂质体组-紫杉醇注射液组-紫杉醇脂质体组-每组5只,其中两组分别以紫杉醇脂质体和紫杉醇注射液腹腔注射,其他2组分别给予生理盐水和空白脂质体腹腔注射,共给药4次,给药间隔72 h-结果:紫杉醇脂质体平均粒径为(282.40 ± 8.94)nm,药物包封率为91%-肿瘤种植14天后,空白对照组-空白脂质体组-紫杉醇注射液组小鼠形成大量腹水,腹膜-肝脏广泛转移;紫杉醇脂质体组仅形成少量腹水,腹膜-肝脏未见转移-结论:紫杉醇脂质体腹腔内给药可以明显抑制腹水形成,有效抑制腹腔转移-

摘要:目的:探讨经胸猪左心耳封堵术后不同时期外周血白细胞介素-6( IL-6)-C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)-von willebrang factor(VWF)-plasma P-selectin(Ps)的变化-方法:选用苏钟猪17只,一组12只采用开胸并经导管置入左心耳封堵器(封堵组),另一组5只仅开胸未行封堵(对照组),应用酶联免疫吸附试验(ELISA) 测定血IL-6-CRP-VWF-Ps的变化-结果:封堵组IL-6-CRP-VWF-Ps水平在术后即刻较术前增加(P < 0.05);术后1个月和3个月时的IL-6-CRP-VWF-Ps较术前比较无统计学意义(P > 0.05)-对照组术后即刻IL-6-CRP-VWF-Ps水平较术前增加(P < 0.05)-封堵组与对照组比较,术前和术后各时点IL-6-CRP-VWF-Ps水平无统计学意义(P > 0.05)-结论:IL-6-CRP-VWF-Ps水平在左心耳封堵术后有一过性增高,其炎症反应与封堵无关,而与开胸手术有关,该封堵器引起的炎症反应及血管内皮损伤较轻,生物相容性好-

摘要:目的:研究子痫前期患者血清及尿液中胎盘生长因子水平的变化特征,并探讨血清及尿液中胎盘生长因子水平的相关性-方法:检测并比较20例轻度子痫前期患者-15例重度子痫前期患者及20例正常晚期妊娠妇女血清及尿液胎盘生长因子(placenta growth factor,PlGF)水平,并分析55例子痫前期患者及对照组孕妇血清及尿液中胎盘生长因子水平的相关性-结果:轻度子痫前期组-重度子痫前期组-对照组血清PlGF分别为(36.13 ± 17.29)-(23.40 ± 9.88)-(44.04 ± 19.26)pg/ml, 尿PlGF分别为(939.20 ± 474.94)-(587.20 ± 381.86)-(961.65 ± 584.58)pg/mmol-重度子痫前期组血清及尿液PlGF均低于正常晚期妊娠组及轻度子痫前期组PlGF平均水平,差异有显著性意义(P < 0.05);尿液PlGF水平与血清PlGF水平成正相关,相关系数为0.713(P < 0.05)-结论:重度子痫前期患者血清及尿液PlGF水平显著降低,且尿PlGF水平与血清PlGF水平成正相关,可以用尿液PlGF水平检测替代血清PlGF水平研究PlGF与子痫前期发病关系,并为子痫前期的临床监测及诊治提供更便捷的方法-

摘要:目的:检测L-选择素配体合成的关键酶,N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶(N-acetyl-glucosamine-6-O-sulfotransferase),在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达-方法:采用RT-PCR技术检测16例子宫内膜癌(研究组)和16例正常子宫内膜(对照组)组织中N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶的表达-结果:正常子宫内膜有N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶的表达; 其表达的半定量值,癌组织为0.87 ± 0.08,正常组织为0.45 ± 0.11,癌旁组织为0.49 ± 0.12,癌组织中明显高于正常子宫内膜,两组差异有显著性(P < 0.001);癌组织中明显高于癌旁组织,两组差异有显著性(P < 0.001)-结论:L-选择素配体合成酶—N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶,在子宫内膜癌中的高表达,可能与肿瘤的发生-发展和转移密切相关-

摘要:目的:探讨β-连环蛋白(β-catenin)在肠系膜纤维瘤病和其他胃肠道间叶性肿瘤鉴别诊断中的价值-方法:用免疫组化方法,研究β-catenin-vimentin-SMA-desmin-CD117-CD34-S-100在肠系膜纤维瘤病-胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)-平滑肌瘤-炎性肌纤维母细胞瘤及非特异性纤维组织增生中的表达-结果:5例肠系膜纤维瘤病β-catenin均为核阳性表达,其他肿瘤和瘤样病变(GIST-平滑肌瘤-炎性肌纤维母细胞瘤及非特异性增生的纤维组织)β-catenin均呈阴性表达-所有肿瘤均表达vimentin-CD117-CD34阳性表达主要见于GIST-SMA和desmin强阳性表达主要见于平滑肌瘤-S-100弱阳性表达可见于少数肠系膜纤维瘤病-GIST和平滑肌瘤-结论:β-catenin在肠系膜纤维瘤病中的表达具有较好的特异性和敏感性,β-catenin核阳性表达可望用于肠系膜纤维瘤病的诊断和鉴别诊断-

摘要:目的:观察缺血预处理对于大鼠部分肝移植术后肝再生信号通路的影响-方法:采用雄性Lewis大鼠建立50%体积肝移植,将120只大鼠随机分为对照组(C组)和缺血预处理组(IPC组),IPC组大鼠在体内切肝前接受10 min肝血流阻断及随后15 min的血液复流-分别在术后2-6-24-48 h提取肝组织-观察术后两组生存率,提取血清测定谷丙转氨酶(ALT),ELISA法测肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素(IL-6)水平,免疫组化法测定肝细胞增殖核细胞抗原(PCNA)-Western blot测定肝脏中cyclin D1-CDK4-STAT3-磷酸化STAT3(P-STAT3)水平-结果:术后两组生存率比较无明显差别,术后ALT水平,IPC组在2-6 h低于C组-TNF-α术后6 h IPC组明显高于C组-IPC组的IL-6水平在术后2-6-24-48 h均高于C组-PCNA显示术后IPC组阳性细胞数明显高于C组-cyclin D1蛋白在术后C组表达弱于IPC组-Cdk4蛋白在术后IPC组表达强于C组-STAT3蛋白术后两组表达相似-P-STAT3蛋白术后C组蛋白表达弱于IPC处理组-结论:经过缺血预处理的50%部分体积大鼠肝移植,IL-6-TNF-α诱导的肝再生信号通路增强,提示肝再生能力也增强-

摘要:目的:探讨川芎嗪对哮喘小鼠血清干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的影响,及抑制气道炎症的作用-方法:24只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分成正常对照组(A组)-哮喘模型组(B组)-小剂量川芎嗪组(C组,40 mg/kg)-大剂量川芎嗪组(D组,80 mg/kg),每组6只-用苏木精-伊红染色观察气道病理改变;用ELISA法检测小鼠血清中SCF含量-结果:小鼠血清中SCF含量哮喘组(114.9 ± 27.3)pmol/L明显高于正常对照组(48.6 ± 11.2)pmol/L(P < 0.01);小剂量川芎嗪组(70.6 ± 7.9)pmol/L与大剂量川芎嗪组(51.4 ± 8.1)pmol/L 均明显低于哮喘组(P均 < 0.01);肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)和淋巴细胞总数,管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)哮喘组分别为(32.6 ± 4.5)个/mm2-(1.196 ± 0.111)mm-(0.292 ± 0.027)mm,正常对照组分别为(6.6 ± 1.2)个/mm2-(0.571 ± 0.057)mm-(0.139 ± 0.014)mm,两组比较差异有统计学意义(P均 < 0.01);小剂量川芎嗪组分别为(26.0 ± 2.5)个/mm2-(0.949 ± 0.105)mm-(0.243 ± 0.027)mm,与哮喘组比较差异有统计学意义(P均 < 0.05);大剂量川芎嗪组分别为(12.1 ± 1.6)个/mm2-(0.875 ± 0.111)mm-(0.178 ± 0.023)mm,与哮喘组比较差异有统计学意义(P均 < 0.05)- 结论:川芎嗪可能通过抑制血清SCF表达抑制哮喘小鼠气道炎症-

摘要:目的:探讨间歇性甲状旁腺激素(PTH)应用促成骨的可能机制-方法:大鼠成骨细胞(ROBs)分为两组培养:①对照组,在每个培养周期(24 h)中均不加PTH;②PTH间歇刺激组,仅在前6 h的培养液中加PTH-收集第3周期24 h末的细胞,应用双向凝胶电泳方法比较两组细胞的总蛋白,选择2个在间歇刺激组表达明显上调的蛋白质点进行基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析-结果: 初步确定这2个蛋白分别为β-肌动蛋白(β-actin)和波形蛋白(vimentin),它们均属于细胞骨架蛋白-结论:在PTH间歇刺激组表达上调的β-肌动蛋白和波形蛋白可能参与了间歇性PTH应用的促成骨过程-

摘要:目的:探讨在中国南京地区汉族人群中脂联素单核苷酸多态性SNP+276 G/T 与冠心病的关系-方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP) 方法,分析了266例非糖尿病患者的冠脉造影结果和脂联素单核苷酸多态性( SNP+276 G/T)的关系,研究设立了病例组和正常对照组-结果:相对于T/T基因型,G/G基因型修正后的OR值为3.16,(P < 0.05);G/G+G/T基因型的修正后OR值为2.69,(P < 0.05)- 结论:脂联素 SNP+276 G/T 各种基因型和冠心病的发病密切相关,G/G基因型很可能是冠心病的易感基因型-

摘要:目的:评价经皮球囊二尖瓣成型术(PBMV)治疗老年人二尖瓣狭窄患者的临床意义-探讨老年人二尖瓣狭窄患者的手术适应证-围手术期处理方案-方法:选择≥60岁风心病,二尖瓣狭窄患者56例,采用改良Inoue方法行PBMV -以血液动力学,超声心动图评价术前,术后即刻左房压(LAP)-二尖瓣瓣口面积(MVA)及二尖瓣跨瓣压差(MVG); 左心房直径(LAD)-超声心动图评价术后即刻和术后1年MVA -MVG-LAD-结果:56例患者中54例治疗成功,2例失败-其中1例为术中球囊跨瓣失败,1例术后出现中度二尖瓣返流-术后即刻LAP由扩张前(22.5 ± 6.2)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)降至(13.8 ± 4.6)mmHg(P < 0.01);MVA由(1.05 ± 0.21)cm2增至(1.78 ± 0.22)cm2(P < 0.01);MVG由(18.3 ± 5.2)mmHg降至(10.6 ± 4.2)mmHg(P < 0.01)-术后即刻 LAP-MVG下降,MVA增加-术后1年LAD由(4.71 ± 0.73)cm减小到(4.39 ± 0.48)cm(P < 0.01),MVA,MVG和心功能与术后比较均无明显变化(P > 0.05).随访1年,3例出现再狭窄,1例死于换瓣手术,其余患者心功能和生活质量明显改善-结论:PBMV较为明显的改善二尖瓣狭窄症状,具有微创-低风险的特点-可适用于瓣膜轻度条件差和高危围术期而不适合二尖瓣置换术的老年患者-

摘要:目的:探讨山莨菪碱(654-2)对体外循环肺损伤的保护作用及作用机制-方法: 连续选取24例先心病手术患者,按用药剂量及给药时间不同,随机分成用药Ⅰ组(预充液中加入654-2,2 mg/kg)-Ⅱ组(主肺动脉注入654-2,2 mg/kg)-Ⅲ组(预充液中加入654-2,1 mg/kg;主肺动脉注入654-2,2 mg/kg)与对照组-观测手术过程中5个时间点心房血中炎症细胞数-CD11b水平-TNF-α浓度;术毕肺组织中NF-κB灰度值 ;肺功能的变化-结果:应用山莨菪碱Ⅰ-Ⅱ-Ⅲ组与对照组比较,血中炎症细胞数-CD11b水平-TNF-α;术毕肺组织中NF-κB灰度值均有不同程度降低,且Ⅱ-Ⅲ组较Ⅰ组变化明显,特别是主动脉开放后的D-E点;血气分析结果分析显示,用药Ⅱ组和Ⅲ组的OI 值较其他两组低,而CD 值有明显的升高-结论:山莨菪碱对体外循环肺损伤有一定的保护作用,且从预充液和主肺动脉分别注入的前后嵌合给药途径较好-通过抑制致病因子刺激炎症效应细胞所致的IκB的降解,达到抑制NF-κB活化,是其可能的作用机制-

摘要:目的:研究CT灌注成像对慢性阻塞性肺病(COPD)的诊断价值-方法:通过20例志愿者和20例COPD患者的多排螺旋CT灌注成像,采用8排螺旋CT灌注成像,扫描方式为cine(电影扫描),层厚5 mm/1i,扫描时间为0.5 s/层,延时5 s,总扫描时间为45 s,欧乃派克(300 mg/ml)60 ml用高压注射器以4 ml/s的流速率通过肘前静脉注入-CT perfusion3软件分析测量兴趣域血流量-血容量-平均通过时间及表面通透性和时间-密度曲线-结果:COPD患者的时间-密度曲线较志愿者曲线平坦,峰值明显降低-COPD患者血流量-血容量及表面通透性明显低于志愿者,具有统计学意义(P < 0.05)-结论:多排螺旋CT肺灌注扫描对COPD的诊断有一定的辅助作用-

摘要:探讨经肛门巨结肠根治术与传统剖腹手术对先天性巨结肠患儿手术创伤程度的差别-方法:30例患儿随机分为经肛门组及剖腹手术组各15例-每例患儿于术前24 h-术后24 h-72 h清晨空腹抽取静脉血,用ELISA法测量血清中IL-6的浓度,应用速率散射比浊法测量C反应蛋白的浓度,并对检测结果进行统计学处理-结果:两组患儿术后白细胞介素-6(IL-6)及C反应蛋白均较术前有明显变化(P < 0.05)-经肛门组IL-6-C反应蛋白浓度在术后24 h及72 h均较剖腹组要低(P < 0.05)-结论:经肛门巨结肠根治术较传统剖腹手术对先天性巨结肠患儿所造成的手术创伤程度要小-

摘要:目的:分析动脉内溶栓治疗椎基底动脉(VBA)急性脑梗死的临床疗效-方法:93例VBA闭塞脑梗死患者,对43例VBA急性脑梗死患者应用尿激酶进行局部动脉内溶栓治疗, 对照组50例行临床常规治疗者,比较两组疗效并分析溶栓治疗组6 h内外阻塞血管再通率和3个月后格拉斯哥预后评分(GOS)之间的关系-结果:溶栓治疗组与对照组之间有显著性差异(-字2=8.76,P < 0.01),溶栓治疗组治疗时间6 h以内和6 h以外的预后比较无显著性差异(P > 0.05),溶栓后阻塞血管再通23例(53.49%);溶栓时间6 h以内6例(13.95%),其中阻塞血管再通4例(9.30%)预后均好,6 h以上37例(86.05%),阻塞血管再通19例(51.35%),预后好的有16例(43.24%);颅内出血1例(2.32%),再灌注损伤19例(44.18%);再栓塞1例(2.32%),死亡12例(27.91%),分析后认为VBA再通率较低,6 h以内和6 h以外的预后有显著性差异,血管再通和预后明显相关(P < 0.01,相关系数r = 0.99)-结论:VBA急性脑梗死动脉内溶栓疗效确切,阻塞血管再通和预后明显相关,阻塞血管成功再通预后较好,不成功再通预后较差,死亡率高-

摘要:目的:评价健择联合顺铂一线治疗晚期非小细胞肺癌(nonsmall-lung cancer,NSCLC)的近期疗效及毒副反应-方法:对40例经病理确诊-不能手术的NSCLC初治患者采用健择联合顺铂化疗,具体为第1-8天健择1 250 mg/m2,静滴30 min;第1-2-3天顺铂25 mg/m2,静滴,21天为1周期,至少完成2个周期后评价疗效,并观察不良反应-结果:总有效率(CR+PR)45.0%,中位疾病进展时间(MTTP)和中位生存期(MST)分别为7.1和10.8个月,主要的不良反应是骨髓抑制和恶心呕吐反应-结论:健择联合顺铂治疗晚期NSCLC疗效较好,毒性作用可以耐受,其剂量限制性毒性主要是骨髓抑制-

摘要:目的:总结维持性血液透析(MHD)患者腕瘘失功能后在邻瘘口处行瘘成形术的临床资料,为节约外周静脉提供一可行方法-方法:23例腕瘘失功能患者(A组),在邻瘘口处利用已扩张的头静脉与桡动脉再次行内瘘成形术;同期腕部桡动脉-头静脉瘘首次成形手术患者75例作为对照组(B组),比较其手术成功率-动脉及静脉内径-吻合口长度-结果:A组失功能部位82.61%在瘘口处,13.04%为头静脉血栓,其动-静脉内径明显比B组大[分别为(3.46 ± 0.21)mm对(2.62 ± 0.19)mm,(3.51 ± 0.35)mm对(2.43 ± 0.23)mm,P < 0.001];A组吻合口大小(4.14 ± 0.49)mm-B组为(7.35 ± 1.63)mm,A组吻合口明显比B组小(P < 0.001)-A组手术均成功,B组手术成功率90.67%,但与A组相比差异无显著性(P > 0.05)-A组术后1~2周内使用瘘,透析血流量>300 ml/min,B组术后(5.19 ± 1.19)周使用瘘-结论:腕瘘失功能的部位主要在瘘口;利用已扩张的头静脉行瘘成形术的成功率高-瘘成熟期短-血流充足,可节约MHD有限的外周静脉-

摘要:目的:探讨MRI在颈椎损伤中的诊断价值-方法:收集42例急性颈椎损伤患者MRI资料,分析脊髓有信号改变与无信号改变者图像,并分别对两组中合并椎间盘突出-骨折-椎前血肿-韧带损伤等情况统计分析,并行统计学检验-结果:本组42例中,脊髓有信号改变者27例(A组),无信号改变者15例(B组)-A组伴椎间盘突出者13例,且均为脊髓信号改变水平对应椎间盘突出,11例伴相应水平椎体骨折,3例发生于上颈椎骨折,8例于下颈椎;B组中2例伴椎间盘突出,7例上颈椎发生骨折-椎间盘突出发生率两组间有统计学差异,两组上-下颈椎骨折发生率亦有统计学差异-结论:对于颈部外伤怀疑颈髓损伤或需要手术患者,建议均行MRI检查-

摘要:目的:应用“密度均值测试法”在计算机 X线摄影(computer radiography,CR)-直接数字摄影(DR,director dadiography)等成像胶片的质量评判-方法:据欧共体工作文件以及沈阳会议1999年质量标准试行文件的胶片密度测试点-CR-DR和感绿胸片以及两种C形臂射线机摄片验证,用密度仪测试胸片8~12点的密度均值-结果:三种成像方式测定对比,DR好于CR及感绿片,易获得接近1.2的密度值,质量较好-两种设备作为影像密度对比应用,没有差别-结论:应用“均值法”对各张胶片密度不存在胶片分辨率和灰阶影响为密度量化提供一种新测定判定方式-

摘要:

摘要:目的:建立适用于体外培养大鼠成骨细胞分泌组的双向电泳样品制备方法,为进一步开展成骨细胞分泌组研究奠定基础-方法:分别采用透析法-透析-三氯乙酸(trichloractetic acid,TCA)-丙酮沉淀法和透析-丙酮沉淀法富集无血清培养液中的细胞分泌蛋白质,通过比较双向电泳的结果优选最佳的样品制备方法-结果:透析-丙酮沉淀法较为理想,蛋白丢失少-溶解性佳,所得双向电泳图谱清晰,分辨率高-结论: 透析-丙酮沉淀法更适用于制备体外培养的大鼠成骨细胞分泌组的双向电泳样品,可以满足进一步研究的需要-

摘要:目的:了解南京地区社区人群代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的患病率及流行特征-方法:采用分层随机整群抽样方法调查南京两社区20岁及20岁以上的常住(>5年)居民共1 130人(男400人,女730人),进行问卷调查-体格检查及相关代谢指标的测定-MS主要采用2005年国际糖尿病联盟(IDF)的诊断标准-结果:南京地区成人总人群-男性及女性MS的粗患病率分别为19.3%-12.8%和22.9%-相应的标化患病率分别为13.1%-9.2%和15.2%-女性患病率显著高于男性(P < 0.05)并随年龄的增长而显著升高(P < 0.05);血压升高(≥130/85 mmHg)-甘油三酯(TG)升高-空腹血糖升高-高密度脂蛋白(HDL)降低在MS患者中的发生率分别为89.9%-65.6%-29.4%及71.1%-MS患者中仅有2个代谢异常的占51.8%,有3个组分异常的占40.4%,而4个组分均异常的占7.8%;结论:南京地区成年人群MS患病率较高,女性-老年人是MS的高危人群,加强健康宣教十分重要-MS患者中高血压最常见,其他代谢异常的患病率也较高,应全面地进行防治-