摘要:目的: 探讨血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ ,AngⅡ)对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)水平的调节,分析STAT3在AngⅡ诱导MSCs的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达增加中的作用,研究血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)与AngⅡ刺激诱导的STAT3磷酸化之间的关系-方法:分离培养大鼠MSCs,以AngⅡ处理细胞,并用针对STAT3的小干扰RNA(STAT3 siRNA)或ACE抑制剂卡多普利提前进行干预-用免疫印迹法 (Western blot) 检测细胞内STAT3磷酸化和ACE表达水平;用Real-time PCR法检测细胞内VEGF mRNA表达水平;用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平-结果:① 在MSCs中,AngⅡ诱导STAT3的磷酸化水平增加;② STAT3 siRNA明显抑制AngⅡ诱导的VEGF表达和分泌;③ 卡托普利显著抑制了AngⅡ诱导的STAT3磷酸化-结论:在MSCs中,STAT3参与了AngⅡ诱导的VEGF表达,并且AngⅡ诱导的STAT3具有ACE依赖性-

摘要:目的:探讨E-cadherin表达下调在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中诱导GSK-3β磷酸化失活信号通路的调控机制-方法:运用RNA干扰技术建立E-cadherin表达缺失的稳定细胞株-Western blot实验检测稳定株细胞(HepG2-E-cadherin-shRNA)E-cadherin的表达水平以及GSK-3β与Akt的磷酸化水平;用10 μmol/L PI3K抑制剂(LY294002)处理HepG2-E-cadherin-shRNA细胞,Western blot检测细胞GSK-3β磷酸化水平,RT-PCR检测HepG2-E-cadherin-shRNA细胞PTEN和Egr-1的mRNA水平,Western blot检测细胞PTEN的蛋白表达水平-结果:Western blot实验结果表明,HepG2-E-cadherin-shRNA稳定株细胞E-cadherin表达水平较空白对照组下调约82.54%,GSK-3β磷酸化水平较空白对照组上升约298.93%,Akt磷酸化水平较空白对照组上升约218.98%;LY294002作用4 h后,GSK-3β磷酸化水平与空白对照组相比下降至48.13%;RT-PCR结果显示,下调HepG2细胞E-cadherin表达水平后,细胞PTEN的mRNA水平下降至76.14%,Egr-1的mRNA水平下降至66.89%,PTEN的蛋白表达水平下降至53.77%-结论:人HCC细胞中E-cadherin抑制性表达导致细胞内GSK-3β磷酸化失活很可能是通过PI3K/Akt的信号通路实现的-

摘要:目的:观察大鼠脑缺血再灌注后海马内Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)蛋白表达的变化及细胞定位-方法:60只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组和脑缺血再灌注组,其中脑缺血再灌注组依术后不同的检测时间点分为:1-4-8 h和1-3-7 d 6个亚组-采用中脑动脉闭塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)建立脑缺血再灌注模型,用Western blot方法检测脑缺血再灌注后大鼠海马组织中NLK,活化的Caspase-3蛋白的变化趋势,用免疫组化和免疫荧光来检测NLK蛋白在脑组织中的细胞定位及可能发挥的生物学行为-结果:在脑缺血再灌注的海马组织中NLK蛋白随着脑缺血再灌注时间的延长而呈现先增高后降低,后再升高的趋势,其中缺血再灌注后8 h NLK蛋白表达达到高峰,与假手术组相比,差异有统计学意义(P﹤0.05)-活化的Caspase-3 的表达随着观察时间的延长递增,3 d达到峰值,与假手术组比较,差异有统计学意义(P﹤0.05),随后下降-NLK定位于脑组织中的神经元细胞尤其是海马CA1区的锥体神经元-结论:脑缺血再灌注后NLK蛋白的表达显著上调,提示NLK参与了成年大鼠脑缺血的发展-

摘要:目的:探讨氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对高糖腹透液(high-glucose peritoneal dialysate,HGPDS)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的影响-方法:体外培养HPMCs,同步化24 h后,分为正常对照组-HGPDS组-HGPDS+Flu组-单纯氟伐他汀组-DMSO对照组,各组分别刺激不同时间后,噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的活力,RT-PCR检测FN的mRNA表达,ELISA法检测上清液FN蛋白表达的变化-结果:与正常对照组比较,HGPDS明显抑制细胞活力,HGPDS联合Flu共同培养24-36 h,细胞活力有所恢复,其中,1 × 10-6 mol/L Flu作用24 h,细胞活力改善差异有统计学意义(P < 0.05);与正常对照组比较,HGPDS明显增加人腹膜间皮细胞FN mRNA及蛋白表达(P < 0.05),并呈时间依赖性,其中FN mRNA于6 h达高峰,FN蛋白于24 h达高峰-Flu 可抑制HGPDS诱导的FN的高表达(P < 0.05),并呈浓度依赖性-结论:HGPDS诱导体外培养人腹膜间皮细胞FN表达增加,此作用可被Flu 抑制-

摘要:目的:体外实验观察乳酸脱氢酶-A(lactate dehydrogenase-A,LDHA)短发夹RNA对胆管癌细胞系Hucct1 LDHA表达的抑制效果,筛选出针对LDHA基因有效的干扰靶点,并检测LDHA表达下调后,细胞增殖活力的改变情况-方法:设计合成干扰LDHA表达的寡核苷酸片段,经退火-连接等步骤克隆到线性化pGPU6/GFP/Neo真核表达载体,转化入DH-5α大肠杆菌中扩增,经质粒抽提纯化后测序鉴定-重组质粒用脂质体法转染胆管癌细胞系,荧光显微镜观察转染效率;并分别利用RT-PCR及Western blot技术检测LDHA mRNA及蛋白表达,验证短发夹RNA的干扰效果-将干扰效率最高的质粒转染Hucct-1,MTT法检测干扰组较对照组细胞增殖的变化-结果:成功构建了靶向LDHA基因的3个shRNA质粒表达载体,脂质体法平均转染效率为(80 ± 5)%-荧光定量RT-PCR和Western blot显示瞬时转染si-LDHA-1-si-LDHA-3的Hucct1细胞LDHA mRNA和蛋白表达均较阴性对照组有不同程度的下降,其中si-LDHA-3干扰效果尤为明显-MTT法检测显示转染组Hucct1细胞较阴性对照组增殖减慢,转染后96 h两组差异具有统计学差异(P < 0.05)-结论:重组质粒能有效干扰胆管癌细胞Hucct1中LDHA基因的表达,经瞬时转染筛选出了有效干扰靶位,下调LDHA的表达,明显抑制胆管癌细胞系Hucct-1的增殖活力-

摘要:目的:探讨急性心肌梗死后梗死区周围心肌细胞内细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的表达-方法:制作SD大鼠急性心肌梗死模型,分别于梗死后3d-1周-2周-3周-4周各处死5只大鼠,5只假手术大鼠为对照,取出心脏组织,进行Masson染色,同时使用免疫组织化学法检测心脏组织中cyclin A2及磷酸化组蛋白H3(phospho-histone H3,H3P)的表达-结果:Masson染色从病理上证明心肌梗死模型构建成功;梗死区周围心肌细胞cyclin A2的表达在梗死后1周时最高,阳性细胞染色百分比为(7.72 ± 1.16)%,2周后逐渐下降,梗死后4周时,与假手术组相似,几乎无阳性表达-梗死后第3天-1周-2周和3周均可见少量心肌细胞核表达H3P,其阳性率为1.56%~3.12%-结论:心肌细胞cyclin A2的阳性表达提示急性心肌梗死后梗死区周围少部分心肌细胞能重新进入有丝分裂周期-

摘要:目的:探讨人胰岛素及其类似物对人乳腺癌细胞系(MCF-7)增殖的影响及二甲双胍联合胰岛素及其类似物对MCF-7细胞增殖的影响-方法:①使用不同浓度(0-1-10-100-1 000 nmol/L)的人胰岛素及类似物干预MCF-7细胞72 h 后,用CCK-8法检测干预后细胞增殖情况-②用胰岛素及类似物(每种胰岛素浓度均为1 000 nmol/L)干预MCF-7细胞,分别用CCK-8法检测各胰岛素在干预24-48-72 h后的细胞增殖-③用CCK-8法检测单纯二甲双胍(0-2.5-5.0-10.0-20.0 mmol/L),及二甲双胍联合胰岛素及其类似物(浓度均为1 000 nmol/L)干预 MCF-7 72 h后细胞的增殖情况-结果:人胰岛素及类似物均能促进乳腺癌细胞系增殖并呈时间依赖性,人胰岛素-甘精胰岛素-赖脯胰岛素对细胞的增殖作用呈显著的剂量依赖性,相同条件下不同胰岛素对细胞的增殖作用无明显差异,但甘精胰岛素-赖脯胰岛素在相同条件下促细胞增殖作用高于其他胰岛素-二甲双胍可以呈浓度依赖性地抑制细胞的增殖作用,并减弱胰岛素类似物引起的细胞增殖作用,相同浓度二甲双胍对不同胰岛素类似物促增殖的抑制作用无明显差异,但对地特胰岛素的抑制作用小于其他胰岛素类似物-结论:胰岛素类似物和人胰岛素均能促进肿瘤细胞的增殖,二甲双胍可以抑制MCF-7细胞增殖,二甲双胍可以拮抗胰岛素及其类似物引起的促细胞增殖作用-

摘要:目的:建立Graves病小鼠模型,研究Graves病母鼠分娩后甲状腺自身抗体水平变化-方法:应用表达促甲状腺激素刺激激素受体(thyrotropic-stimulating hormone receptor,TSHR) A亚单位的重组腺病毒Ad-TSHR-289免疫雌性Balb/c小鼠制备Graves病动物模型-将6周Balb/c雌性小鼠随机分为实验组-对照组,分别用重组Ad-TSHR-289-Ad-β-gal经小鼠腿部肌肉注射,免疫剂量均为3.3 × 108 pfu/50 μl PBS,每隔3周免疫1次,共3次-免疫结束后,内眦静脉取血,检测血清甲状腺素(T4)-促甲状腺素受体抗体(TRAb),然后分别与Balb/c雄性小鼠配对,确定妊娠后继续饲养至分娩-分娩后1 d,处死母鼠,检测母鼠血清T4-TRAb-抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)-甲状腺球蛋白抗体(TGAb),并分离母鼠甲状腺,行组织学检查-结果:实验组中96.7%的母鼠血清TRAb水平显著增高(P < 0.05);实验组第3次免疫后有56.7%(17只) 的小鼠达到甲亢标准,分娩后73.3%(22只)的母鼠达到甲亢标准;实验组中16.7%的母鼠血清TPOAb水平明显高于正常范围;母鼠血清TGAb较对照组显著增高,差异有统计学意义(P < 0.05)-结论:利用Ad-TSHR-289免疫Balb/c小鼠可以成功制备Graves病小鼠模型-分娩后Graves病母鼠血清TPOAb及TGAb水平升高可能与TRAb有关-

摘要:目的:构建高脂饮食诱导肥胖小鼠模型,观察BVT.2733在改善胰岛素抵抗中的作用及对Visfatin表达的影响-方法:构建高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型,分为肥胖对照组和BVT.2733治疗组,肥胖对照组给予安慰剂-治疗组给予BVT.2733灌胃2周,同时设正常饮食的小鼠为正常对照组-放射免疫法测小鼠空腹胰岛素水平,生化法检测血糖,实时定量RT-PCR 检测内脏脂肪组织Visfatin的mRNA表达-观察各组小鼠脂肪组织的形态学变化-结果:与正常对照组相比,肥胖对照组小鼠脂肪细胞明显增大,体重增加,空腹血糖-血清胰岛素水平升高(P < 0.05)-与肥胖对照组相比,BVT.2733治疗组小鼠脂肪细胞体积减小,空腹血清胰岛素水平明显下降(P < 0.01),脂肪组织Visfatin mRNA表达显著降低(P < 0.05)-结论:BVT.2733能够降低体重,减少脂肪组织,并且降低Visfatin的表达水平-

摘要:目的:探讨自然妊娠和辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)妊娠时早期妊娠流产绒毛细胞遗传学检查的临床应用价值-方法:门诊107例自然妊娠和ART妊娠早期流产患者,无菌下取108份绒毛组织进行绒毛细胞培养及染色体核型分析,成功培养106份,分为2组:46份自然妊娠早期流产组(N组);60份ART妊娠早期流产组(ART组),其中7份为宫腔内人工授精,53份为体外受精和胞浆内单精子注射-结果:①108份早期流产绒毛培养成功率为98.15%(106/108)-②N组正常核型为28例,异常核型18例;ART组正常核型为41例,异常核型19例-异常核型共计37例,其中数目异常检出率为33.96%(36/106),结构异常为0.94%(1/106)-③异常核型以数目异常为主97.2%(36/37),并以三体征75.68%(28/37)最常见-N组:三倍体1例,性染色体数目异常1例,常染色体异常16例-ART组:三倍体2例,四倍体2例,罗伯逊易位1例,性染色体数目异常2例,常染色体异常12例-④男性胚胎占47.17%(50/106),女性胚胎占52.83%(56/106),男女性别比例无显著性差异;染色体异常的胚胎中男性占48.65%(18/37),女性占51.35%(19/37),异常胚胎在两种性别中的比例无显著性差异-⑤N组患者平均年龄为(29.61 ± 3.60)岁,ART组患者平均年龄为(31.98 ± 4.38)岁,两组年龄上差异有统计学意义-结论:胚胎染色体数目异常是导致早期胚胎停育流产的重要原因;早期流产绒毛细胞进行细胞遗传学检查,可为临床病因诊断和下次妊娠治疗和评估提供重要理论依据-

摘要:目的:探讨术前自身QRS波时限(intrinsic QRS duration,IQRSd)对右心室心尖部(right ventricular apex,RVA)起搏患者心功能下降的预测作用-方法:选取因三度房室传导阻滞(Ⅲ°AVB)植入双腔全自动型起搏器(DDD)或单腔同步型起搏器(VVI)患者42例-其中,末次随访时左室射血分数较术前下降的绝对值(ΔLVEF)≥5%的患者22例(ΔLVEF≥5%组,DDD 12例,VVI 10例),同期ΔLVEF<5%患者20例(ΔLVEF<5%组,DDD 11例,VVI 9例),两组比较,研究起搏引起心功能下降的可能原因和可能的预测因子-每例患者在起搏器植入术前行12导联心电图和超声心动图检查,术后随访时记录起搏心电图-超声心动图及右心室累积起搏比例-结果:两组患者平均随访77.3个月,ΔLVEF≥5%组左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)由术前(64.20 ± 6.30)%降至(40.60 ± 10.00)%(P < 0.001),左房内径(left atrial diameter,LAD)由术前(34.77 ± 6.42)mm增大至(41.00 ± 7.45)mm(P < 0.001),左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)由术前(49.82 ± 4.86) mm明显增大至(55.59 ± 8.44) mm(P < 0.001),差异均有统计学意义;ΔLVEF<5%组LVEF由术前(65.40 ± 3.25)%降低至(64.94 ± 3.00)%(P = 0.543),LAD由术前(37.40 ± 4.84) mm增加至(38.15 ± 5.83) mm(P = 0.347),LVEDD由术前(48.30 ± 3.95) mm增加至(49.00 ± 3.87) mm(P = 0.090),变化均无统计学意义;四格表卡方检验提示植入起搏器后术前IQRSd≥110 ms组较术前IQRSd<110 ms组患者发生心功能下降比率更高(P = 0.002);Kaplan-Meier分析发现植入起博器后术前IQRSd≥110 ms患者较术前IQRSd<110 ms患者心功能下降发生时间更早-COX回归分析显示,术前IQRSd≥110 ms是左室收缩功能下降的独立预测危险因素(P < 0.05)-结论:RVA长期起搏可引起心脏结构改变和左室收缩功能下降;术前IQRSd≥110 ms患者左室收缩功能下降发生率高且时间更早,术前IQRSd≥110 ms是起搏依赖患者左室收缩功能下降的独立预测危险因子-

摘要:目的:建立用流式细胞术测定富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)中血小板环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及P-选择素表达的方法;检测在无抗血小板药物干预的状况下中国汉族冠心病患者血小板COX-1-COX-2及P-选择素的表达情况-方法:入选拟行冠状动脉搭桥术-停用阿司匹林及氯吡格雷7 d以上的冠心病患者20例,采集空腹静脉血,经预处理及荧光标记抗体孵育后用流式细胞仪检测血小板COX-1-COX-2及P-选择素的表达情况-结果:在无抗血小板药物干预的状况下,中国汉族冠心病患者血小板COX-1-COX-2阳性表达比例分别为(39.67 ± 9.20)%和(4.11 ± 2.74)%;生理盐水刺激后血小板膜表面P-选择素的阳性表达率为(13.56 ± 8.07)%,花生四烯酸刺激后的阳性表达率为(24.08 ± 13.49)%,血小板膜表面P-选择素的实际阳性表达率为(10.27 ± 7.40)%-结论:流式细胞术可有效测定血小板COX-1-COX-2和P-选择素的表达,冠心病患者血小板COX-1-COX-2和P-选择素的表达在中国汉族人种与高加索人种间可能存在差异-

摘要:目的:探讨血清25-羟维生素D3[25(OH)D3]水平与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大血管病变的关系-方法:选取T2DM患者189例,按照有无大血管病变分为单纯T2DM组104例-T2DM合并大血管病变组85例,100例无糖尿病者为正常对照组-对每位患者进行临床资料收集,常规生化指标-血清25(OH)D3水平检测;根据25(OH)D3水平由高到低按三分位法将患者分为25(OH)D3高-中-低3组,比较3组患者动脉硬化的发生情况- 结果:单纯T2DM组和T2DM合并大血管病变组的血清25(OH)D3水平显著低于正常对照组(P < 0.05);T2DM合并大血管病变组患者血清25(OH)D3水平显著降低,与单纯T2DM组比较差异有统计学意义(P < 0.05);按25(OH)D3水平由高到低进行分组的3组患者的大动脉粥样硬化的患病率也逐渐升高,分别为:14.29%-25.40%和48.73%,25 (OH)D3低水平组患者的大动脉粥样硬化的患病率显著高于25(OH)D3中-高水平组患者,差异有统计学意义(P均 < 0.05)-结论:血清25(OH)D3水平与T2DM大血管病变发生呈明显负相关,血清25(OH)D3水平降低可能增加糖尿病大血管病变的风险-

摘要:目的:观察胰岛素泵治疗2型糖尿病患者的疗效-方法:采用动态血糖监测系统(continuous sugar monitoring system,CGMS)监测指导胰岛素泵治疗糖尿病患者,与每日8次指血监测方式指导胰岛素泵治疗(指血组)的效果进行比较-结果:CGMS组的血糖达标时间明显优于指血组,且CGMS组严重低血糖的发生少于指血组-结论:CGMS联合胰岛素泵控制血糖所需时间短且安全,优于指血指导胰岛素泵的治疗-

摘要:目的:探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)与下肢静脉性溃疡(venous leg ulceration,VLU)发生的相关性-方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA法)对下肢慢性静脉功能不全(chronic venous insufficiency,CVI)无溃疡患者-VLU患者和正常人的血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)-白介素(interleukin,IL)-1β-IL-2受体(IL-2 receptor,IL-2R)-Cys C水平及静脉组织Cys C水平进行检测-结果:①VLU组血浆TNF-α-IL-1β水平分别为(185.46 ± 20.90)pmol/L和(100.60 ± 17.43) pmol/L,明显高于对照组的(32.28 ± 7.76) pmol/L和(58.72 ± 16.20) pmol/L(P < 0.05),CVI无溃疡组的TNF-α和IL-1β分别为(41.68 ± 7.35)pmol/L和(65.36 ± 25.51)pmol/L,与对照组相比差异无统计学意义(P > 0.05);VLU组和CVI无溃疡组血浆IL-2R水平分别为(138.56 ± 78.75) pmol/L和(94.45 ± 35.26) pmol/L,与对照组的(93.67 ± 12.28) pmol/L相比较,差异无统计学意义(P > 0.05);②VLU患者组织Cys C表达较单纯CVI无溃疡患者和正常人明显降低(P < 0.05);手术前VLU患者血浆Cys C的表达显著低于正常人(P < 0.05),手术后4 d VLU患者血浆Cys C的表达显著高于手术前(P < 0.05)-③相关分析显示Cys C表达与TNF-α和IL-1β表达呈显著负相关,r值分别为-0.878和-0.990(P < 0.05)-④术后Cys C表达较低的患者溃疡复发率高于Cys C高表达患者-结论:Cys C的表达与VLU的发病有密切关系,Cys C的低表达可能是导致VLU的发病和复发的重要因素-

摘要:目的:通过病理观察探讨芦荟对静脉炎的治疗效果,寻找静脉炎的治疗方法-方法:选用新西兰大耳白兔30只,双侧耳缘静脉留置针穿刺置管,模拟临床输液,留置5 d致静脉炎后拔出留置针,将兔随机分为模型组-实验Ⅰ组-实验Ⅱ组,每组10只-模型组不做任何处理,分组后即留取标本;实验Ⅰ组用50%硫酸镁湿敷,实验Ⅱ组用新鲜芦荟湿敷-实验组均外加保鲜膜包裹,每次敷4 h,每天2次,治疗5 d后留取标本做切片,HE染色光镜观察血管内膜及周围组织的病理改变,透射电镜观察内皮细胞超微结构变化-结果:3组血管炎症反应程度比较差异有明显统计学意义(P < 0.001);透射电镜观察实验Ⅰ组和实验Ⅱ组血管内皮细胞线粒体和粗面内质网肿胀程度较模型组均减轻,实验Ⅱ组比实验Ⅰ组减轻更显著-结论:新鲜芦荟和50%硫酸镁治疗静脉炎均有效,新鲜芦荟治疗效果优于50%硫酸镁-

摘要:目的:检测不同程度支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿血清白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)-肿瘤坏死因子α ( tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)的动态变化,探讨其在MPP发病机制中的作用及临床意义-方法:收集2009年1月~2011年12月南京医科大学附属南京医院儿科住院诊断明确的MPP患儿60例,其中重症30例,以同期30例体检的儿童作为正常对照组-采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA )检测患儿血清IL-8和TNF-α的质量浓度,免疫比浊法测定血清hs-CRP的浓度,用单因素方差分析法比较患儿血清中IL-8-TNF-α和hs-CRP在不同病期和轻-重症中的表达水平-结果: MPP患儿血清IL-8-TNF-α水平在急性期和恢复期均明显高于正常对照组(P < 0.01),且重症组显著高于轻症组(P < 0.01);急性期重症组hs-CRP水平高于轻症组及正常对照组(P < 0.01),而在恢复期,hs-CRP水平下降,MPP患儿与正常对照组比较,差异无统计学意义(P > 0.05)-结论:IL-8-TNF-α和hs-CRP在小儿MPP的发病过程中发挥重要作用,动态监测患者血清IL-8-TNF-α和hs-CRP水平变化对MPP的病情监测及治疗有重要的指导意义-

摘要:目的:探讨手足口病患儿体内某些维生素及微量元素水平的变化,以期指导临床用药-方法:应用高效液相色谱法-原子吸收光谱法-酶联免疫法等,对180例手足口病患儿的血清锌-铁-镁-钙-维生素A-维生素D等指标进行检测,并进行统计学分析-同期随机抽取60例健康同龄儿作为对照-结果:发病组锌-维生素D缺乏率均高于正常对照组(P < 0.05);铁-钙-镁-维生素A缺乏率与正常对照组比较差异无统计学意义(P > 0.05)-发病组血清锌-维生素D的含量均低于正常对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);血清铁-钙-镁-维生素A的含量两组比较差异无统计学意义(P > 0.05)-发病组内轻症组与重症组营养素缺乏率与营养素水平比较差异均无统计学意义(P > 0.05)-结论:锌-维生素D缺乏在小儿手足口病患儿中普遍存在,临床治疗中应予适量补充-

摘要:目的:探讨单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporters 1,MCT1)-CD147-CD44 mRNA和蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中表达的相关性及其在NSCLC发生-发展及预后中的意义-方法:取经病理确诊的56例NSCLC患者癌组织-癌旁组织(距肿瘤边缘> 5 cm)和21例肺良性病变组织采用免疫组化和实时荧光定量PCR检测MCT1-CD147-CD44蛋白及mRNA的表达-结果:①在NSCLC组织中MCT1-CD147-CD44表达均明显高于对照组(P < 0.05);②MCT1在肺癌细胞膜上的表达水平与CD147-CD44的表达均存在相关性(P < 0.05);③MCT1-CD147-CD44的表达与NSCLC患者的性别-年龄-肿瘤大小-TNM分期均无关,但与肿瘤的组织类型(P < 0.05)-淋巴转移(P < 0.05)显著相关,且MCT1-CD44蛋白和mRNA的表达与肿瘤的分化程度显著相关(P < 0.05)-结论:MCT1-CD147-CD44可能参与肿瘤的发生-发展及远处淋巴结转移,可作为检测NSCLC和预后评价的指标-

摘要:目的:探讨细胞质胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)和Ki-67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平及其对NSCLC患者预后的意义-方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学EnVision法检测TK1和Ki-67的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系-结果:NSCLC组织中TK1(60.89%)和Ki-67(55.45%)的阳性表达率均显著高于癌旁肺组织(P < 0.01);Spearman等级相关分析显示二者的表达呈正相关(r = 0.518, P < 0.001);NSCLC中,TK1和Ki-67的表达均与肿瘤分化程度和TNM分期显著相关(P < 0.05);Kaplan-Meier生存分析显示随TK1表达的增强和Ki-67指数的增高,NSCLC患者的总体生存期逐渐降低(P < 0.01);Cox 回归分析提示肿瘤TK1表达和TNM分期是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P < 0.05)-结论:TK1在NSCLC的表达与肿瘤的分化-进展有关,TK1表达有助于对患者预后的评价-

摘要:目的:研究多原发膀胱癌与单发膀胱癌中P53-Bcl-2-C-erbB-2-表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达情况,探讨其临床意义,为多原发膀胱癌的临床诊断-鉴别诊断及靶向治疗提供实验依据-方法:运用免疫组化方法检测多原发膀胱癌15例,单发膀胱癌15例(临床分期-病理分级与多原发膀胱癌相同),正常膀胱组织15例,3组共45例中P53-Bcl-2-C-erbB-2-EGFR的表达情况,比较其阳性表达率及表达程度的差异-结果:多原发膀胱癌及单发膀胱癌中P53-Bcl-2-C-erbB-2-EGFR的阳性表达均高于正常膀胱组织(P < 0.05),多原发膀胱癌组织中P53-Bcl-2的阳性表达高于单发膀胱癌组织(P < 0.05),而C-erbB-2-EGFR的阳性表达低于单发膀胱癌组织(P < 0.001)-结论:多原发膀胱癌与单发膀胱癌组织中P53-Bcl-2-C-erbB-2-EGFR表达有差异;联合检测P53-Bcl-2-C-erbB-2-EGFR对于多原发膀胱癌的诊断及鉴别诊断具有一定临床价值,也为多原发膀胱癌的靶向治疗提供了可能-

摘要:目的:乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)是近几年发现的新的抑癌基因,本研究旨在分析BRCA2在卵巢癌组织中的表达及其临床意义-方法:采用1对引物扩增BRCA2基因第14外显子,应用聚合酶链反应和基因测序技术检测BRCA2基因,并且应用免疫组化和Western blot检测肿瘤组织BRCA2蛋白的表达-结果:卵巢黏液性囊腺瘤和正常组织BRCA2基因未发生突变,浆液性肿瘤和黏液性囊腺癌的BRCA2第14外显子的128位碱基T突变为C-Western blot检测结果显示BRCA2在卵巢囊腺癌上的表达低于正常卵巢组织和卵巢囊腺瘤,免疫组化检测结果发现BRCA2在卵巢黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中的阳性率分别为87.50%和53.33%,差异有统计学意义(P < 0.05);而BRCA2在卵巢浆液性囊腺瘤和浆液性囊腺癌中阳性率分别为53.85%和73.17%,差异没有统计学意义(P > 0.05)-BRCA2蛋白在不同年龄-组织学分型-分化程度和临床分期各组间差异均无统计学意义(P > 0.05)-结论:BRCA2在卵巢癌组织中的表达不仅可以用于诊断,也可能为治疗提供一个途径-

摘要:目的:探讨成束蛋白(Fascin)在人食管癌组织中的表达及临床意义-方法:用免疫组化MaxVision法检测Fascin在食管癌和癌周正常食管组织的表达,Image-pro plus图像分析软件对其表达强度进行定量分析,并用表达的阳性单位(positive unit,PU)反映其表达强度-结果:Fascin蛋白在食管癌组织中的表达明显高于其在食管正常组织中的表达(P < 0.05),而其表达与食管癌临床分期(P < 0.05)-浸润深度(P < 0.05)-淋巴结转移(P < 0.01) 有关,同时与食管鳞状细胞癌的组织分化程度(P < 0.05)有关-结论:Fascin蛋白在食管癌中高表达,是食管癌分化差-恶性程度高的标志,并与浸润深度-淋巴结转移有关,以Fascin蛋白为靶点可能为食管癌的治疗提供新的思路-

摘要:目的:研究ERβ基因表达及多态性与胃癌发生发展的相关性-方法:以100例原发性胃癌为实验组,90例胃溃疡为对照组,免疫组织化学SP法检测ERβ蛋白,限制性酶切法检测ERβ基因CA重复序列多态性和G1082A多态性-结果:ERβ实验组和对照组阳性率分别为68.0% 和23.3%,差异有统计学意义(P < 0.01),并且分化程度低-浸润深-有淋巴结转移和5年死亡者的ERβ阳性率分别高于分化程度高-浸润浅-无淋巴结转移和5年生存者,且Ⅰ-Ⅱ期低于Ⅲ期(P < 0.01,P < 0.05),而与初复发-年龄-肿瘤大小和组织学类型无关(P > 0.05)-ERβ基因CA重复序列对照组和实验组基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P > 0.05),两组基因型SS-SL-LL分布和等位基因S-L频率的比较,差异无统计学意义(P > 0.05)-ERβ G1082A多态性中,RsaⅠ和AluⅠ酶切分析:实验组和对照组均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P > 0.05)-两组基因型rr-Rr-RR分布和等位基因r-R和a-A频率的比较差异无统计学意义(P > 0.05);而实验组aa基因型频率与对照组相比,差异有统计学意义(P < 0.05),且该基因型与肿瘤的临床分期-分化程度-浸润深度-转移情况-5年生存情况密切相关(P < 0.05),与肿瘤初复发-患者年龄-肿瘤大小-组织学类型无关(P > 0.05),而等位基因频率中仅a/A与肿瘤的分化程度-浸润深度密切相关(P < 0.01)-结论:ERβ与胃癌的发生-分化程度-浸润深度-转移及5年存活率密切相关,并且ERβ的aa基因型和等位基因a/A与胃癌的关系极大-

摘要:目的:探讨肝癌衍生生长因子(hepatoma derived growth factor,HDGF)与Ki-67在胃癌组织及正常胃黏膜组织中的表达及临床意义-方法:用免疫组织化学SP法检测47例胃癌组织-15例胃黏膜不典型增生组织及10例正常胃黏膜组织中HDGF和Ki-67蛋白的表达水平,并探讨其表达与肿瘤临床病理参数的关系-结果:HDGF在胃癌组织中的阳性表达率为65.9%,高于胃黏膜不典型增生组织(33.3%,P < 0.05)及正常胃黏膜组织(20%,P < 0.05),HDGF表达与肿瘤的浸润深度-淋巴结转移-临床TNM分期之间有明显的相关性;Ki-67在胃癌组织中的阳性表达率为74.5%,明显高于胃黏膜不典型增生组织(26.7%,P < 0.05)及正常胃黏膜组织(20%,P < 0.01),Ki-67表达与肿瘤的淋巴结转移-临床TNM分期之间有明显的相关性-结论:HDGF与Ki-67在胃癌中高表达,在肿瘤细胞增殖上存在一定协同性,在胃癌的发生发展过程中具有重要作用-

摘要:目的:分析2011年江苏省吸毒人群性病艾滋病相关流行病学特征-方法:采用Excel2007和SPSS15.0 统计学软件对江苏省2011年吸毒人群监测资料进行整理和分析-结果:3 290例吸毒者中,使用传统毒品占39.3%,新型毒品占54.0%,新型毒品使用者更多的为青年人,女性比例高;新型毒品使用者商业性行为发生率最高,为27.34%;商业性行为安全套坚持使用率为33.11%,梅毒初筛阳性17.11%,复检阳性率为9.10%,新型毒品使用者梅毒阳性率显著高于传统毒品使用者-结论:江苏省吸毒者以海洛因为主的传统毒品使用比例较低,以冰毒为代表的新型毒品占据主要地位;新型毒品使用者梅毒感染率高,不安全性行为比例高,人类免疫缺陷病毒在该人群中传播的风险较高,强化的干预措施亟待跟进-

摘要:目的:了解南京市男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)梅毒感染情况及影响因素,为行为干预工作提供科学数据-方法:在南京市MSM社区使用滚雪球法招募MSM进行问卷调查,了解其社会人口学-高危行为特征;采集静脉血进行HIV和梅毒抗体检测-结果:共调查661例MSM,所调查的MSM平均年龄为(27.44 ± 7.94)岁,未婚者占84.0%,高中及以上学历占90.5%-近6个月性行为调查性伴数大于10人的占5.0%,最近6个月肛交每次使用安全套的比例为36.0%,3.9%曾有过商业性男性性服务,4.5%曾为男性提供过商业性服务,21.0%曾与女性发生性关系-所调查的MSM的梅毒感染率为11.5%-多因素Logistic回归分析结果显示,年龄> 25岁(OR=4.20,95%CI:2.26~7.80)-非本地户籍(OR=1.67,95%CI:1.00~2.78)-寻找性伴场所为浴池(OR=2.29,95%CI:1.26~4.15)以及近1年做过性病检查或治疗(OR=2.15,95%CI:1.25~3.69)是梅毒感染的影响因素-结论:南京市 MSM无保护性行为发生率高,梅毒感染率已达一定水平,应及时采取有效的干预措施-

摘要:目的:探讨不同氟暴露情况下男性人群不育情况的差异-方法:对高氟区组94例和低氟区组114例男性人群与氟暴露相关的生活居住环境-饮食情况-生育情况等进行调查,并分析比较两组人群生活习惯-氟暴露情况-生育情况等的差异-结果:高氟区组在经常用煤-喜爱喝茶-氟斑牙程度-不育率等方面显著高于低氟区组(P < 0.05),而在炉灶改良-使用含氟牙膏等方面显著低于低氟区组(P < 0.05);多因素Logistic回归显示“调查对象来自高氟区”和“使用未改良炉灶”对男性不育的影响有统计学意义(P < 0.05)-结论:高氟区组在煤烟型氟暴露和不育情况方面均比低氟区组更严重,提示长期高氟暴露是不育的危险因素,可致男性人群不育的风险升高-

摘要:目的:建立卵巢癌患者血清差异表达多肽谱,并探讨其潜在诊断价值-方法:应用磁珠富集多肽结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测方法,筛选上皮性卵巢癌组和健康对照组差异表达多肽峰,利用ClinProTools软件比较两组血清多肽表达差异并建立差异表达多肽谱及早期诊断模型-结果:在卵巢癌组血清中,m/z 2 662.02-2 653.68-5 859.21-5 901.69-5 937.06表达显著上调;m/z 1 857.82-2 074.28-2 856.33表达显著下调-差异表达图谱建立的诊断模型预测早期卵巢癌的准确率达到81.8%(9/11),利用9例宫颈癌血清验证均为阴性,特异性达100%(0/9)-结论:磁珠富集-质谱结合ClinProTools生物信息学分析技术,有望成为新的人卵巢癌辅助诊断技术-

摘要:目的:利用弱阳离子磁珠纯化(magnetic beads based weak cation exchange chromatography,MB-WCX)系统结合基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)的方法获取糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的尿小分子差异多肽谱-方法:按Mogensen标准,根据3 d平均微量白蛋白尿排泄率,将68例2型糖尿病患者分组,其中正常蛋白尿(DM1)组24例,微量白蛋白(DM2)组22例,大量蛋白(DM3)组22例;健康对照(C)组20例-DM1及DM2组肾小球率过滤(glomerular filtration rate,GFR)均> 90 ml/(min·1.73 m2),DM3组GFR为60~89 ml/(min·1.73 m2)-采用MB-WCX试剂盒富集尿多肽,再经MALDI-TOF-MS技术,采集尿液多肽谱,应用ClinProtTM软件进行生物学比较分析-结果:质荷比 < 12 000时,DM1组与C组相比,有15个蛋白质峰差异有统计学意义(P < 0.01)-DM2组与C组相比,有1个蛋白质峰差异有统计学意义(P = 0.029 8)-DM3组与C组相比,有10个蛋白质峰差异有统计学意义(P < 0.01)-结论:MB-WCX系统联合MALDI-TOF-MS蛋白质检测技术,能够获得健康人及DN患者尿液小分子多肽谱,为进一步从中寻找早期筛查的标志物提供基础-

摘要:目的:建立气相色谱/质谱联用测定室尘中7种常见邻苯二甲酸酯(phthalate esters,PEs)的分析方法-方法:用吸尘器采集室尘,用正己烷超声提取室尘中的PEs,浓缩后用正己烷定容至0.2 ml,气相色谱/质谱仪分析测定-结果:7种PEs 22 min内彼此完全分离,在5~2 000 ng/ml范围内线性关系良好,相关系数r均 > 0.998,相对标准偏差为5.66%~18.03%,加标回收率为87.73%~110.63%-结论:该方法测定室尘中PEs经济-快速-简便-灵敏,重现性好,符合大样本量室尘样品中PEs的测定要求-

摘要:

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