摘要:目的:探讨亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)后,诱生的血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)与转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对其促进细胞外基质(extracellular matrix,ECM),如纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和 Ⅳ 型胶原蛋白(collagen Ⅳ)合成的影响-方法:体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理并给予sublytic C5b-9刺激,然后分别检查受刺激的GMC合成TSP-1和TGF-β1因子水平,同时检测GMC分泌FN和collagen Ⅳ的水平-此外,应用人工合成的TSP-1封闭肽段(GGWSHW)和TGF-β1中和抗体处理培养的大鼠GMC,研究TSP-1和TGF-β1在sublytic C5b-9诱导的GMC分泌上述ECM中的作用及其相互关系-结果:培养的大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18 h,其FN和collagen Ⅳ表达水平均明显升高-同时,TSP-1蛋白表达和TGF-β1分泌(包括活化的TGF-β1含量)也显著增多-用TSP-1封闭肽段(GGWSHW)处理大鼠GMC后亦能显著抑制由sublytic C5b-9诱导的TGF-β1活化,并减少FN-collagen Ⅳ的产生-同样用TGF-β1中和抗体处理GMC后也能明显抑制由sublytic C5b-9导致的FN-collagen Ⅳ的分泌-结论:体外用sublytic C5b-9刺激大鼠GMC,能诱导其ECM分泌与TSP-1和TGF-β1的合成及活化,而sublytic C5b-9促进GMC分泌ECM的机制可能与其诱导TSP-1合成及活化的TGF-β1存在一定的关系-

摘要:目的:探讨脱氧鬼臼毒素(DOP)对外周神经系统的毒性作用机制-方法:采用全细胞膜片钳技术研究DOP对急性分离大鼠背根(DRG)神经元电压依赖性钾通道的作用,从离子通道水平探讨其神经毒性作用机制-结果:10-20-40-80 μmol/L的DOP对全钾电流(IK)和延迟整流钾电流(IKDR)均有影响,且能以浓度依赖方式-部分可逆地阻断电压依赖性钾电流,使电流电压曲线向去极化方向移动-同时,DOP对IKDR的抑制率[(43.22 ± 6.85)%]明显高于IK[(27.55 ± 4.65)%]-结论:DOP对钾离子电流的影响可能是鬼臼毒素类化合物引起外周神经病变的机制之一-

摘要:目的:构建原核表达GST-GSK3β1-GST-GSK3β2及其显性负突变体(dominant-negative mutant)GST-GSK3β1 K85M的重组质粒,并进行融合蛋白的表达-纯化及鉴定-方法:利用PCR扩增和基因重组技术,以含有人源目的片段的质粒Flag-GSK3β1-YFP-GSK3β2及Flag-GSK3β1 K85M为模板,扩增出相应的目的基因片段,并将其插入具有GST标签的原核表达载体pGEX-6P-1中,构建GST融合蛋白表达质粒-通过对GST-GSK3β1-GST-GSK3β2和GST-GSK3β1 K85M融合蛋白进行诱导表达-温和法裂解以及纯化实验,确立有效的表达和纯化方法-最后应用Western blot方法鉴定纯化的融合蛋白-结果:成功构建GST-GSK3β及其显性负突变体质粒,并通过诱导表达和纯化得到目的蛋白-结论:GST-GSK3β1-GST-GSK3β2及GST-GSK3β1 K85M显性负突变体质粒的成功构建及目的蛋白的表达与纯化,为更深入地研究GSK3β蛋白的生物学功能奠定基础-

摘要:目的:研究趋化因子RANTES对肥大细胞膜表面与细胞质内蛋白酶激活受体(protease-activated receptors,PARs)各亚型表达的影响-方法:肥大细胞瘤细胞P815以不同浓度RANTES(0.1-1.0-10.0-100.0 ng/ml)激发,于不同时间点(2-6及16 h)收集细胞,予透膜及非透膜处理,流式细胞术检测全细胞与细胞膜PARs的表达水平,分析细胞膜与胞质中PARs的表达变化-结果:RANTES作用6 h可显著下调细胞膜表面PAR1,2 h及16 h有下调趋势但差异无统计学意义,该下调效应可被抗RANTES单克隆抗体(anti-RANTES)取消;透膜处理后分析结果显示,RANTES对细胞质内PAR1表达无显著调节作用,细胞膜与细胞质中PAR1表达差异无统计学意义-RANTES对P815细胞PAR2-PAR3-PAR4表达均无显著调节作用-结论:RANTES可选择性调节肥大细胞膜表面PAR1表达水平,对细胞质内PAR1及其他PARs亚型(PAR2-PAR3-PAR4)胞膜与胞质水平均无显著影响-

摘要:目的:探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在小鼠单侧输尿管梗阻所致肾间质纤维化进展中的作用机制-方法:采用结扎雄性CD-1小鼠单侧输尿管(UUO)的方法建立肾间质纤维化动物模型,设假手术为对照组(Sham组)-术后3-7-14 d处死小鼠-用常规病理染色法观察两组小鼠肾组织形态和肾间质纤维化程度;以免疫蛋白印迹及免疫组织化学染色法检测两组小鼠肾组织中Smurf2-E-钙黏蛋白(E-cadherin)--琢-平滑肌肌动蛋白(-琢-SMA)和纤维连接素(FN)的表达和分布-结果:与Sham组相比,UUO术后7 d小鼠出现部分肾小管扩张-萎缩和肾间质纤维化-同时,UUO术后肾组织中Smurf2--琢-SMA和FN表达呈时间依赖性升高,E-cadherin表达则明显下降-并且,Smurf2蛋白主要分布于肾小管上皮细胞核内;-琢-SMA分布于肾小管上皮细胞和肾间质中;FN则分布于肾间质中-相关回归分析表明:UUO术后小鼠肾组织内Smurf2表达与-琢-SMA(r = 0.765,P <0.001)和FN蛋白水平呈正相关(r = 0.773,P < 0.001);与E-cadherin表达呈负相关(r = -0.656,P < 0.001)-结论:梗阻性肾病小鼠肾组织中Smurf2可能通过诱导肾小管EMT形成促进肾间质纤维化的进展-

摘要:目的:了解新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后磷酸化真核翻译起始因子2α[eIF2α(p)]-激活转录因子4(ATF4)表达的变化-方法:7日龄新生SD大鼠80只,随机分为2组:假手术组和HIBD组,每组各40只-HIBD组采用Rice方法建立新生大鼠HIBD模型,分别于缺氧缺血(HI)后6-12-24和72 h取其脑组织切片,采用免疫组织化学方法检测病变侧大脑皮质eIF2α(p)-ATF4蛋白的表达-假手术组不行缺氧缺血处理,采用同样方法检测其eIF2α(p)-ATF4蛋白的表达-结果:假手术组eIF2α(p)-ATF4蛋白少量表达,各时间点无明显变化(P > 0.05);HIBD组6 h可以观察到较多eIF2α(p)-ATF4蛋白,12 h达到高峰,72 h明显减少,但仍高于假手术组-HIBD组与假手术组比较,差异有统计学意义(P < 0.01)-HIBD组各时间点比较,差异有统计学意义(P < 0.01)-结论:eIF2α(p)-ATF4参与了新生大鼠HIBD病理生理过程-HIBD可能诱发了内质网应激反应,启动了PKR样内质网激酶(PERK)介导的未折叠蛋白应答(UPR)通路-

摘要:目的:构建pRetro-On/LTβR载体,获得可表达淋巴毒素β受体((lymphotoxin beta receptor,LTβR)的Jurkat细胞,探讨LTβR在T细胞凋亡中的作用-方法:应用PCR技术扩增LTβR cDNA片段,将PCR产物纯化后定向连接入pRetro-On载体;重组质粒转入大肠杆菌,LB-Amp培养基筛选阳性克隆,经质粒抽提-纯化-NotⅠ和BamHⅠ双酶切-测序,验证pRetro-On/LTβR载体的正确构建;通过脂质体转染T细胞传代系Jurkat细胞;强力霉素(doxycycline,DOX)诱导后,Western blot鉴定转染细胞中LTβR蛋白的表达,流式细胞术检测细胞表面LTβR表达;以配体LIGHT刺激表达LTβR的Jurkat细胞后以annexin-V-PI双染色流式细胞法检测细胞的凋亡-结果:双酶切及测序结果证实LTβR cDNA正确插入pRetro-On质粒;Western blot和流式细胞术结果证实了LTβR在Jurkat细胞内经DOX诱导得到了表达;表达LTβR的Jurkat细胞经LIGHT刺激后凋亡增加-结论:成功构建pRetro-On/LTβR质粒,pRetro-On/LTβR在Jurkat细胞中可以表达;表达LTβR的Jurkat细胞可以通过LIGHT-LTβR途径导致细胞凋亡-

摘要:目的:扩增高致病性禽流感H5N1亚型病毒血凝素(hemagglutinin,HA)基因,并进行真核表达-方法:抽提毒株A/Jiangsu/08-6基因组RNA,反转录为cDNA,用特异性引物扩增HA基因-HA经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切后克隆到pFastBac-GP67B载体上,筛选出阳性重组转座质粒pFastBac-GP67B-HA,并将其进一步转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选和PCR鉴定后,获得重组穿梭载体(rBacmid-HA),再通过Cellfectin Ⅱ试剂转染rBacmid-HA至对数生长期的sf9昆虫细胞,进行目的蛋白的真核表达-分别用SDS-PAGE-Western blot-血凝试验以及质谱分析对其进行鉴定-结果:HA基因在sf9细胞表达的蛋白分子量约70 000-血凝试验表明重组HA蛋白可使鸡红细胞发生凝集-质谱分析鉴定该重组蛋白为HA 蛋白-结论:重组HA 蛋白具有天然HA蛋白的活性,为亚单位疫苗的研制及中和抗体的筛选奠定了基础-

摘要:目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础-方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf6-T27N基因,插入pEGFP-N1载体中构建成pEGFP-N1/Arf6-T27N,利用脂质体将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞-用新霉素筛选稳定表达的细胞系,Western blot确定重组蛋白表达,并用Boyden chamber小室实验检测转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移能力的改变-结果:限制性内切酶鉴定和核酸定列测定证实成功构建了含Arf6-T27N的重组真核表达载体pEGFP-N1/Arf6-T27N-以重组质粒稳定转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,能检测到Arf6-T27N蛋白的表达,且Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移-结论:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Arf6-T27N,稳定转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞可检测到其蛋白水平的稳定表达,重组质粒介导的Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移-

摘要:目的:探讨不同放射性比活度32P对32P-磷酸铬-聚L-乳酸[32P-chromic phosphate-poly(L-lactide),32P-CP-PLLA]缓释粒子体内外溶蚀降解-放射性释出特性的影响-方法:将放射性比活度呈倍比增加的32P-CP-PLLA缓释粒子(记为S1-5)分别置于胎牛血清-生理盐水和右旋糖酐中(分别记为X-Y-Z组),另取S1-5型32P-CP-PLLA粒子分别植入肝癌HepG2实体瘤内,分别测定不同时间点粒子溶蚀降解失重率-放射性释出率及电镜下超微结构变化-结果:在胎牛血清(无菌环境下)-生理盐水及右旋糖酐中,相同时间点S1-5粒子放射性释出率增加,以32 d及其以后尤为显著,且相同时间点粒子放射性释出率增加呈一定的倍数关系;粒子肝癌内植入后,粒子降解失重率和放射性释出率随粒子放射性活度增加呈一致性增加,随时间变化的趋势同体外实验;胎牛血清(一般环境)中,粒子放射性释出较体内外其它组均快,差异以64 d显著,电镜下可见粒子内菌体存在-结论:32P作为一种纯β射线发射体,可能是32P-CP-PLLA粒子体内外降解和放射性释出的主要调节因素,而细菌或相关产物可能也是影响其降解的因素之一-

摘要:目的:研究缺氧对肺泡巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)释放的作用及其信号通路-方法:采用大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,观察不同时间缺氧培养对细胞HMGB1 mRNA表达和培养上清液中HMGB1含量的影响,及不同浓度JAK2抑制剂tyrphostin AG 490和STAT1抑制剂氟达拉滨对HMGB1释放的抑制作用-HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测-结果:培养上清液中HMGB1含量和mRNA表达水平分别于缺氧培养6-12 h后明显升高(P < 0.01),并随缺氧培养时间延长而进一步升高和增强;tyrphostin AG 490和氟达拉滨对缺氧培养肺泡巨噬细胞释放HMGB1有不完全的抑制作用,并呈剂量依赖性-结论:缺氧诱导肺泡巨噬细胞释放HMGB1,JAK/STAT信号通路可能参与其释放过程-

摘要:目的:检测各种脂肪细胞因子在大鼠急性胰腺炎中的表达及其可能意义-方法:40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组-假手术组-急性水肿型胰腺炎(AEP)组和急性坏死型胰腺炎(ANP)组,AEP组腹腔注射雨蛙素,ANP组腹腔注射精氨酸,正常对照组不予以任何处理,假手术组给予同等剂量的生理盐水腹腔注射,应用ELISA法测定大鼠血清中抵抗素-瘦素-脂联素-肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β水平的变化,同时检测血清中淀粉酶(AMY),计算胰腺/体重比值,观察胰腺组织病理变化-结果:AEP组和ANP组血清淀粉酶-胰腺/体重比值-胰腺组织病理评分-血清抵抗素-瘦素-TNF-α-IL-1β水平均较对照组和假手术组明显升高,两者之间差异显著(P < 0.01);ANP组较AEP组也升高,两者之间有统计学意义(P < 0.01或P < 0.05);而AEP组中脂联素水平为(3.26 ± 0.68) mg/L,ANP组中为(2.27 ± 0.45) mg/L,与正常对照组和假手术组比较明显降低,且ANP组较AEP组也降低,统计学上差异显著(P < 0.01或P < 0.05);血清抵抗素水平与TNF-α-IL-1β水平-胰腺组织病理评分呈正相关,相关系数r为0.711-0.794和0.812(P < 0.01);血清瘦素水平与TNF-α-IL-1β水平-胰腺组织病理评分呈正相关,相关系数r为0.736-0.812和0.785(P < 0.01或P < 0.05),而血清脂联素与TNF-α-IL-1β水平-胰腺组织病理评分呈负相关,相关系数r为-0.796--0.809--0.788(P < 0.01或P < 0.05)-结论:脂肪细胞因子与急性胰腺炎发病发展有关,有可能成为预测急性胰腺炎严重性和预后的有用指标之一,其中抵抗素-瘦素的增加可能加重急性胰腺炎病情的进展,而脂联素增加可能起到保护作用,为急性胰腺炎的治疗提供了新的靶点-

摘要:目的:研究蟾蜍灵对阿霉素肾病大鼠蛋白尿的影响及相关机制-方法:40只SD大鼠随机分成3组:正常组-模型组和蟾蜍灵组,除正常组外大鼠尾静脉一次性注射阿霉素7.5 mg/kg,1周后,蟾蜍灵组每天腹腔注射蟾蜍灵0.1 mg/kg,持续3周,每周检测24 h尿蛋白定量,治疗3周后处死所有大鼠,全自动生化检测仪检测血清白蛋白-甘油三酯等相关指标,比色法检测血清氧化应激水平,光镜和电镜观察肾小球病理改变,Western blot检测肾皮质中整合素连接激酶(ILK)蛋白的表达-结果:蟾蜍灵能够降低阿霉素肾病大鼠24 h尿蛋白和血脂水平,减轻足细胞病变,抑制过氧化反应,降低肾皮质中ILK的高表达-结论:蟾蜍灵通过保护足细胞,减轻阿霉素肾病大鼠蛋白尿水平,而其抵抗足细胞损伤的机制可能与其降低氧化应激水平-下调ILK蛋白的表达量相关-

摘要:目的:研究特异性小分子干扰RNA(siRNA)沉默骨肉瘤MG-63细胞Livin基因对细胞凋亡的影响-方法:设计针对人源Livin基因的siRNA,转染至对数生长期的人骨肉瘤MG-63细胞株;RT-PCR检测转染后骨肉瘤MG-63细胞Livin基因表达的变化,Western blot检测转染后骨肉瘤MG-63细胞Livin蛋白表达的变化,PI染色后流式细胞仪检测转染后细胞凋亡的变化-结果:Livin特异性siRNA转染骨肉瘤MG-63细胞后,Livin基因表达较空白对照和阴性对照显著减少(0.195 ± 0.019 vs 0.539 ± 0.031-0.438 ± 0.029)-Western blot检测结果显示Livin蛋白质水平较空白对照和阴性对照显著减少(0.165 ± 0.022 vs 0.632 ± 0.034-0.625 ± 0.035)-流式细胞仪检测见siRNA组骨肉瘤MG-63细胞凋亡率较对照组明显增加-结论:RNA干扰能有效沉默骨肉瘤MG-63细胞Livin基因表达,促进骨肉瘤MG-63细胞凋亡-

摘要:目的:分析尿酸水平与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)相关因素的关联性,进一步探讨尿酸在代谢综合征中的作用-方法:调查南京医科大学第一附属医院12 249例体检群体,通过病史询问,身高体重-血压测定及血糖-血脂-血尿酸等生化指标检测,应用多因素Logistic回归模型分析尿酸水平与代谢综合征两者之间的关系,同时调整年龄-性别-总胆固醇-低密度脂蛋白胆固醇对MS的影响,并评估尿酸水平与糖脂代谢其他因素的关联性-结果:①代谢综合征组较非代谢综合征组在年龄-血压-体质指数(BMI)-血脂-血糖-尿酸等代谢相关指标方面明显升高(P < 0.01);②尿酸浓度有随BMI增加而增加的线性趋势 (P < 0.01),不同性别线性变化斜率不同(P < 0.01),女性大于男性;③男性人群的尿酸平均水平高于女性,尿酸平均水平均有随代谢综合征组份数增加而增加的线性趋势 (P < 0.01),不同性别线性变化斜率不同(P < 0.01),女性大于男性;④不同血糖状态下男性人群的尿酸水平均高于女性(P < 0.01);⑤脂代谢异常组较正常组具有更高的尿酸水平,差异具有统计学意义(P < 0.01);⑥不同年龄组 Pearson相关分析显示:男性尿酸与年龄的相关系数r = -0.07,P < 0.01,女性r = 0.24,P < 0.01,总体尿酸水平高低与年龄无关-当尿酸作为连续变量时,尿酸水平每增加1个单位,代谢综合征的风险增加0.001倍(OR=1.001,95%CI:1.000~1.003),有统计学意义(P = 0.025);当尿酸按照男性420 μmol/L,女性357 μmol/L分成二分类时发现,高尿酸患者发生代谢综合征的风险是非高尿酸患者的1.197倍(95%CI:0.765~1.872),但无统计学意义(P = 0.432);若将尿酸四等份分类,则各类与第一类相比,OR值及其95%CI分别为0.976 (0.723~1.319)-0.940 (0.697~1.268)和1.131 (0.854~1.499),各类与第一类比较均没有统计学意义(P值分别为0.876-0.685-0.391)-结论:年龄-血压-体质指数-血脂-血糖-尿酸是代谢综合征的危险因子;代谢综合征患者具有高尿酸水平;调整年龄-性别-胆固醇-低密度脂蛋白胆固醇对MS的影响后,未发现尿酸与代谢综合征有关-

摘要:目的:探讨2型糖尿病视网膜病变发生的独立危险因素-方法:选取南京医科大学第一附属医院内分泌科2009年1月~2010年12月 82例糖尿病视网膜病变患者和86例不伴有视网膜病变的2型糖尿病患者进行病例-对照研究-比较两组临床参数及生化指标,对于有意义的指标进一步行Logistic回归分析,寻找糖尿病视网膜病变的独立预后指标-结果:单变量分析结果显示,两组间糖尿病病程-糖化血红蛋白-舒张压及视黄醇结合蛋白4(retinol-binding protein 4,RBP4)有统计学差异-Logistic回归分析显示:糖尿病病程(OR=2.41;95% CI:1.12~5.18)-脂蛋白(a) (OR=2.22;95% CI:1.15~4.31) 和RBP4 (OR=2.95;95% CI:1.54~5.65)是糖尿病视网膜病变发生的独立预测指标-结论:脂蛋白(a) 和RBP4是糖尿病视网膜病变发生的危险因素,且为独立的预测因子-

摘要:目的:探讨血清视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)水平与2型糖尿病(T2DM)大血管病变的关系-方法:选取T2DM患者189例,按照有无大血管病变分为大血管病变组85例-单纯糖尿病组104例-100例非糖尿病者为正常对照组-分别检测血清RBP4浓度-体质指数(BMI)-血压-血脂和糖化血红蛋白(HbA1c)等-根据RBP4浓度由低到高按三分位法将189例T2DM患者分为3组,比较其动脉粥样硬化的发生情况;用Spearman相关分析分别分析糖尿病动脉粥样硬化与其他指标的相关性;用Pearson相关分析RBP4与其他指标的相关性,用多元逐步Logistic回归分析影响T2DM患者动脉粥样硬化最显著的因素-结果:T2DM患者(AS组和非AS组)的血浆RBP4水平高于正常对照组(P < 0.05);RBP4上三分位组收缩压(SBP)-空腹胰岛素(FINS)-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均高于其余2组,差异有统计学意义(P均 < 0.05);RBP4下-中-上三分位组患者大动脉粥样硬化的患病率也逐渐升高,分别为14.5%-21.4%和48.2%,RBP4上三分位组患者大动脉粥样硬化的患病率显著高于其余2组患者,差异有统计学意义(P均 < 0.05);Spearman相关分析显示,T2DM患者的大血管动脉硬化与年龄-病程-RBP4-HbA1c-总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈正相关;Pearson相关分析显示T2DM患者RBP4浓度与BMI-SBP-血糖-FINS-HOMA-IR呈正相关-多元逐步Logistic回归分析显示T2DM患者动脉粥样硬化的发生与血浆RBP4-年龄-病程-LDL-C相关-结论:2型糖尿病患者动脉粥样硬化与血浆RBP4呈正相关关系,高血浆RBP4可能是T2DM动脉粥样硬化发生的独立危险因子之一-

摘要:目的:探讨代谢异常病史与遗忘型轻度认知功能障碍(aMCI)的关系-方法:136名患者被分为遗忘型轻度认知功能障碍(aMCI)组(n = 93)与对照组(n = 43)-对两组患者进行代谢病史的回顾性分析,同时以干化学法检测空腹血糖(FBG)-糖化血红蛋白(HbA1c),以酶联免疫吸附法检测白介素-6(IL-6)-结果:糖尿病史-高血压史及男性吸烟史在两组之间具有统计学差异(P < 0.05);高脂血症史-总体吸烟史在两组之间无统计学差异(P > 0.05);FBG及HbA1c水平在两组之间无显著性差异;aMCI组IL-6的水平[(78.57 ± 2.37)pg/ml]显著高于对照组[(72.48 ± 4.74)pg/ml,P < 0.05]-结论:高血压-糖尿病-男性吸烟史等危险因素可能通过IL-6相关的炎症状态参与aMCI的发生与发展-

摘要:目的:探讨吸入不同浓度七氟烷对老年患者术后认知功能的影响及血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)与术后认知功能障碍(post-operative cognitive dysfunction,POCD)的相关性-方法:选择择期行胃切除术的美国麻醉师协会(ASA)评分Ⅰ~Ⅱ级老年患者60例,随机分为吸入七氟烷低浓度组(A组)和吸入七氟烷高浓度组(B组),每组30例-全麻诱导后分别予1.5%七氟烷(A组)和3.0%七氟烷(B组)吸入麻醉维持-于麻醉前-术后6-24-72 h采用简易智力状态检查表(MMSE)评价认知功能,并测定术前-术中2 h及术后24-72 h的血清Hcy-结果:术前MMSE评分比较无统计学意义(P > 0.05)-与术前基础值比较,A-B两组患者术后6 h MMSE评分均有明显下降(P < 0.05),且B组术后6 h MMSE评分较A组低(P < 0.05)-两组患者术前血清Hcy比较无差异-与术前基础值比较,A组术中2 h-术后24-72 h血清Hcy测定值虽有升高但无统计学意义(P > 0.05),B组术中2 h血清Hcy测定值较术前基础值有明显升高(P < 0.05),但B组术后24-72 h血清Hcy测定值基本回落到术前基础值水平(P > 0.05)-结论:吸入高浓度七氟烷较吸入低浓度七氟烷更易引起术后认知功能障碍-血清Hcy浓度与七氟烷的吸入浓度存在相关性-

摘要:目的:探讨miRNA-26a在支气管哮喘患儿及支气管哮喘小鼠模型中的表达-方法:应用real-time PCR法检测支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞中miRNA-26a与正常儿童的表达差异-采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导支气管哮喘小鼠模型,通过检测肺泡灌洗液(BALF)中细胞数及组织病理验证模型建立-应用real-time PCR法检测支气管哮喘小鼠模型肺组织miRNA-26a与对照组的表达差异-采用Western blot 法检测小鼠肺组织GSK-3β的表达差异-结果:支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞miRNA-26a显著高于正常对照组-OVA诱导的支气管哮喘小鼠模型组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数显著高于正常对照组-组织病理显示支气管哮喘模型组炎症细胞浸润明显高于正常对照组-支气管哮喘小鼠模型组肺组织miRNA-26a显著高于正常对照,GSK-3β蛋白水平明显低于正常对照组-结论:miRNA-26a在支气管哮喘患儿及支气管哮喘小鼠模型中高表达-

摘要:目的:RT-QPCR法探测早期非小细胞肺癌(NSCLC)外周血中CK-19 mRNA的意义-方法:以RT-PCR法从113例NSCLC患者(肺癌组)-50例肺良性病变和50例健康者(对照组)标本中筛选出有CK-19 mRNA表达的标本;再以RT-QPCR法检测表达CK-19 mRNA的标本,通过测定受试者标准曲线下面积(AUC)分析本实验的准确性-结果:①肺癌组和对照组中CK-19 mRNA阳性表达率分别为38.94%(44/113)-1.00%(1/100),差异有统计学意义(P < 0.01),且肺癌组中CK-19 mRNA的阳性表达与肿瘤分期和分化程度有关;②本实验效果的临界值为0.236,灵敏度为95.45%,准确度为77.27%;AUC为0.896-结论:RT-QPCR法检测外周血中的CK-19 mRNA可作为早期NSCLC患者发生微转移时的一个参考指标,但尚需大样本长期追踪观察证实-

摘要:目的:研究可溶性髓细胞表达触发受体-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1,sTREM-1)在慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)患者治疗时指导抗菌药物使用的临床意义-方法:选取2007年8月~2009年2月246例AECOPD患者,随机分配为常规治疗组(123例)和sTREM-1指导组(123例),入院后分别在d1用双抗体夹心ELISA法检测血清sTREM-1水平-在相同常规治疗基础上,常规治疗组患者由经治医师按照抗菌药物使用指南决定抗菌药物治疗方案,sTREM-1指导组患者按照血清sTREM-1水平决定是否使用抗菌药物,在血清sTREM-1≥20 ng/ml时,进行抗菌药物治疗,sTREM-1<20 ng/mL且C反应蛋白(CRP)<5 mg/L时,不予抗菌药物治疗-观察两组患者的住院时间-临床有效率-住院费用-抗菌药物费用-住院病死率-1年随访期间AECOPD发生率及住院率-结果:两组患者在临床有效率-住院病死率-住院时间-1年随访期间AECOPD发生率及住院率方面差异无统计学意义(P分别为 0.621-0.734-0.571-0.793和0.883),sTREM-1指导治疗组的抗菌药物费用及住院费用均低于常规治疗组(P分别为0.000和0.026)-结论:AECOPD患者入院之初进行sTREM-1水平检测可以作为指导抗菌药物使用的参考指标,有利于降低抗菌药物使用费用和总住院费用-

摘要:目的:观察OLF[O:草酸铂(L-OHP);L:醛氢叶酸(LV);F:氟尿嘧啶(5-Fu)]方案联合羟基喜树碱(HCPT)腹腔灌注热化疗治疗晚期胆系肿瘤的近期疗效-方法:24例晚期胆系肿瘤患者采用OLF方案静脉化疗:L-OHP 85 mg/m2,CF 130 mg/m2静脉滴注2 h,第1-8天给药;5-Fu 200 mg/m2快速静脉滴注30 min,后给予5-Fu 1 000 mg/m2静脉泵入22 h,第1-8天给药-静脉化疗间歇期配合HCPT 15 mg腹腔灌注化疗,静脉化疗和腹腔化疗时均辅以热疗-28 d为1个周期,按RECIST评价疗效,同时综合评估临床受益反应指标:疼痛-体力状况及体重变化-结果:24例患者均化疗2个周期以上,其中完全缓解0例,部分缓解7例(29.2%),稳定8例(33.3%)-16例 (66.7%)患者临床获益,生活质量提高-不良反应主要为骨髓抑制和消化道反应-结论:OLF方案联合HCPT腹腔灌注热化疗治疗晚期胆系肿瘤具有较好的近期疗效,不良反应能耐受,值得进一步研究-

摘要:目的:检测胃癌肝转移患者治疗前后的血浆可溶性血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平,并探讨其临床意义-方法:采用定量酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测43例胃癌肝转移患者治疗前后和20例浅表性胃炎患者(对照组)的血浆可溶性VEGF水平-结果:胃癌肝转移患者血浆可溶性VEGF水平显著高于对照组-经治疗后病情好转的胃癌肝转移患者[疗效评价为完全缓解(CR)或部分缓解(PR)],其血浆可溶性VEGF水平较治疗前明显下降,两者之间的差异有统计学意义(P < 0.05)-治疗后病情进展的胃癌肝转移患者[疗效评价为疾病进展(PD)],其血浆可溶性VEGF水平较治疗前明显升高,两者之间的差异有统计学意义(P < 0.05)-在经治疗后病情稳定的胃癌肝转移患者[疗效评价为疾病稳定(SD)],其血浆可溶性VEGF水平与治疗前的差异无统计学意义-结论:用ELISA方法检测血浆可溶性VEGF浓度对于评价胃癌肝转移的治疗疗效有一定的参考价值-

摘要:目的:探讨新辅助化疗应用于局部晚期宫颈癌的临床疗效-方法:选择Ⅰb2~Ⅱb期的宫颈癌患者52例-术前根据癌细胞病理分型,予以联合方案化疗2~3个周期,然后行广泛性子宫切除术和盆腔淋巴结清扫术-结果:52例患者术前化疗后,患者症状-体征均有明显改善,为根治性手术治疗创造了有利条件,临床总有效率92.5%,手术率88.50%(46/52)-结论:局部晚期宫颈癌术前新辅助化疗可以明显改善临床症状-缩小肿瘤的体积或侵及范围-降低肿瘤临床分期,提高手术率,降低高危因素-降低复发率,有望提高5年存活率-

摘要:目的:分析冠状动脉旁路移植术后机械通气时间延长的危险因素,以提高冠状动脉旁路移植患者术后监护治疗水平-方法:回顾分析本院2010年170例冠状动脉搭桥手术患者的临床资料,筛选术后机械通气时间延长的危险因素并用Logistic回归分析评估各影响因素作用大小-结果:统计分析结果显示,高龄-手术前仍抽烟-术前左室射血分数(LVEF)-手术时间-术后引流量以及术后并发症的发生是术后机械通气时间延长的危险因素,并且术前LVEF-手术时间-术后引流量以及术后并发症影响显著-结论:加强健康宣传-重视术前心功能调节-缩短手术时间-减少术后出血量-重视围手术期脏器保护以减少术后心-脑-肾等脏器并发症的出现可缩短术后机械通气时间,改善医疗质量-

摘要:目的:探讨白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)与输卵管异位妊娠的关系-方法:采用免疫组化技术检测11例非孕组和36例输卵管异位妊娠组输卵管组织中LIF和LIFR的表达水平,半定量分析其在各组间的表达差异-结果:无论是在输卵管腺上皮还是间质中,LIF在非孕组和异位妊娠组间的表达无明显差别;但是在输卵管腺上皮中,LIFR的表达异位妊娠组高于非孕组(P < 0.05);而在间质中,LIFR的表达输卵管妊娠组明显低于非孕组(P < 0.01)-结论:LIFR的异常表达可能与输卵管异位妊娠的发生密切相关-

摘要:目的:检测正常妊娠与子痫前期患者不同孕周的血清可溶性内皮因子(soluble endoglin,sEng)水平,探讨其在子痫前期发病中的作用-方法:检测并比较31例轻度子痫前期患者-26例重度子痫前期患者及43例正常妊娠妇女sEng的血清学水平-结果:孕12~16周-孕20~24周-孕28~32周-孕37~41周,sEng在正常妊娠组浓度为(7.7 ± 1.5)-(8.2 ± 1.6)-(9.3 ± 1.7)-(11.4 ± 2.6) ng/ml;轻度子痫前期组为(7.8 ± 1.5)-(9.4 ± 1.8)-(14.2 ± 2.9)和(21.1 ± 3.7) ng/ml;重度子痫前期组为(7.9 ± 1.6)-(12.5 ± 2.8)-(25.2 ± 3.9)-(33.6 ± 4.5) ng/ml-除孕12~16周,各组sEng水平差异无显著性意义(P > 0.05);孕20~24周-孕28~32周-孕37~41周,轻度与重度组sEng水平均显著高于正常妊娠组水平(P < 0.01)-结论:孕妇血清中sEng水平变化与子痫前期发病及病情发展有关-

摘要:目的:总结6月龄以下小婴儿川崎病(Kawasaki disease,KD)的临床特征以利于早期诊断-方法:对南京市儿童医院2005年3月至2009年2月诊治的43例6月龄以下KD患儿的病历资料进行回顾性分析,并与同期诊治的6月龄以上KD患儿对比分析-结果:6月龄以下小婴儿KD 43例,男女比例2.31∶1,与同期238例6月龄以上的3组KD患儿比较,急性期卡疤红斑-消化系统症状-神经系统症状显著增多,颈淋巴结肿大显著减少,差异有统计学意义;中性粒细胞百分比(N%)-血小板(PLT)-血沉(ESR)-乳酸脱氢酶(LDH)显著升高,血色素(Hb)显著下降,差异有统计学意义;不完全KD和冠状动脉瘤样扩张发生率明显增高,差异有统计学意义-结论:6月龄以下小婴儿KD以不完全KD显著增多-冠状动脉瘤发生率增加为特征-患儿急性期要及时发现冠状动脉异常,观察卡疤红斑-消化系统-神经系统症状,监测N%-PLT-ESR-LDH-Hb等指标,以利于对6月龄以下小婴儿KD的早期诊断-

摘要:目的:研究功能性便秘(FC)患者皮层-腰骶-肛门直肠神经通路的功能状态,探索FC潜在的神经机制-方法:FC组患者60例,男28例,女32例,平均年龄(49.44 ± 15.38)岁;正常对照组25例,男11例,女14例,平均年龄(24.67 ± 7.14)岁-通过经颅磁刺激皮层(TMS)和磁刺激腰脊神经根直肠内记录运动诱发电位(MEP)的检测方法观察神经反应电位的改变-结果:①TMS引出MEP结果:与正常对照组比较,FC组MEP波幅显著降低(P < 0.05),波潜伏期和峰间期无显著变化;FC组波形分化不良,重复性差;FC组和正常对照组双侧MEP各参数比较均无显著差异;②磁刺激腰脊神经根MEP结果:FC组波潜伏期延长,波幅下降,差异显著(P < 0.05)-结论:皮层-腰骶-肛门直肠神经通路的传导障碍可能是FC患者发病的潜在神经生理学机制-

摘要:目的:观察分析体表胃肠起搏-多潘立酮治疗餐后不适综合征(PDS)患者的近期疗效及生活质量-方法:72例符合PDS罗马Ⅲ标准的患者随机分为3组:多潘立酮组(多潘立酮10 mg,tid)-胃肠起搏组(体表胃肠起搏30 min/d)和联合治疗组(多潘立酮10 mg,tid和体表胃肠起搏30 min/d),疗程均为10 d-治疗前后予以临床症状评分-X线胃排空检测-简明健康状况调查表(SF-36)评估生活质量-健康对照组24例予胃排空检测及SF-36量表评分-结果:①治疗前,PDS患者胃排空及生活质量评分均显著低于健康对照组(P < 0.05);②治疗后,PDS 3组的临床症状评分较治疗前显著降低(P < 0.05),多潘立酮组与胃肠起搏组临床症状评分无显著差异(P > 0.05),均低于联合治疗组(P < 0.05);③PDS 3组治疗后,胃排空较治疗前显著改善(P < 0.05),3组之间无差异(P > 0.05);④治疗后,PDS 3组的生活质量评分均较治疗前显著提高(P < 0.05),联合治疗组和胃肠起搏组在精神健康这个维度上较多潘立酮组有显著提高(P < 0.05)-结论:体表胃肠起搏是治疗PDS安全有效无创的手段,可缓解症状-改善胃排空-提高生活质量,与多潘立酮的近期疗效相似;与多潘立酮联合使用,更有助于缓解PDS症状-

摘要:目的:评价经输尿管镜钬激光碎石术与体外冲击波碎石术(ESWL)治疗直径> 1 cm的输尿管上段结石的有效性及安全性-方法:选取2007年9月~2010年9月142例直径> 1 cm的输尿管上段结石患者,将其分为两组:经输尿管镜钬激光碎石术组74例,ESWL组68例,比较两组的结石排净率及并发症-结果:输尿管镜组74例中,70例看到结石并击碎,其中结石排净率为90.0%(63/70),而ESWL组结石排净率只有64.7%(44/68),差异有统计学意义(P < 0.05),两组术后均未发生明显的术后并发症-结论:经输尿管镜钬激光碎石术治疗直径> 1 cm的输尿管上段结石疗效明显优于ESWL,可作为直径> 1 cm的输尿管上段结石治疗的首选-

摘要:目的:探讨腹腔镜下根治性膀胱全切除回肠膀胱术的临床可行性,并总结手术技巧-方法:对3例膀胱癌患者行腹腔镜下根治性膀胱全切术,并在腹腔镜下施行回肠膀胱术-结果:3例手术均获成功,手术时间分别为320-280-270 min,出血量350-450-330 ml,淋巴结清扫数目为16-18-19枚,均为阴性,手术切缘阴性-术后3 d肠功能恢复,术后2周拔除单J管,无肠瘘尿瘘等并发症,术后住院时间8 d-术后随访分别为22-18-6个月,无复发及转移-结论:完全腹腔镜下根治性膀胱全切除回肠膀胱术进一步减少手术创伤,解剖结构显露较满意,有利于患者术后恢复-但手术难度较大,须熟练掌握各种腹腔镜操作技术后方可进一步开展-

摘要:目的:评价膝下动脉成形术联合臭氧气浴治疗糖尿病足的临床效果-方法:对9例糖尿病足患者(15支病变血管)行膝下动脉成形术联合臭氧气浴,随访3个月,观察临床疗效-结果:8例患者成功开通膝下动脉,术后臭氧气浴15~20天溃疡愈合-1例未完全开通者于术后20 d行第2趾骨截肢术-3个月后2例患者发现膝下动脉再狭窄,但溃疡已经愈合-结论:膝下动脉成形术联合臭氧气浴是治疗糖尿病足有效的治疗方法-

摘要:目的:制备负载庆大霉素-壳聚糖纳米粒的涂层钛板并对其表面形态-体外释药行为及抗金黄色葡萄球菌的性能进行评价-方法:采用溶剂铸膜(solvent casting)法制备庆大霉素-壳聚糖纳米涂层钛板,扫描电镜观察其表面形态,磷酸盐缓冲液中研究其体外释药行为,将庆大霉素-壳聚糖纳米涂层钛板置于均匀涂有1 × 108 CFU/ml金黄色葡萄球菌的Mueller-Hinton(MH)平板上连续培养直至抑菌环消失,以抑菌环直径为主要观察指标评价其在体外对金黄色葡萄球菌的抑制作用-结果:扫描电镜示庆大霉素-壳聚糖纳米粒较均匀地分布于钛板表面;体外释药行为显示庆大霉素-壳聚糖纳米涂层钛板中庆大霉素的释放可达到14 d,维持在52%左右;体外抑制金黄色葡萄球菌作用可维持9 d,抑菌环最大直径为(3.82 ± 0.03) cm-结论:制备的庆大霉素-壳聚糖纳米涂层钛板表面形态良好,体外释药稳定,对金黄色葡萄球菌有良好的抑制作用-

摘要:目的:与传统的气管插管(TT)方法作比较,探讨喉罩(LMA)在小儿先天性心脏病介入治疗术麻醉中的应用效果-方法:选择美国麻醉师协会(ASA)评分Ⅰ~Ⅱ级,先天性心脏病介入治疗的患儿60例,随机分为2组:喉罩组(LMA组,30例)和气管插管组(TT组,30例)-LMA组全麻诱导静脉给予丙泊酚1.5 mg/kg和雷米芬太尼2 μg/kg,在药物完全起效后行LMA置入-TT组全麻诱导时加用肌松药罗库溴铵0.6 mg/kg-麻醉维持采用丙泊酚和雷米芬太尼持续输注-分别记录两组患儿手术时间-苏醒时间-麻醉诱导前-LMA或TT置入前-置入后以及拔除前-后的平均动脉压(MAP)-心率(HR)-血氧饱和度(SpO2)的数值,并对置入LMA或TT的一次成功率进行比较,监测术毕麻醉恢复情况-结果:两组患儿手术时间-苏醒时间-麻醉诱导前及LMA或TT置入前-拔除前的MAP-HR-SpO2值相比较无统计学差异(P > 0.05),而在置入后和术后拔除LMA或TT时LMA组的MAP-HR低于TT组(P < 0.05),术后呼吸系统并发症LMA组少于TT组(P < 0.05)-结论:喉罩下全身麻醉用于小儿先天性心脏病介入治疗,与气管插管全麻相比,患儿血流动力学平稳,术后呼吸系统并发症少-

摘要:目的:评价3种粘结剂对钛-贵金属的粘结效果-方法:用3种粘结剂[Clearfil SA Cement(SA)-RelyX Unicem(Uni)-3M易调型玻璃离子粘固剂(GI)]粘结抛光钛片与喷砂处理过的贵金属,水浴24 h后检测粘结强度,并在体视显微镜下观察粘结界面破坏情况-结果:SA组-Uni组的粘结强度明显高于GI组,具有统计学差异,SA组与Uni组之间粘结强度无显著性差异-SA组的试件界面破坏方式全部为贵金属—粘结剂界面的破坏;Uni组中,2个试件表现为混合破坏,3个试件表现为内聚破坏;GI组的试件则全部表现为混合破坏-结论:Clearfil SA Cement与RelyX Unicem在钛—贵金属界面具有较高的粘结强度-

摘要:目的: 探讨浅表淋巴结Kikuchi病(Kikuchi disease,KD)与结核病(tuberculous lymphadenopathy,TLPN)超声表现特点,提高超声对二者的鉴别诊断能力-方法:对75例KD及215例TLPN受累浅表淋巴结二维及彩色多普勒超声表现进行回顾性分析-结果:KD和TLPN均以年轻女性多发,为颈部多区域淋巴结病变,KD多累及颈后三角区淋巴结,主要侵犯颈浅淋巴结群;TLPN主要累及颈内静脉链中组及下组淋巴结,主要侵犯颈深淋巴结群-超声表现:KD受累淋巴结多表现一致,包膜完整-锐利,淋巴门结构多较清晰,淋巴结皮质多为均质低回声,血流呈淋巴门型分布,血流密度以Ⅱ~Ⅲ级为主;TLPN受累淋巴结多无淋巴门结构,常融合成团,包膜增厚-模糊,甚至无包膜,周围组织水肿较明显;常合并有液化和(或)钙化-高回声等;血流以边缘型或无血流型多见,血流密度以0~Ⅰ级为主;频谱多普勒提示TLPN阻力指数较KD高(P < 0.001)-结论:KD与TLPN病变浅表淋巴结在超声表现上具有较明显的差别,超声对其鉴别具有重要用价值,可为进一步穿刺活检提供依据-

摘要:目的:探讨不同注射流率下256层CT血管造影(CTA)显示脊髓Adamkiewicz动脉(AKA)的效果分析-方法:120例受试者按照对比剂注射流率随机分成3组,4 ml/s组-5 ml/s 组和6 ml/s组,每组按照触发阈值200 HU和350 HU再分成2小组,每小组20例受试者-应用自动触发技术,达到阈值后延迟4 s开始扫描,所有CTA均由256层CT扫描机扫描,对比剂使用2 ml/kg,碘含量350 mgI/ml,通过18 G留置套管针肘前静脉注射,对原始数据进行容积重建(volume reformation,VR)-多平面重建(multiplanar reformation,MPR)和曲面重建(curved multiplanar reformation,CPR),由2位心血管影像诊断医师对结果进行分析-诊断标准:AKA在斜冠状位出现特征性的发夹征(hairpin sign),同时在血管CPR和3DVR显示AKA和主动脉之间的连续性确认-结果:4 ml/s 200 HU组确认7例,350 HU组6例;5 ml/s 200 HU组确认11例,350 HU组10例;6 ml/s 200 HU组确认19例,350 HU组确认18例,3组间AKA确认率有明显的统计学差异(P < 0.01)-结论:在6 ml/s 注射流率和200 HU或350 HU触发阈值扫描条件下,256层CT脊髓血管造影能够精确显示AKA和相应的节段性动脉,为临床提供可靠信息-

摘要:目的:监测和分析无锡市流行性感冒(流感)的流行动态和病原学特征,为流感的预防控制提供科学依据-方法:对2009年1月~2010年12月无锡市流感监测哨点的流感样病例(influenza like illness,ILI)发病动态-流感病毒分离资料进行监测和分析-结果:共监测报告ILI病例29 658例,ILI占门诊病例总数的比(ILI%)平均为3.18%-采集咽拭子标本3 544份,分离出流感病毒437株,分离率为12.33%-ILI和ILI%的高峰期为2009年8~11月,ILI-ILI%和流感病毒分离率三者的高峰相互吻合,并与流感优势毒株交替变化一致-结论:新甲型H1N1流感病毒的出现造成无锡市流感监测数据发生变化,关注ILI动态-ILI%动态-毒株型别交替变化和新型毒株的出现,可以评价和预警流感流行情况-