摘要:目的:研究RNPC1a基因对SUM1315细胞增殖-迁移及侵袭的影响。方法:应用脂质体技术将RNPC1a 短发夹RNA(shRNA)转染至SUM1315细胞,通过嘌呤霉素筛选出稳定细胞株,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测其干涉效率,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖情况,划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测其迁移和侵袭能力。结果:经qRT-PCR和Western blot方法证实稳定转染RNPC1a shRNA的SUM1315细胞中RNPC1a的mRNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P < 0.05),同时RNPC1a干扰后细胞的增殖-迁移及侵袭能力均减弱(P < 0.05)。结论:RNPC1a shRNA能有效地降低SUM1315细胞中RNPC1a基因的表达,RNPC1a基因沉默可以抑制SUM1315细胞的增殖-迁移及侵袭。

摘要:目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长-增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法检测NIH3T3-Trop-2细胞的增殖能力,软琼脂集落形成实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的克隆形成能力,明胶酶谱法检测NIH3T3-Trop-2细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及细胞划痕实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的迁移能力。结果:稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞在生长增殖-克隆形成及侵袭能力均较NIH3T3细胞强,细胞培养上清中的MMP-2和MMP-9增多。结论:Trop-2对细胞的增殖与迁移能力具有明显的促进作用。

摘要:目的:检测miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中的表达变化,探讨其与细胞凋亡之间的相关性及其检测的临床意义。方法:体外培养SPC-A1细胞,实验组加入终浓度为2.5 μg/ml DDP,同时设置不加DDP的对照组。观察12-24-48和72 h后显微镜下细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a的表达变化。结果:DDP(2.5 μg/ml)组SPC-A1细胞形态呈凋亡改变,在48和72 h凋亡率分别为(59.3 ± 2.5)%和(76.4 ± 3.1)%,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a含量在24-48和72 h均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中miR-27a含量在12-24-48和72 h逐渐升高,两两比较差异均有统计学意义(P < 0.05)。结论:miR-27a在DDP诱导的SPC-A1细胞凋亡中表达升高,提示其可能参与细胞凋亡调控;对miR-27a进行定量检测有望用于对肺腺癌化疗疗效的评估。

摘要:目的:探讨miR-125b与血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况及与两者的相关性。方法:利用real-time PCR检测肝癌-癌旁组织-肝癌细胞Huh-7-HepG2以及正常肝细胞L02中miR-125b表达,应用real-time PCR和Western blot分别检测肝癌-癌旁组织中VEGF-A mRNA和蛋白表达。转染miR-125b模拟物(mimic)上调肝癌细胞HepG2中miR-125b表达后,real-time PCR和Western blot检测HepG2细胞中VEGF-A mRNA和蛋白表达。结果:miR-125b 在人肝癌组织中的表达较癌旁组织明显降低(P < 0.05);在肝癌细胞Huh-7-HepG2中的表达较L02明显降低(P < 0.05)。VEGF-A mRNA和蛋白在人肝癌组织中的表达较癌旁组织明显升高(P < 0.05)。miR-125b mimic上调HepG2中miR-125b表达后,转染组VEGF-A mRNA和蛋白表达较空白组和阴性对照组均明显下降(P < 0.05)。结论:miR-125b在肝癌中表达明显下调,而VEGF-A表达上调;低表达的miR-125b丧失对VEGF-A表达的抑制作用可能是肝癌发生的重要机制。

摘要:目的:检测大肠癌及大肠腺瘤组织中miR-451及巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的表达水平,并分析其与大肠癌相关临床病理因素的关系。方法:收集25对大肠癌组织和大肠癌旁组织,10例大肠腺瘤组织,应用RT-PCR方法检测miR-451的表达水平(以U6为对照),应用免疫组化检测MIF蛋白的表达情况,并分析二者与大肠癌相关临床病理因素的关系。结果:miR-451在大肠癌及大肠腺瘤组织中明显下调(P < 0.01,P < 0.05)。其中在大肠癌组织中上调6例,下调19例,下调比率76%(19/25)。在大肠腺瘤组织中上调3例,下调7例,下调比率70%(7/10)。MIF蛋白在大肠癌组织中阳性表达18例,阳性率72%,在大肠腺瘤组织中阳性表达5例,阳性率50%;癌旁组织阳性表达8例,阳性率32%,差异有统计学意义(P < 0.05),并且miR-451与MIF表达水平与大肠癌的分化相关(P < 0.05),与年龄-性别-Dukes分期-组织类型-浸润深度-淋巴结转移等无明显相关。结论:miR-451在大肠癌组织及大肠腺瘤组织中低表达,可能通过抑制MIF负向调控了大肠癌的发生和发展。

摘要:目的:研究非小细胞肺癌微转移与微血管密度的特点,分析肿瘤的脉管内侵犯与微转移-微血管密度之间的关系。方法:采用免疫组化染色方法应用CD34单抗检测47例肿瘤组织的脉管内侵犯及微血管密度;采用RT-PCR技术检测47例患者外周血中CK19 mRNA的表达。结果:47例患者中18例有脉管内侵犯,其平均微血管密度为29.3 ± 3.3,高于非脉管内侵犯的平均微血管密度25.2 ± 4.7(P < 0.05);18例有脉管内侵犯病例中,有13例CK19 mRNA 阳性,5例阴性,29例无脉管内侵犯病例中,9例CK19 mRNA 阳性,20例阴性,具有显著差异性(P < 0.05)。脉管内侵犯与年龄-肿瘤大小-分化程度无关(P > 0.05),而与肿瘤的胸膜浸润-淋巴结转移及远处转移密切相关(P < 0.05)。结论:非小细胞肺癌的脉管内侵犯与微转移-微血管密度之间的关系密切,是评估肿瘤生物学行为的重要临床病理特征。

摘要:目的:检测鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)在人胃癌组织中的表达,并探讨其临床意义及其影响胃癌发生-发展的可能分子机制。方法:收集66例手术切除的胃癌组织和相对应的癌旁非肿瘤组织标本,采用免疫组织化学法检测标本中COUP-TFⅡ和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达,分析COUP-TFⅡ与患者临床病理特征及预后之间的关系,以及COUP-TFⅡ与其潜在靶基因MMP-2的相关性。结果:COUP-TFⅡ蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为65.2%(43/66)和19.7%(13/66),两者比较差异有统计学意义(P < 0.05)。COUP-TFⅡ蛋白的表达与胃癌的浸润深度-分化程度-淋巴结转移及TNM分期密切相关(P < 0.05),而与患者的性别-年龄-肿瘤大小无关(P > 0.05)。COUP-TFⅡ蛋白阳性表达的患者术后平均生存时间比阴性表达者短,分别为(26.8 ± 2.6)个月和(36.4 ± 3.0)个月(χ2 = 4.118,P = 0.042)。MMP-2蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为78.8%(52/66)和34.8%(23/66),两者比较差异有统计学意义(P < 0.05)。COUP-TFⅡ 与MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r = 0.310,P = 0.011)。结论:COUP-TFⅡ蛋白与胃癌的发生-发展-侵袭-转移以及不良预后密切相关,推测可能是通过调控MMP-2的表达而发挥作用。

摘要:目的:研究植物性功能食品原料(当归-甘草-布渣叶)是否具有类雄激素效应,并初步探讨其机制。方法:采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt(MTS)法检测植物性功能食品原料提取物对雄激素受体阳性前列腺癌细胞22RV1增殖的影响;采用real-time PCR法检测提取物对雄激素受体转录活性的影响。结果:布渣叶提取物与对照组相比,能够促进22RV1细胞的增殖,并且能够诱导雄激素受体靶基因PSA的表达,当加入雄激素受体抑制剂后,细胞活性和PSA水平均明显下降,当归和甘草提取物与对照相比并没有明显改变;ERK1/2的抑制剂U0126也可抑制布渣叶提取物介导的细胞增殖和PSA的表达。结论:在当归-甘草-布渣叶3种植物提取物中,布渣叶具有雄激素效应,并且这种效应依赖雄激素受体途径;ERK1/2信号通路参与了布渣叶提取物介导的雄激素效应。

摘要:目的:研究母源性肿瘤抑制印迹基因ARHI对人卵巢癌SKOV3细胞株的作用。方法: 将pIRES2-EGFP-ARHI质粒转染至ARHI基因低表达的人卵巢癌SKOV3细胞内实现ARHI基因表达,CCK-8法检测pIRES2-EGFP-ARHI-SKOV3细胞组(实验组)-pIRES2-EGFP-SKOV3细胞组(质粒对照组)及SKOV3细胞组(阴性对照组)的吸光度值,计算细胞生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期分布并检测细胞凋亡率,并用Western blot检测微管相关蛋白轻链Ⅱ(LC3-Ⅱ)的表达水平变化。结果:实验组细胞培养24-48-72-96及120 h的生长抑制率分别为64.69%-70.17%-67.01%-66.87%-67.70%,均明显高于质粒对照组(P﹤0.01)。培养48 h时实验组-质粒对照组-阴性对照组S期细胞的比例分别为64.18%-38.43%及15.15%,凋亡率分别为47.97%-26.53%及9.33%;培养72 h时S期细胞的比例分别为43.29%-10.37%及10.89%,凋亡率分别为51.34%-24.70%及4.39%;实验组细胞培养48 h时LC3-Ⅱ表达水平增加,与对照组间有明显差异。结论:ARHI基因抑制SKOV3细胞生长,使SKOV3细胞阻滞于S期,并诱导凋亡及自体吞噬。

摘要:目的:研究miR-342-3p在乳腺癌中的表达及与临床病理联系。方法:收集2008年1月~2012年8月乳腺癌手术患者组织标本共85例,使用实时荧光定量PCR检测miR-342-3p在乳腺癌组织中的表达情况,应用免疫组化的方法检测乳腺癌组织中雌激素受体(ER)-孕激素受体(PR)-Her-2及P53的表达。结果:miRNA-342-3p在Lumina型乳腺癌组织中高表达,在Her-2高表达型乳腺癌次之,在三阴性乳腺癌组织中表达最低,差异有统计学意义(P < 0.05);miRNA-342-3p的表达与不同ER-Her-2及P53的表达相关,差异有统计学意义(P < 0.05),在不同PR状态-不同年龄组-有无淋巴结转移及与肿瘤大小-组织分级和病理分期间,差异无统计学意义(P > 0.05),癌与癌旁组织间无显著性差异(P > 0.05)。结论:miR-342-3p在不同乳腺癌分子亚型中表达存在差异,可能成为乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌治疗的新靶点。

摘要:目的:探讨胸段食管鳞癌淋巴结转移的相关影响因素。方法:筛选本院2009年1~8月行胸段食管癌根治术病例335例进行统计分析并随访术后3年内淋巴结复发的情况。结果:统计分析显示,分化程度-浸润深度-肿瘤长度对食管癌淋巴结转移的影响有统计学意义(P < 0.05);食管癌发生隆突下区域淋巴结转移的比例为9.25%,随访复发比例为14.63%;随访3年淋巴结病理阳性与阴性发生淋巴结复发的比例分别为65.96%-43.98%,卡方检验χ2=13.06,P < 0.05,差异有统计学意义。结论:肿瘤的分化程度越差-浸润深度越深-长度越长,淋巴结越容易发生转移;隆突下为食管癌淋巴结转移的好发区域;淋巴结转移的患者更容易出现淋巴结复发。

摘要:目的:研究抗肿瘤药发生药物不良反应(adverse drug reaction,ADR)的人群分布-ADR级别-用药途径及严重ADR报告,以提示相应人群提高健康意识,注意防癌和尽可能减少严重不良反应发生。方法:从全国药品不良反应监测网数据库下载南京大学医学院附属鼓楼医院2011年ADR报告,运用Excel软件统计分析ADR年龄-性别-药品种类-用药途径-ADR级别等。结果:抗肿瘤药ADR 422例次位居第一;不良反应中50~59岁人群357例明显高于其他年龄,其中男性163例,女性194例,又以肿瘤病例151例最多,其中男90例,女61例;发生ADR级别严重-新的严重居多为349例(82.70%);用药途径以静脉滴注[385例(91.23%)]为主;严重不良反应以奥沙利铂(50例)居首。结论:2011年抗肿瘤药ADR比例大幅上升,人群以50~59岁且男性居多,所以此人群要特别注意防癌及合理用药,尽可能减少严重不良反应发生。

摘要:目的:分析胃癌术前辅助治疗后原发病灶病理学完全缓解(pathological complete response,pCR)患者的临床特征并讨论原发灶pCR病例的后续治疗方法。方法:筛选江苏省中医院2006~2012 年接受术前辅助治疗的胃癌病例中原发病灶pCR 的16例临床资料,分析其临床特征,结合目前已有的临床试验结果讨论其个体化治疗策略。结果:16例治疗前原发灶肿瘤临床分期均为T2以上,采用表阿霉素 + 顺铂 + 氟尿嘧啶(ECF方案)。2例术后病理提示有淋巴结转移,8例术后未行辅助治疗。所有患者至今均无病生存,提示预后好。结论:术前辅助治疗能改善胃癌总体生存率,但现有胃癌术前辅助治疗方案的病理缓解率较低,有待改良,pCR病例的临床预后良好,其后续治疗方法有待进一步研究。

摘要:目的:分析不同方式宫颈癌根治术的临床资料,探讨改进传统宫颈癌根治术的可行性。方法:收集北京大学深圳医院2007年1月~2012年6月施行宫颈癌根治术(广泛子宫切除加盆腔淋巴结切除术)的宫颈癌患者269 例,并对其临床资料进行回顾性分析。结果:普通开腹组与腹腔镜组比较,术中出血少,术后肠道功能恢复快,平均住院时间短,差异有统计学意义;普通开腹组与保留神经组比较,术后肠道及膀胱功能恢复快,平均住院时间短,主要并发症少,差异有统计学意义(P < 0.05),并发症减少主要是术后尿潴留减少。术前栓塞化疗组76.1%患者经过子宫动脉或髂内动脉栓塞化疗后病灶缩小。结论:腹腔镜宫颈癌根治术和保留盆腔自主神经宫颈癌根治术是安全可行的,可以作为子宫颈癌手术治疗的选择方式之一,但是远期效果仍需观察;术前子宫动脉或髂内动脉栓塞化疗可降低临床分期,为手术创造机会。

摘要:目的:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,筛选针对狂犬病病毒G蛋白不同表位的单链抗体(scFv)并鉴定其中和活性。方法:分离130例经狂犬病疫苗免疫接种志愿者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录制备cDNA,构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库。以纯化的狂犬病病毒G蛋白包板筛选,对阳性克隆进行可溶性表达,并鉴定中和活性。结果:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,库容为5.0 × 107,经核酸序列分析,证实插入片段为scFv。经过5轮筛选,从富集的次级抗体库中随机挑出140个克隆,通过phage-ELISA鉴定得到4株核酸序列不同的scFv抗体。经His-Trap纯化后进行中和活性鉴定,获得1株有中和活性的scFv,其中和效价为0.13 IU/mg。结论:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,获得1株具有中和活性的抗狂犬病病毒G蛋白scFv抗体,为进一步研发狂犬病治疗性抗体药物奠定了基础。

摘要:目的:观察细胞因子白细胞介素-10(IL-10)预处理对阿尔茨海默病(Alzheimer’disease,AD)模型鼠行为学和分子生化改变的保护作用,并探讨其机制。方法:SD大鼠海马微量注射冈田酸(okadaic acid,OA)及 IL-10建立AD 模型。用水迷宫检测大鼠逃避潜伏期;用Western blot方法检测海马匀浆中蛋白磷酸酯酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)和淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP )的表达量;用流式细胞术检测肠系膜淋巴细胞中的CD4+细胞数与CD8+细胞数的比值。结果:大鼠海马注射OA后,动物的水迷宫逃避潜伏期时间增加,且高浓度OA组水迷宫逃避潜伏期时间均长于低浓度OA组;海马内PP2A蛋白的表达下调,且随着OA浓度的加大,对PP2A蛋白表达的抑制作用加强,APP蛋白的表达增强,且随着OA浓度的加大,对APP蛋白表达的增强作用更明显。IL-10与OA注射入大鼠海马后,动物的水迷宫逃避潜伏期时间明显少于仅注射OA的AD模型动物;IL-10能够逆转OA引起的PP2A蛋白表达减少,对抗OA引起的APP蛋白表达增加;IL-10可使OA诱导的CD4+/CD8+增加翻转到对照水平。结论:大鼠海马多次微量注射OA可诱导大鼠产生AD样病变,即可诱导AD模型,IL-10可以抑制OA诱导的大鼠产生AD样病变,IL-10的这种作用与它抑制炎症反应有关。

摘要:目的:观察小檗碱对高脂饮食诱导的小鼠慢性肾脏损伤的影响及肾脏内巨噬细胞的变化。方法:将30只6周龄C57BL/6小鼠随机分为正常对照组-高脂饮食组-小檗碱治疗组,每组10只,检测总胆固醇-甘油三酯-血肌酐-尿素氮-胱抑素C(Cys C)-24 h尿量和尿白蛋白,HE染色观察肾脏形态病理学变化。Western blot检测白细胞介素(IL)-1β和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平。免疫荧光染色检测巨噬细胞标记物F4/80的表达变化。免疫组化染色观察M1型巨噬细胞标记物iNOS的表达情况。结果:高脂饮食组小鼠血脂-Cys C-24 h尿量和尿白蛋白水平显著升高(P < 0.05);IL-1β-F4/80和iNOS在肾脏表达显著增高(P < 0.05)。小檗碱治疗组小鼠血脂-Cys C-24 h尿量和尿白蛋白水平有所降低;IL-1β-F4/80和iNOS的表达均较高脂饮食组减少(P < 0.05)。 结论:小檗碱可以减轻高脂饮食诱导的小鼠慢性肾脏损伤,这种保护作用是通过减少肾脏组织浸润的巨噬细胞,尤其是减少M1型巨噬细胞的浸润而发挥的。

摘要:目的:观察细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)反复刺激人单核细胞株THP-1细胞,诱导产生的内毒素耐受对该细胞分泌炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和抗炎因子白细胞介素(interleukin,IL)-10的影响。方法:采用1 μg/ml牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)LPS或1 μg/ml大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS刺激THP-1细胞24 h,洗脱后,分别采用相同LPS再刺激24 h,构建内毒素耐受模型。采用ELISA技术检测细胞条件培养液中TNF-α和IL-10分泌水平的变化。结果:P.gingivalis LPS或E.coli LPS刺激THP-1细胞24 h后,TNF-α和IL-10分泌水平均较刺激前明显增高(P < 0.05)。2种LPS重复刺激后,TNF-α分泌水平较第1次刺激后明显降低(P < 0.05),IL-10分泌水平则较第1次刺激后明显增高(P < 0.05)。结论:内毒素耐受能抑制THP-1细胞分泌TNF-α,促进该细胞分泌IL-10,进而可能影响牙周组织的炎症和免疫反应。

摘要:目的:探讨丙烯酰胺(AA)对人SH-SY5Y神经细胞凋亡和miR-21表达的影响。方法:不同浓度丙烯酰胺作用于人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定丙烯酰胺对SH-SY5Y细胞活力的影响,Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡,real-time PCR检测miR-21表达水平,Western blot检测PTEN-p-AKT-AKT-Bcl-2-Bax-caspase 9 和caspase 3蛋白表达。结果:丙烯酰胺剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞活性,Hoechst 33258染色显示明显细胞凋亡形态变化;丙烯酰胺显著降低SH-SY5Y细胞miR-21的表达,同时升高PTEN-Bax-caspase 9-caspase 3水平并降低p-AKT和Bcl-2表达。结论:丙烯酰胺可通过线粒体途径诱导SH-SY5Y神经细胞凋亡,其机制可能与丙烯酰胺引起miR-21表达下调有关。

摘要:目的:探讨5-羟色胺-7(5-hydroxytryptamine-7,5-HT7)受体对内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)中锥体神经元电活动的影响。方法:以大鼠为研究对象,采用在体细胞外生物电记录的方法,观察mPFC锥体神经元电活动的变化。结果:静脉给予累积剂量的(40~640 μg/kg)5-HT7受体激动剂AS19后,对大鼠mPFC中锥体神经元的电活动产生兴奋-抑制和不变3种不同的影响。无论是体循环,还是mPFC局部微量注射AS19(0.08 μg/100 nl),锥体神经元的总体反应都是兴奋的,而体循环给予AS19所引起的抑制效应能够被γ-氨基丁酸A型受体拮抗剂picrotoxinin(2 mg/kg)反转。静脉给予picrotoxinin能兴奋所有记录到的锥体神经元;静脉注射picrotoxinin后,再局部给予AS19能够进一步增加所记录到的神经元的放电频率。结论:mPFC锥体神经元的活动直接或间接地受到5-HT7受体的调控。

摘要:目的:探讨维生素D受体(VDR)基因BsmⅠ位点多态性与北方汉族成人慢性肾功能不全骨密度的关系,探讨影响骨密度的遗传易感因素。方法:选取211名河北联合大学附属医院连续收治的汉族成人(年龄≥18岁)慢性肾功能不全患者并根据血肌酐(Scr)水平分为肾功能不全组和肾功能衰竭组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法检测VDR基因BsmⅠ多态性位点,对慢性肾功能不全相关的因素进行问卷调查,同时检测入院24 h内肝肾功能-血钾-钠-氯-钙-磷-甲状腺功能-血甲状旁腺激素水平,及腰椎L2~4-颈椎-Wards三角部位骨密度。用Pearson相关分析进行年龄及体质指数(BMI)与骨密度关系的研究,用协方差分析的方法比较年龄-BMI校正后各部位骨密度与VDR基因型之间的关系。结果:肾功能不全组和肾功能衰竭组VDR基因BsmⅠ多态性分布无统计学意义(χ2 = 0.088,P = 0.591)。年龄-BMI与骨密度的Pearson相关分析发现,年龄与各部位的骨密度呈负相关(P < 0.01),BMI与骨密度值呈正相关(P < 0.01)。采用协方差分析对年龄与BMI进行校正后,对不同部位的骨密度值与VDR基因型相关性进行分析,发现VDR不同基因型间腰椎的骨密度值差异有统计学意义(P < 0.05),aa基因型具有较低骨密度(P < 0.05)。结论:VDR基因BsmⅠ位点多态性与慢性肾功能不全患者骨密度存在关联,可能是影响骨密度的遗传易感因素。

摘要:目的:探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factorⅠ,IGFⅠ)-胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factor Ⅱ,IGFⅡ)基因多态性与新生儿出生体重的关系,为不同遗传因素的人群提出合理的干预和建议提供理论基础。方法:采用病例对照的研究方法,在南京地区收集小于胎龄儿(small for gestational age,SGA)88例-适于胎龄儿(appropriate for gestational age,AGA)477例和大于胎龄儿(large for gestational age,LGA)265例组成病例对照,采用PCR-RFLP方法检测IGFⅠrs35767-IGFⅡ rs3741205的基因多态性,采用多因素Logistic回归计算SGA-LGA的相对危险度。结果:IGF I rs35767的TT基因型-CT/TT联合基因型均能显著降低SGA的发病风险(P值分别为0.024,0.031),而未发现IGFⅡ rs3741205与SGA的发生有相关性;IGFⅠ rs35767的CT基因型和IGFⅡ rs3741205的TT基因型都能显著增加LGA的发病风险(P值分别是0.045,0.029)。分层分析结果显示IGFⅡ rs3741205的GT/TT基因型在母亲文化程度为大专及以上的情况下,可使LGA的发病风险降低。结论:IGFⅠ rs35767与SGA的发生相关;IGFⅠ rs35767-IGFⅡ rs3741205与LGA的发生相关。

摘要:目的:研究屯堡人成人皮褶厚度值的年龄变化特点以及与中国其他族群之间的差异。方法:采用随机取样方法,在贵州省安顺地区调查了506例(男251例,女255例)乡村屯堡人的6项皮褶(面颊-肱二头肌-肱三头肌-肩胛下-髂前上棘-小腿内侧皮褶)厚度值,分析了屯堡人成人皮褶厚度值随年龄变化的特点。结果:屯堡人男性肩胛下皮褶最厚,肱二头肌皮褶最为菲薄,躯干部的皮下脂肪厚度高于四肢。女性则是肱三头肌皮褶最厚,肱二头肌皮褶最为菲薄。女性6项皮褶厚度值大于男性。男性6项皮褶厚度均与年龄不相关(P > 0.05),女性只有面颊皮褶与年龄呈正相关(P < 0.01)。对男女5个年龄组的6项皮褶厚度值进行方差分析,表明男性只有髂前上嵴皮褶的年龄组间差异具有统计学意义(P < 0.01)。屯堡人6项皮褶厚度值大于中国南方族群。结论:屯堡人皮下脂肪发育与南亚类型族群差距较大,相对接近于其他汉族族群,特别是与汉族(四川)-汉族(江苏)-汉族(安徽)以及布里亚特人接近。

摘要:目的:分析2011年老年科住院患者感染病原菌的分布规律及耐药性,以指导临床合理用药。方法:采用API或Vitek2compact鉴定系统鉴定细菌及真菌;纸片扩散法测定细菌药物敏感性;WHONET5.6软件进行统计分析。结果:老年科住院患者感染病原菌临床分离共993株,其中革兰阴性菌657株(66.2%),革兰阳性菌124株(12.5%),真菌119株(12.0%),其中检出率最高的病原菌是铜绿假单胞菌,共254株,占25.6%,其次是不动杆菌属(19.0%)和克雷伯菌属(12.7%)。耐药性分析结果显示:非发酵菌中,铜绿假单胞菌对大部分抗菌药的耐药率> 60.0%;不动杆菌属对大部分抗菌药的耐药率> 70.0%,其中对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为88.7%和91.1%;大肠埃希菌对头孢菌素类抗菌药的耐药率> 75.0%,对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为0.0%和1.5%;克雷伯菌属对头孢菌素类抗菌药的耐药率在80.0%左右,对亚胺培南和美罗培南耐药率高达35.2%和42.3%;葡萄球菌属尚未发现对万古霉素耐药的菌株,但对其他多种抗菌药的耐药率较高,如对青霉素G-哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁的耐药率均> 65.0%。结论:2011年老年科感染病原菌分布已发生变迁,各种细菌对多种抗菌药的耐药率不断上升,尤其不动杆菌和肠杆菌科细菌对碳青酶烯类药物耐药严重,应引起高度重视。

摘要:目的:了解常州市第一人民医院呼吸科住院患者中下呼吸道感染者肺炎克雷伯杆菌的耐药性情况。方法:收集2009年1月~2012年12月住院患者中下呼吸道感染者行痰培养且结果显示为肺炎克雷伯杆菌266株,采用琼脂稀释法进行药敏试验,依据标准进行结果判读。结果:本组患者中,肺炎克雷伯杆菌占较高比例;肺炎克雷伯杆菌对碳青霉烯类抗生素(亚胺培南-美洛培南)总体耐药率仍较低,但已经出现耐药性,耐药率有逐年升高趋势;肺炎克雷伯杆菌对氨基糖苷类药物中的阿米卡星耐药率较低,4年来保持较低且稳定的耐药率,而对庆大霉素耐药率较高,并且耐药率有上升趋势;肺炎克雷伯杆菌对喹诺酮类(左旋氧氟沙星-环丙沙星)保持较高的耐药率,且耐药率总体呈上升趋势;肺炎克雷伯杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率较高,呈上升趋势。结论:本院肺炎克雷伯杆菌感染率较高,耐药率高,并呈现多重耐药;应加强临床使用抗菌药物的管理,做到合理应用抗菌药,预防和减少菌株的耐药性。

摘要:目的:分析小儿急性播散性脑脊髓炎的临床特征-影像学表现及预后。方法:回顾性分析32例急性播散性脑脊髓炎的临床资料-影像学资料及随访结果。结果:发病年龄4~12岁,发病季节冬春季最多,首发神经系统表现主要为脑病或运动障碍,临床分型为脑型19例,脑脊髓型9例,脑脊髓神经根神经炎型2例,脊髓型2例,均应用甲泼尼龙或地塞米松治疗,12例加用免疫球蛋白治疗,随访3个月~2年,单相病程30例,复发2例,3例遗留运动障碍。结论:小儿急性播散性脑脊髓炎冬春季节多见,脑病或运动障碍为早期主要表现,MRI检查可以早期发现病变,糖皮质激素或加用免疫球蛋白治疗有效,病灶多在1~12个月吸收,大多预后良好。

摘要:目的:探讨超声心动图对主动脉左室隧道(aortic left ventricular tunnel,ALVT)的诊断价值以及超声心动图的表现特征。方法:对8例经超声心动图诊断为ALVT的患者进行回顾性分析,将全部患者的声像图表现与心血管造影-手术结果进行对比,并总结其诊断特点。结果:ALVT图像特征明显,二维超声心动图胸骨旁左室长轴切面上清晰显示主动脉瓣周至左室流出道的无回声管状结构,彩色多普勒血流显像显示收缩期血流信号从左室流出道经异常通道进入主动脉,舒张期血流信号从主动脉经过异常通道进入左室流出道。超声诊断与心血管造影-手术结果基本符合。结论:超声心动图诊断ALVT有效-快捷-无创, 对其病理解剖和血流动力学可作出明确诊断。应与右冠状窦瘤破裂-冠状动脉瘘及主动脉瓣关闭不全等相鉴别。

摘要:目的:通过绘制质控图,加强对治疗药物监测的质量控制。方法:采用均相酶放大免疫法监测丙戊酸的血药浓度,并对质控结果进行回顾性分析。结果:质控是反映监测结果准确程度的重要指标,通过绘制质控图可以对质控的稳定性进行再评价。结论:在质控图的基础上可以发现质控数值的误差,确保监测结果的稳定可靠。

摘要:目的:探讨苏州地区胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)的危险因素及根除幽门螺杆菌(Helicobactor pylori,Hp)对GERD转归的影响。方法:分别选取2008年10月~2012年6月于江苏盛泽医院经胃镜及病理检查确诊为GERD的患者109例-慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis, CSG)患者112例。对其年龄-性别-体质指数-Hp感染-内镜-食管癌家族史-吸烟-饮酒等资料进行了分析,以了解GERD的危险因素。并通过随机对照方法研究根除Hp对GERD转归的影响。结果:GERD的危险因素包括年龄(t = 6.33,P < 0.01)-性别(χ2=13.68,P < 0.01)-食管癌家族史(χ2 = 21.26,P < 0.01),保护性因素为Hp感染(χ2 = 23.15,P < 0.01)。根除Hp组症状评分改善有效率(93.75%)与未根除Hp组(62.5%)及CSG组(66.23%)比较差异均有统计学意义(χ2 = 4.57-4.87,P < 0.05)。结论:GERD的危险因素包括年龄-性别及食管癌家族史。根除Hp有利于GERD临床症状的改善。

摘要:目的:比较前交叉韧带重建术后行开链与闭链运动的康复效果,并为前交叉韧带重建术后康复方案的选择提供依据。 方法:从2010年1月~2012年6月符合纳入标准的接受自体肌腱单束解剖重建前交叉韧带手术的患者97例,通过随机数字表将其分为两组,分别采用开链运动康复方案(45例)和闭链运动康复方案(52例)。两组术前Lysholm膝关节评分-IKDC评分及KT-1000值均无明显差异。比较术后3-6-12个月时两组患者的Lysholm膝关节评分-IKDC评分-KT-1000值及主动-被动关节活动度的差值。结果:术后3个月开链运动组与闭链运动组Lysholm膝关节评分-IKDC评分和被动关节活动度差值的差异无统计学意义,而主动关节活动度差值-KT-1000值有明显差异;术后6个月两组Lysholm膝关节评分-IKDC评分和主-被动关节活动度差值的差异无统计学意义,KT-1000值有明显差异。术后12个月两组Lysholm膝关节评分-IKDC评分-KT-1000值和主动-被动关节活动度差值的差异均无统计学意义。结论:前交叉韧带重建术后行开链运动与闭链运动康复训练,膝关节的肌力及活动度最终均能恢复到较为满意的结果,且无明显差异,但闭链运动较开链运动恢复得更早。康复早期,闭链运动更有利于保护重建韧带,防止术后再损伤。

摘要:目的:探讨血管肌纤维母细胞瘤(angiomyfibroblastoma,AMF)的临床病理特征-诊断及鉴别诊断。方法:通过对3例AMF病理形态和免疫组化观察,结合文献复习,总结AMF的病理诊断及鉴别诊断。结果:肿瘤境界清楚,瘤细胞梭形或卵圆形,常围绕血管排列,呈疏密交替分布特征。免疫表型:瘤细胞Vimentin,SMA-ER和PR检测均阳性,CD34-Desmin-MSA-S-100蛋白和CK均阴性。结论:AMF是一种少见的好发于生育期女性外阴的良性软组织肿瘤,需与侵袭性血管黏液瘤-富细胞性血管纤维瘤等相鉴别。

摘要:目的:建立一种较优的高通量测序H7N9禽流感病毒基因组模板制备方法,用于H7N9禽流感病毒基因组监测。方法:分别以6碱基随机引物反转录生成单链cDNA,合成双链cDNA;流感病毒通用反转录引物U12反转录生成单链cDNA,6碱基随机引物合成双链cDNA;U12引物反转录生成单链cDNA,通用流感病毒全基因扩增引物混合物生成双链cDNA制备高通量测序模板-构建测序文库-测序并分析数据,比较3种方法对高通量测序效率的影响,并与传统Sanger测序方法比较其测序的准确性,选择其中较优的方法用于高通量测序。结果:以U12引物反转录cDNA,通用流感病毒全基因扩增引物混合物生成双链cDNA制备的高通量测序模板,在测序族生成数-覆盖率-单核苷酸多态性及读长等方面均优于另外两种方法。结论:本研究建立的H7N9禽流感病毒基因组模板制备方法用于高通量测序具有准确性高,周期短,成本相对较低,可同时检测多个样本等特点,可用于大规模H7N9禽流感病毒基因组监测。

摘要:目的:对多项选择敏感问题随机应答技术结合整群抽样的调查方法和公式进行效度和信度评价。方法:通过蒙特卡罗模拟,用西昌市女性性工作者敏感问题调查结果作为模拟总体的参数,以模拟直接真实应答值作为相对准则,分别对100对样本作两组构成分布比较的卡方检验,进行信度和效度评价。结果:100个卡方检验的P值中有99个大于0.05,按α = 0.05水准,100次假设检验的结果中两组构成分布差异无统计学意义的为99次。结论:本项目研究的调查方法和计算公式有较高的信度及效度,可用于今后大规模的敏感问题抽样调查。

摘要:目的:通过分子模拟辅助设计合成对葛根异黄酮具有特异性识别能力的分子印记整体柱,并从理论上探究其特异性分子识别机制。方法:以染料木素为模板,4-乙烯吡啶-丙烯酰胺和甲基丙烯酸为候选功能单体,采用密度泛函(DFT)精确预测和计算染料木素与不同功能单体间的氢键能,从而筛选出最佳功能单体及其与模板分子的比例。根据计算的结果,采用原位聚合法合成葛根异黄酮分子印记整体柱。结果:4-乙烯吡啶与染料木素之间的相互作用最强,为最佳功能单体,且4-乙烯吡啶与染料木素形成的复合物的最佳比例为2∶1;并在此条件下,成功制备出葛根异黄酮分子印记整体柱。结论:实验结果表明分子模拟辅助设计对葛根异黄酮分子印记整体柱的制备具有理论指导意义,并可推广应用到其他非共价印记体系。

摘要:目的:考察薄膜分散及冻融冻干法制备H1N1单价流感疫苗脂质体呼吸道免疫效果,为减毒活疫苗脂质体的制备奠定基础。方法:将实验小鼠分为4个实验组(脂质体疫苗干粉肺部免疫组-腹腔免疫组,非脂质体疫苗原液肺部免疫组-腹腔免疫组),和1个阴性对照组。实验组以每只4 -滋g和6 -滋g血凝素含量(H1N1亚型)肺部免疫或腹腔免疫,以未免疫小鼠(PBS给药)为阴性对照。免疫7-14-28 d,血凝抑制试验(HI)检测免疫后小鼠血清抗HA抗体水平,ELISA检测血清中细胞因子含量。结果:两种方法制备的脂质体组6 -滋g剂量肺部免疫抗体滴度高于4 -滋g剂量肺部免疫(P < 0.05);两种方法制备脂质体肺部免疫抗HA抗体滴度高于非脂质体肺部免疫(P < 0.05)。脂质体组肺部免疫抗HA抗体滴度高于非脂质体组腹腔免疫(P < 0.01);薄膜分散法优于冻融冻干法组;两种方法制备的脂质体肺部免疫产生的白细胞介素(IL)-2与干扰素(IFN)-γ水平高于疫苗原液腹腔免疫,均高于阴性对照组。结论:两种方法制备流感疫苗脂质体肺部给药均能有效诱发体液免疫及细胞免疫,薄膜分散法优于冻融冻干法,均高于疫苗原液组;冻融冻干法肺部免疫14 d即产生免疫应答,而原液腹腔免疫抗体滴度比仅为1.8。冻融冻干法组脂质体肺部免疫产生的细胞因子水平也明显高于疫苗原液腹腔免疫组。说明冻融冻干法在疫苗脂质体制备中具有可行性。

摘要:目的:以丝素蛋白-丹参为主要原料研制一种新型的创伤敷料,评价其作为医用生物材料的安全性。方法:制备丝素蛋白三维材料,载入丹参,制得丝素蛋白-丹参多功能生物敷料,进行组织相容性试验,包括细胞毒性试验-刺激性试验-过敏性试验和遗传毒性试验。结果:制备的丝素蛋白-丹参多功能生物敷料的细胞毒性试验-刺激性试验-过敏性试验和遗传毒性试验结果呈阴性。结论:丝素蛋白-丹参多功能生物敷料具有良好的生物相容性,无不良反应,是可以安全使用的医用生物材料。