摘要:目的:构建含活性缺陷型小鼠端粒酶催化亚基(去除氨基酸702~712的mTERT,命名为mTERTΔ)基因的慢病毒载体,检测其表达和功能-方法:从先前构建的表达mTERT全长的pDC315-EGFP-mTERT质粒中,通过缺失突变PCR扩增小鼠mTERTΔ基因,构建真核表达载体GV287-EGFP/mTERTΔ-鉴定正确后将目的基因克隆入慢病毒载体pGC-LV,得重组载体pGC-LV/mTERTΔ-EGFP,采用Lipofectamine2000将其转染293T细胞,包装慢病毒颗粒LV-mTERTΔ-EGFP后感染神经干细胞和原代神经元,TRAP-PCR方法检测端粒酶活性,荧光显微镜观察目的片段表达和细胞增殖情况-结果:成功构建TERTΔ基因片段,测序证明重组慢病毒载体pGC-LV/mTERTΔ-EGFP构建成功-包装慢病毒颗粒LV-mTERTΔ-EGFP可以感染神经干细胞和神经元,端粒酶活性测试证明目的蛋白的端粒酶催化活性缺陷,抑制神经干细胞增殖,抑制内源性mTERT功能-结论:慢病毒载体LV-mTERT-EGFP构建成功,可以表达无活性mTERT片段-

摘要:目的:观察NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体是否参与单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)诱导的病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)的病理过程-方法:培养乳鼠心室肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVM),分别以0.01 PFU和0.1 PFU HSV-1感染NRVM,24 h后通过光学显微镜观察细胞形态学改变,实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)测定NLRP3炎症小体及其下游通路的mRNA表达水平,免疫荧光(immunofluorescence,IF)显示半胱天冬酶(cysteinyl aspartate-specific proteases,Caspase)-1的表达,全自动生化仪测定细胞上清肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase-MB,CK-MB)的含量以及酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞上清白细胞介素(interleukin,IL)-18的浓度-结果:HSV-1感染心肌细胞模型组出现细胞病变现象(cytopathic effect,CPE),培养细胞上清细胞损伤标志物CK-MB明显增高(P < 0.05),qRT-PCR测定模型组NLRP3-Caspase-1-IL-1β和IL-18 mRNA相对表达量较对照组高5倍以上,IF显示Caspase-1在HSV-1干预后的NRVM胞质内表达明显增高,培养细胞上清IL-18浓度较对照组增高(P < 0.05)-结论:NLRP3炎症小体及下游通路在HSV-1诱导的VMC细胞模型中被激活,参与其病理过程,为治疗病毒性心肌炎提供可能的新靶点-

摘要:目的:研究树突状细胞负载EB病毒潜伏膜蛋白(latent membrane proteins,LMPs)介导生成的LMPs特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)LMPs-CTL的生物学特性,观察其对LMPs阳性鼻咽癌细胞SUNE的杀伤作用-方法:用淋巴细胞分离液分离人外周血单核细胞,采用贴壁分离及白细胞介素(interleukin,IL)-4-粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)等细胞因子诱导成熟树突状细胞(dendritic cell,DC),通过DC细胞负载LMPs多肽抗原并递呈给同源T淋巴细胞,制备LMPs-CTL-CCK8法检测LMPs-CTL对SUNE细胞的杀伤作用;ELISA和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(carboxy fluoroscein succinimidyl ester,CFSE)染色法检测LMPs-CTL分泌IFN-γ及其增殖-结果:LMPs-CTL对SUNE细胞的杀伤率在12 h和24 h分别为(43.47 ± 1.93) %和(77.15 ± 3.18) %,显著高于对照组的(11.45 ± 3.06) % 和(24.27 ± 13.20)%(P < 0.05)-SUNE细胞刺激后,LMPs-CTL增殖能力较对照组有明显增强,IFN-γ分泌量达到(613.40 ± 121.77) pg/ml,显著高于对照组(86.90 ± 3.70) pg/ml(P < 0.05)-结论:通过DC细胞负载LMPs混合多肽可诱导生成LMPs-CTL,对LMPs阳性鼻咽癌细胞有较强的杀伤作用-

摘要:目的:研究miR-342-3p对乳腺癌化疗敏感性的影响-方法:检测乳腺癌细胞株MCF-7-SKBr3和MDA-MB-231中miR-342-3p的表达-应用脂质体转染方法,转染hsa-miR-342-3p模拟物到低表达miR-342-3p的乳腺癌细胞株(mimic转染组),同时设立阴性对照(mim-NC转染组);转染miR-342-3p抑制物到高表达miR-342-3p的乳腺癌细胞株(inhibitor转染组),同时设立阴性对照(inhi-NC转染组)-mimic转染组-mim-NC转染组-inhibitor转染组和inhi-NC转染组细胞,分别加入浓度为2 -滋mol/L的紫杉醇-顺铂及4 -滋mol/L的阿霉素的进行培养,应用CCK8法检测药物作用48 h后细胞增殖率的变化-结果:以SKBr3为参照,miR-243-3p在MCF-7细胞中的相对表达倍数是126.000,在MDA-MB-231细胞中的相对表达倍数是0.017-mimic转染组细胞与紫杉醇-顺铂孵育48 h后,肿瘤细胞增殖率低于mim-NC转染组,差异有统计学意义(P < 0.05),但与阿霉素孵育后细胞增殖率与mim-NC转染组差异无统计学意义(P > 0.05);inhibitor转染组细胞与紫杉醇-顺铂和阿霉素孵育48 h后,肿瘤细胞的增殖率高于inhi-NC转染组,差异有统计学意义(P < 0.05)-结论:miR-342-3p能调控乳腺癌细胞株MDA-MB-231-MCF-7对紫杉醇和顺铂的化疗敏感性,但提高miR-342-3p表达不能增加MDA-MB-231细胞对阿霉素的化疗敏感性,降低miR-342-3p的表达却可以减弱MCF-7细胞对阿霉素的化疗敏感性-

摘要:目的:研究鱼藤素对小细胞肺癌体外抗肿瘤效果-方法:0-5-10-20-50 μmol/L鱼藤素作用于NCI-H446细胞24 h,细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)分析鱼藤素对细胞活力的影响-据CCK8结果,以0-5-10-20 μmol/L鱼藤素作用于NCI-H446细胞,EdU掺入法检测细胞增殖,DAPI染色及流式细胞术测定细胞凋亡-据流式结果,20 μmol/L鱼藤素作用NCI-H446细胞0-0.5-2.0-4.0 h,蛋白质印迹法检测细胞内凋亡相关蛋白的表达-结果:鱼藤素呈剂量依赖性地抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖-诱导其凋亡,作用不同时间后可上调促凋亡蛋白Bax-下调抗凋亡蛋白Bcl-2水平-结论:鱼藤素体外抗小细胞肺癌效应可能通过上调促凋亡蛋白Bax-下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,诱导细胞凋亡实现-

摘要:目的:探讨孕鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致新生鼠肺损伤模型的构建方法-方法: 孕18 d SD大鼠随机分为生理盐水对照组(control组)和LPS组,观察腹腔注射不同剂量LPS(2.5-2.0-1.5-1.0-0.5 mg/kg)与等量灭菌生理盐水后的孕鼠反应并统计孕鼠死亡率及流产率,依上述实验结果选定较低死亡率的LPS剂量-分别予孕鼠腹腔注射LPS(0.9-0.8-0.7-0.6-0.5 mg/kg)及等量灭菌生理盐水后记录各组新生鼠肺的病理评分-湿/干重比值(W/D)及肺组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α mRNA-白细胞介素(interleukin,IL)-1β mRNA和TNF-α蛋白的表达量-进一步研究LPS 0.7 mg/kg组中孕19 d胎盘-胎肺及新生鼠生后第1-4-7 d肺组织中炎症因子(TNF-α-IL-1β)mRNA表达量变化与组织病理改变-结果:①LPS组中随着药物剂量递减,孕鼠死亡率及流产率逐渐降低,当LPS剂量小于1.0 mg/kg时孕鼠死亡率及流产率降低至25%以下;②LPS 0.5~1.0 mg/kg时,与对照组比较,LPS< 0.7 mg/kg时新生鼠肺病理评分-W/D-组织TNF-α及IL-1β mRNA表达差异无统计学意义(P均> 0.05),LPS≥0.7 mg/kg时上述指标均显著升高,且差异有统计学意义(P均< 0.05);③孕鼠腹腔注射LPS 0.7 mg/kg时,胎盘-胎肺炎症因子较对照组显著升高,且LPS组新生鼠生后第1-4-7天肺组织中TNF-α-IL-1β mRNA表达水平均显著高于对照组(P均< 0.05)-结论: SD大鼠孕18 d腹腔注射0.7 mg/kg LPS可导致新生鼠肺病理损害-肺水肿,炎症因子TNF-α-IL-1β增高,并延续到生后7 d,是制备宫内感染新生鼠肺损伤模型稳定-可靠的方法-

摘要:目的:制备抗炭疽保护性抗原15(protective antigen,PA15)单克隆抗体,初步建立双抗体夹心ELISA检测炭疽感染者血清中的保护性抗原-方法:以纯化的PA63蛋白为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,间接ELISA-Western blot-免疫沉淀(IP)和蛋白质谱分析单抗特异性,并建立双抗体夹心ELISA检测方法-结果:制备了2株抗PA15单克隆抗体,命名为3D7和8E9-SDS-PAGE电泳可见抗体的重链和轻链,间接ELISA-Western blot发现单抗3D7和8E9可与PA15-PA63特异性结合,IP和蛋白质谱分析发现单抗3D7可与PA83特异性结合,双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中保护性抗原的最低检出浓度为16 ng/ml-结论:成功制备了抗PA15单克隆抗体,并建立了双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中的保护性抗原-

摘要:目的:制备适用于炎症性肠病超声诊断并靶向MAdCAM-1的长循环脂膜超声造影剂,并鉴定其物理性状及体外寻靶能力-方法:采用超声破碎法制备长循环脂膜超声微泡,通过“生物素-亲和素”法桥接超声微泡与抗MAdCAM-1单克隆抗体(MECA-367)-对制备出的靶向微泡造影剂进行物理性状检测;通过光镜和激光共聚焦显微镜观察该靶向造影剂对TNF-α诱导的炎症性肠病细胞模型的结合能力-同法制备携同型对照抗体IgG2a微泡作对照-结果:制备的靶向超声微泡形态好且粒径较均匀,平均粒径(464.5 ± 85.7)nm,Zeta电位(-19.3 ± 2.5)mV-SVEC4-10细胞MAdCAM-1的表达与TNF-α刺激时间成正相关-并且,当TNF-α浓度达到20 ng/ml时,MAdCAM-1的表达达到峰值-体外寻靶试验表明,该靶向造影剂较多并牢固地黏附到表达MAdCAM-1的细胞周围;携IgG2a的同型对照组未见明显结合-结论:成功制备出桥连MECA-367的靶向长循环脂膜超声造影剂,该造影剂在体外对高表达MAdCAM-1的炎性细胞模型有较强的特异性亲和力;TNF-α诱导SVEC4-10细胞建立炎症性肠病细胞模型的方法简便易行-

摘要:目的:检测冠心病(coronary heart disease,CHD)患者血清中血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule,VCAM)-1-白细胞介素(interleukin,IL)-8-IL-11-干扰素诱导蛋白(interferon inducible protein,IP)-10-巨噬细胞炎症蛋白 (macrophage inflammatory protein,MIP)-1β-调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)-血管生成素(Angiogenin)7种细胞因子的含量,研究7种细胞因子与疾病严重程度和冠状动脉病变特点之间的关系,探讨其作为新的CHD标记物的可能性-方法:本研究入选216例患者,其中CHD组158例,对照组58例-检测两组血清中7种细胞因子的含量,并进行统计分析-结果:①CHD组与对照组的IL-8-IP-10-MIP-1-茁-RANTES血清水平比较无统计学差异;而CHD组血清VCAM-1-IL-11-Angiogenin水平高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);②单支病变-双支病变和多支病变亚组之间的VCAM-1-IL-11水平没有差异(P > 0.05),而多支病变组的血清Angiogenin水平高于双支病变组和单支病变组(P < 0.05);③Gensini积分为0~20分-21~40分-> 40分的3个亚组之间血清VCAM-1-IL-11水平差异没有统计学意义(P > 0.05);Gensini积分> 40分亚组的血清Angiogenin水平高于21~40分亚组(P < 0.05),21~40分亚组的血清Angiogenin水平高于0~20分亚组(P < 0.05);④血清Angiogenin水平与Gensini积分呈正相关(r = 0.270,P = 0.046),与传统CHD危险因素无相关性(P > 0.05)-结论:VCAM-1-IL-11-Angiogenin 3种细胞因子在CHD患者血清中表达增加,血清Angiogenin水平可以间接反映冠脉狭窄的范围和程度-

摘要:目的:探讨非ST段抬高型急性冠脉综合征(non ST segment elevation acute coronary syndrome,NSTE-ACS)患者血浆高敏C反应蛋白(high sensitivity C reactive protein,hs-CRP)-胱抑素(cystatin C,Cys C)-载脂蛋白A(apolipoprotein A,ApoA)-脂蛋白a[Lipoprotein a,Lp(a)]的水平与全球急性冠状动脉事件注册(the global registry of acute coronary events,GRACE)评分的关系-方法:符合标准的NSTE-ACS患者共155例,分为非ST 段抬高性心肌梗死(non ST segment elevation myocardial infarction,NSTE-AMI)组和不稳定性心绞痛(unstable angina,UA)组,入院后进行GRACE评分,同时第2天清晨空腹采集肘静脉血检测hs-CRP-CysC-ApoA-Lp(a),与87例非冠心病患者进行对照比较-结果:NSTE-ACS患者hs-CRP-CysC-Lp(a)-GRACE评分与对照组比较均显著升高,ApoA显著降低,差异有统计学意义(P < 0.05);随着GRACE危险程度增高,血清hs-CRP-CysC-Lp(a)水平出现显著升高,ApoA显著降低,差异有统计学意义(P < 0.05);相关性分析显示NSTE-ACS患者GRACE评分与hs-CRP-CysC-Lp(a)呈显著正相关关系(r = 0.424,P < 0.01;r = 0.549,P < 0.01;r = 0.134,P < 0.05);与ApoA呈显著负相关关系(r = -0.167,P < 0.01);多元线性回归分析,血清CysC-hs-CRP水平对GRACE评分影响最大-结论:血清hs-CRP-CysC-ApoA-Lp(a)水平与冠心病密切相关,可作为反映冠状动脉粥样硬化程度的较好指标;血清hs-CRP-CysC-ApoA-Lp(a)水平越高,GRACE评分越高,在NSTE-ACS患者中联合运用可能对早期危险分层-预后评估及诊疗方案的选择有重要临床参考价值-

摘要:目的:评价溶栓后时间优化PCI(percutaneous coronary intervention,PCI)对急性心肌梗死(acute myocardial infraction,AMI)患者远期预后的影响-方法:分析对比经溶栓后时间优化PCI或直接PCI(primary percutaneous coronary intervention,PPCI)治疗的132例ST段抬高型心肌梗死(ST elevation myocardial infraction,STEMI)患者的临床资料,包括治疗6个月内主要心脏不良事件(major adverse cardiac event,MACE)-左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和氨基末端脑利钠肽前体(N-terminal pro B-type natriuretic peptide,NT-Pro BNP),比较两种不同PCI策略对患者远期预后的影响-结果:两组患者除PCI术前冠脉造影心肌梗死溶栓(thrombolysis in myocardial infaction,TIMI)积分差异有统计学意义外,PCI治疗6个月后MACE事件发生率-LVEF及NT-Pro BNP水平均无统计学差异-结论:溶栓后时间优化PCI对STEMI患者远期预后的影响与PPCI相当,是无全天候PPCI能力医院抢救急性STEMI患者的一个可靠合适的替代方法-

摘要:目的:分析南京医科大学第二附属医院呼吸科社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)住院患者的临床-病原学和转归特点,以及相关的影响因素-方法:回顾性分析CAP住院患者的临床资料,比较其年龄-吸烟情况-基础疾病-病原学特点-临床用药情况等;并分析易感CAP的危险因素-结果:362例CAP患者平均年龄为(69.3 ± 17.2)岁-位居前5位的基础疾病分别是高血压164例(45.3%)-慢性阻塞性肺疾病151例(41.7%)-心功能不全81例(22.4%)-糖尿病79例(21.8%)-冠心病72例(19.9%)-177 例(48.9%)治愈,168例(46.4%)好转,17例(4.7%)未愈或死亡-362例中312例进行了病原体检测,仅100例查到了病原体,其中前5位的病原体分别是白假丝酵母菌31例,革兰氏阴性菌11例,鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌各8例,铜绿假单胞菌7例-Logistic回归分析显示:高龄(β = 0.180,P = 0.001)-中性粒细胞百分比高(β = 0.127,P = 0.035)-前白蛋白低(β = 0.140,P = 0.024)-合并肺心病(β = 7.851,P = 0.046)-合并脑梗死(β = 4.861,P = 0.029)是CAP转归不良的危险因素-结论:南京医科大学第二附属医院呼吸科CAP患者以老年人为主-患者大量合并各种基础疾病,以高血压-慢性阻塞性肺疾病-糖尿病-心功能不全-冠心病最常见,且年龄越大越容易合并基础疾病-病原体检出阳性率低-高龄-中性粒细胞百分比高-前白蛋白低-合并肺心病-合并脑梗死是转归不良的危险因素-

摘要:目的:检测不同类型重症药疹患者外周血淋巴细胞亚群并研究其临床意义-方法:采用免疫荧光标记流式细胞术检测21例重症药疹患者外周血淋巴细胞的表型-结果:药物超敏反应综合征(drug-induced hypersensitivity syndrome,DIHS)患者治疗前CD3+-CD3+CD4+淋巴细胞较正常值显著增加,并且DIHS患者治疗前CD3+CD4+淋巴细胞显著高于Stevens-Johnson综合征(Stevens-Johnson syndrome,SJS)和中毒性表皮坏死松解症(toxic epidermal necrolysis,TEN)患者;在SJS和TEN患者中,随着外周血CD3+CD4+-CD3+CD8+淋巴细胞数目的增加,激素最大控制用量逐渐减少,随着外周血CD3-CD16+CD56+淋巴细胞数目的增加,激素最大控制用量逐渐增加-结论:不同类型的重症药疹外周血淋巴细胞亚群不同,外周血不同类型淋巴细胞亚群对激素最大控制用量的影响不同-

摘要:目的:探讨术中静脉应用硫酸镁对维库溴铵肌松作用的影响及其安全性-方法:60例择期行腰椎间盘髓核摘除 + 内固定术的患者,随机分为两组,各30例-麻醉诱导插管后,A组静脉滴注40 mg/kg的硫酸镁,B组给予同体积的生理盐水-术中通过血浆浓度靶控输注丙泊酚(3.0~3.5 μg/ml)-瑞芬太尼(3.0~4.0 ng/ml),维持脑双频指数(bispectorial index,BIS)为45~55;设定四个成串刺激(train of four,TOF)为0,通过闭环肌松集成靶控注射系统输注维库溴铵-在术前(t1),输注硫酸镁或安慰剂完毕后10 min(t2)-60 min(t3),停用维库溴铵时(t4)4个时间点上,检测血清Mg2+-Ca2+与K+浓度-测量在输注硫酸镁或安慰剂完毕后5 min时的心率和平均动脉压-记录使用维库溴铵的总剂量,停用维库溴铵后TOF恢复达70%的时间T70%-结果:A组血清Mg2+浓度在t2时达到最高(1.33 ± 0.19)mmol/L,随着手术时间的延长逐渐降低(P < 0.05);到t3-t4时,A组血清Mg2+浓度仍较B组高(P < 0.05);两组患者的血清Ca2+-K+浓度,以及心率和平均动脉压均无显著性差异(P均> 0.05)-A组维库溴铵剂量为(3.22 ± 0.57)μg/(kg-min),明显少于B组(3.81 ± 0.58)μg/(kg-min)(P = 0.000 2);A组T70%为(26.3 ± 3.6)min,较B组(28.7 ± 4.3)min减少(P = 0.022 5)- 结论:静脉应用40 mg/kg硫酸镁可增强维库溴铵的肌松作用,减少其用量,缩短肌力恢复时间,对血清Ca2+-K+浓度及血流动力学无显著影响-

摘要:目的:观察锝[99Tc]亚甲基二膦酸盐(technetium methylenediphosphonate,99Tc-MDP)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)继发骨量减少及骨质疏松患者的骨密度(bone mineral density,BMD)和部分骨代谢标志物的影响,并探讨其有效性和安全性-方法:通过测定SLE女性患者腰椎(L1~L4)-两侧股骨颈BMD,从中筛选出30例继发骨量减少及骨质疏松患者,进一步测定Ⅰ型前胶原氨基端伸展肽(aminoterminal propeptide of typeⅠ procollagen,PINP)和Ⅰ型胶原羧基末端肽(typeⅠ collagen carboxyl terminal peptide,CTX)-将30例患者随机分为对照组和治疗组,每组患者均为15例-对照组给予碳酸钙D3片0.6 g-阿法骨化醇胶囊0.25 -滋g每日1次口服,连续6个月-治疗组给予99Tc-MDP 15 mg每日1次静脉滴注,连续15 d,同时联合使用碳酸钙D3片0.6 g-阿法骨化醇胶囊0.25 -滋g每日1次口服,连续6个月-6个月后测定两组患者腰椎(L1~L4)-两侧股骨颈BMD及PINP-CTX等指标,与治疗前相应指标进行对比,同时进行组间对比-结果:治疗6个月后,对照组各部位BMD及PINP-CTX与治疗前比较,差异无统计学意义(P > 0.05)-治疗组各部位BMD较治疗前增加,但差异无统计学意义(P > 0.05);CTX水平较治疗前下降,且差异有统计学意义(P < 0.05);PINP水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P > 0.05)-治疗后治疗组患者腰椎(L1~L4)BMD高于对照组,且差异有统计学意义(P < 0.05);治疗组CTX水平低于对照组,且差异有统计学意义(P < 0.05)-治疗组治疗过程中未出现严重不良事件,患者耐受性好-结论:99Tc-MDP能够降低SLE继发骨量减少及骨质疏松患者的CTX水平,6个月内对BMD提高不明显-其联合碳酸钙D3-阿法骨化醇治疗SLE继发骨量减少及骨质疏松有一定疗效且安全-

摘要:目的:探讨慢性重型乙型肝炎患者经内科治疗及肝移植前后Gc球蛋白的变化以及丙氨酸氨基转移酶(alanine transarninase,ALT)变化的相关性,初步阐明Gc球蛋白在重型乙肝患者中的检测价值-方法:选取兰州大学第一医院2004~2009年慢性重型乙型肝炎肝移植治疗患者14例,慢性重型乙型肝炎内科治疗患者20例,分别于治疗前-后各阶段留取血液标本,另取健康对照者20例-采用ELISA法检测肝功能及Gc球蛋白-结果:慢性重型乙型肝炎内科治疗组血清中Gc球蛋白含量治疗前-治疗后2-4-6-8周分别为(295.74 ± 76.13)-(159.37 ± 41.02)-(109.72 ± 30.48)-(100.19 ± 29.21)-(86.20 ± 28.38)mg/dl,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P < 0.05);慢性重型乙型肝炎肝移植组血清中Gc球蛋白含量术前-术后6-12-18-24个月分别为(4.19 ± 1.17)-(30.89 ± 23.04)-(88.30 ± 52.87)-(200.07 ± 108.32)-(324.17 ± 119.14)mg/dl,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P < 0.05);内科治疗组治疗后ALT呈下降趋势,与治疗前相比差异有统计学意义(P < 0.05),肝移植组手术前后ALT变化不明显-结论:血清GC球蛋白的变化可以预测内科治疗和肝移植后的重型乙型肝炎患者病情演变,可为临床医师选择合理治疗方式提供参考-

摘要:目的:探讨高压氧联合药物治疗突发性聋的效果,并与单用药物治疗进行疗效比较-方法:回顾分析2012~2013年就诊的112例采用高压氧联合药物(高压氧组)治疗突发性聋患者的临床资料,并将同期单纯药物治疗的96例患者作为对照(对照组),分析高压氧对疗效的影响-结果:与对照组相比,高压氧组听力显著改善,有效率达83.0%,对照组有效率为47.9%(P < 0.01);高压氧组耳鸣显著减轻,有效率为76.4%,对照组为51.4%(P < 0.01);在有眩晕的患者中,高压氧组88.2%有效,而对照组仅63.3%有效(P < 0.05)-结论:高压氧联合药物治疗突发性聋的疗效明显优于单纯药物治疗-病程长于14 d-伴有眩晕-既往有听力下降病史及重度聋患者的听力恢复相对较差,及早启用高压氧联合药物治疗是提高突发性聋治愈率的有效方法-

摘要:目的:探讨腹腔镜直视下微波灭活肝癌的临床疗效及安全性-方法:选择2008年8月~2012年12月间位于肝脏表面的原发性肝癌患者38例,在腹腔镜直视下行微波消融治疗-对比手术前后肿瘤病灶的影像学变化和临床检验结果,评价治疗的安全性和治疗效果-通过术后观察和随访,了解近期和远期治疗效果-结果:本组病灶CT复查提示均达到完全灭活,围手术期无死亡和严重并发症,所有病例血清AFP水平均在术后6个月降至正常;3年复发率和3年总生存率分别为47.7%和80.7%;治疗结果与手术切除无明显差异-结论:腹腔镜直视下微波消融治疗肝癌疗效确切,是一种简单安全的治疗方法-

摘要:目的:评估全胸腔镜解剖性肺段切除手术治疗肺部疾病的安全性及可行性-方法:对2010~2013年南京医科大学第一附属医院胸心外科连续开展的103例全胸腔镜解剖性肺段切除手术的临床及随访数据进行分析-总结-结果:男40例,女63例,平均年龄(58.87 ± 12.47)岁(13~83岁),平均手术时间(198.35 ± 48.85)min,术中平均出血(43.74 ± 46.34)ml,术后平均住院时间(8.52 ± 5.61)d,无30 d死亡病例-对于早期非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)患者,平均清扫淋巴结(4.69 ± 1.31)组-(9.89 ± 4.20)个-病理结果显示79例为NSCLC,其中75例为ⅠA期肺癌(72.81%)-3例为ⅠB期肺癌(2.91%),1例为ⅡA期肺癌(0.97%)-3例为转移性肺癌(2.91%)-21例为肺良性疾病(20.38%)-术后并发症发生率16.5%,主要为肺漏气-肺部感染-NSCLC患者术后平均随访18个月(1~36个月),无死亡病例,1例恶性病例随访期间出现局部复发-结论:全胸腔镜解剖性肺段切除术安全-可行;全胸腔镜解剖性肺段切除结合系统性淋巴结清扫可以作为治疗早期NSCLC(T1aN0M0)的选择之一-

摘要:目的:探讨可分离式非记忆合金髌骨爪内固定与张力带钢丝在治疗髌骨骨折中的疗效差异,为临床选择适宜基层医院的手术方法提供理论支持-方法:选取2008年1月~2012年5月在浦江第二医院就诊的102例髌骨骨折患者,其中采用可分离式髌骨爪内固定治疗53例(髌骨爪组),采用张力带钢丝治疗49 例(张力带钢丝组)-比较两组患者的手术时间-术中出血量等围手术期指标以及术后并发症 (内固定滑脱松动-断裂-内固定物皮肤刺激-骨折移位-创伤性骨关节炎) 发生率,以及6个月时的膝关节功能恢复情况-结果:髌骨爪组手术时间少于张力带钢丝组,差异有统计学意义(P < 0.05)-术后并发症明显少于张力带钢丝组,差异有统计学意义(P < 0.05)-术后膝关节功能恢复情况:髌骨爪组优良率100%,张力带钢丝组优良率91.8%,差异有统计学意义(P < 0.05)-结论:可分离式髌骨爪针对髌骨骨折的疗效显著好于改良张力带组,手术时间短-并发症少,术后能取得良好的功能恢复-

摘要:目的:探讨自体血回输在老年患者腰椎后路融合手术中的作用-方法:选取了2012年1~6月在腰椎后路融合术中采用自体血回输的老年患者60例,记录各种不良反应-回输血量及术中术后的引流量-监测患者术前及术后第1-3天的血常规及电解质检测结果-结果:术中平均回输血量433.3 ml,回输后24 h内未发现明显并发症-术后第1-3天的血常规和电解质,和术前相比,无明显下降,且都处于正常范围之内,表明各项指标均可迅速地恢复原有水平-结论:虽然老年患者腰椎后路融合手术出血较多,在严格掌握输血指征下,采用术中自体血回输,不但操作简便,有助于老年患者术后的恢复,而且有效地节约血源,值得广泛推广-

摘要:目的:分析输尿管上段结石3种不同微创手术疗效-方法:对贵航贵阳医院收治的467例输尿管上段结石患者分别选用:输尿管镜碎石(ureteroscopic lithotripsy,URL)-微通道经皮肾穿刺碎石术(mini-percutaneous nephrolithotomy,MPCNL)以及后腹腔镜下输尿管切开取石术(retroperitoneal laparoscopic ureterolithotomy,RLU)-结果:154例行MPCNL,结石一次性清除率为98.1%;URL共142例,结石清除率为80.2%,26例结石进入肾盂未能碎石,2例改行MPCNL-RLU或开放手术;RLU共171例,结石一次性清除率为100%-结论:MPCNL可成为输尿管上段结石的主要手术方式;URL对于该类结石不宜作首选;RLU对于该类结石处理可达到与传统开放手术相近的效果,可作为URL失败的补救-

摘要:目的:探索较为有效预防宫腔粘连分离术后宫腔再粘连及复原生殖功能的方法-方法:选择2011年9月~2013年3月民权县中医院接受治疗的116例宫腔粘连患者为研究对象-随机将其中72例分为实验组,采用Foley球囊管预防粘连;余者44例分为对照组,采用节育器预防粘连-以术后子宫内膜厚度-妊娠时间-宫腔再粘连-慢性子宫内膜炎-内膜形态学分型-妊娠及自然流产情况为观察指标-结果:术后3个月,实验组患者有效率为95.8%,对照组为79.5%;实验组宫腔再粘连率为4.2%,显著低于对照组的20.5%(P < 0.05);实验组慢性子宫内膜炎发生率为2.8%,显著低于对照组的18.2%(P < 0.05);实验组形态学分型Ⅰ型者构成比为61.1%,显著高于对照组的27.3%(P < 0.05);实验组平均内膜厚度为(9.3 ± 0.5)mm,显著高于对照组的(8.2 ± 0.9)mm (P < 0.05);实验组术后平均妊娠时间为(4.6 ± 1.0)个月,显著低于对照组的(5.2 ± 0.8) 个月(P < 0.05)-两组患者术后妊娠率无显著差异性(P > 0.05);而实验组患者术后自然流产率为14.3%,显著低于对照组的45.5%(P < 0.05)-结论:相对于传统方案,Foley球囊管扩张术更具有效预防术后宫腔再粘连作用,且能有效复原宫腔生殖功能,降低不良孕产发生率-

摘要:目的:探讨Cook子宫颈扩张球囊配伍米非司酮在中期妊娠引产中应用的有效性和安全性-方法:将49例使用米非司酮150 mg口服 + Cook子宫颈扩张球囊的中期妊娠引产患者(研究组)与常规使用依沙吖啶100 mg经腹羊膜腔内注射 + 米非司酮150 mg分服(50 mg q12 h)引产50例患者(对照组)进行对照研究-结果:研究组同对照组相比:①宫缩发动时间-引产总时间均显著降低(P均< 0.01);②胎盘胎膜残留率及清宫率也显著降低(P均< 0.01);③平均住院天数缩短(P < 0.01);④两组引产成功率-产程开始至胎儿娩出时间-产后出血量及宫颈裂伤率均无显著差异-结论:米非司酮配伍Cook子宫颈扩张球囊引产是一种安全-有效-快捷的引产方法,尤其适用于羊水少-有依沙吖啶等药物禁忌或对依沙吖啶引产不敏感患者-

摘要:目的:了解多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug-resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)的同源性与流行病例,为控制医院感染及临床合理用药提供依据-方法:收集2012年6~12月临床分离的31株MDRAB,采用K-B纸片法检测12种抗菌药物敏感性,应用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分析菌株的同源性-回顾性分析MDRAB样本病例-结果:药敏结果显示,31株MDRAB对9种抗菌药物100%耐药率,包括4类抗菌药物-PFGE结果表明,31株菌分为5个克隆,20株属于B克隆,占64.52%,为主要流行菌株型,分布于8个病区,主要集中在重症监护病房-胸心外科-老年重症监护病房等重症病区-患者平均年龄64岁,侵入性操作占97%-结论:MDRAB对临床常用抗菌药物耐药比较严重-可能与院内存在克隆传播及患者年龄大-侵入性诊疗操作-合并多种基础疾病等多种因素有关-

摘要:目的:建立定量检测白色念珠菌烯醇化酶(enolase,Eno)的双抗体夹心ELISA法,并应用于不同真菌培养上清液的检测,探讨其在侵袭性念珠菌感染中潜在的诊断价值-方法:将白色念珠菌Eno单抗作为包被抗体,HRP标记的羊抗Eno作为检测抗体,利用重组白色念珠菌Eno蛋白作为标准品评价该方法的精密度-线性范围-最低检测下限等性能指标-用建立的双抗体夹心ELISA法定量检测不同真菌培养上清和白色念珠菌在不同温度下培养上清中Eno水平-结果:Eno浓度为20 ng/ml和5 ng/ml时,批内和批间精密度分别为6.61%-9.19%和6.98%-13.81%,最低检出下限为1.25 ng/ml,线性范围为1.25~50.00 ng/ml-白色念珠菌37℃培养24 h时的上清中Eno含量为3.06 ng/ml,培养120 h时Eno水平上升到33.43 ng/ml,Eno水平与白色念珠菌菌丝含量呈正相关-本方法与近平滑念珠菌有微弱交叉反应,与热带念珠菌-光滑念珠菌-季也蒙念珠菌-新型隐球菌和酿酒酵母均无交叉反应-结论:成功建立了定量检测白色念珠菌Eno的双抗体夹心ELISA法,在侵袭性念珠菌感染研究中具有潜在的应用价值-

摘要:目的:比较研究国产与进口胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)-1检测试剂盒(胶体金法)快速诊断胎膜早破(premature rupture of fetal membrane,PROM)的性能-方法:取87例PROM患者为阳性组,153例胎膜未破孕妇为对照组,对其宫颈分泌物分别予以进口和国产的IGFBP-1试剂盒检测;并结合pH试纸的检测结果,比较两种IGFBP-1试剂盒的灵敏度-特异度-阳性预测值-阴性预测值-结果:国产与进口的IGFBP-1试剂盒诊断PROM的Kappa一致性检验为0.97(P < 0.000 1)-结论:国产与进口的IGFBP-1检测试剂盒诊断PROM结果一致性较佳;与pH试纸比较,国产IGFBP-1检测试剂盒在检测PROM中具备显著的优越性-

摘要:目的:分析江苏男男性行为(men who have sex with men,MSM)人群的艾滋病抗病毒治疗效果及其影响因素,首次建立江苏省MSM抗病毒治疗评价方法-方法:通过整群抽样的方式选取江苏两市接受免费高效抗逆转病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)的MSM作为研究对象,进行生活史和用药情况的问卷调查;从江苏省艾滋病治疗信息库中获知其CD4值,采用Epidata 3.0和SAS 9.0分别进行资料录入与统计分析-结果:157例MSM总体CD4值提高,服药依从性低-经单因素及多因素分析,确诊后安全套使用水平低-吸烟量大-确诊至治疗时间间隔长是影响治疗效果的危险因素;首次CD4值较高及服药天数较长是保护因素-结论:江苏目前男男性行为人群抗病毒治疗效果显著,建议对符合治疗条件的MSM进行早期治疗,并提高患者服药依从性-

摘要:目的:调查H7N9流行初始江苏省职业暴露人群H5N1禽流感抗体水平及其影响因素-方法:分别使用香港株-广东株与安徽株抗原,用血清凝集抑制法(hemagglutination inhibition,HI)测定血清样本抗体滴度,计算几何平均滴度(geometric mean titer,GMT),统计分析影响抗体水平的因素-结果:检测职业暴露人群血清标本416份,性别与抗原株对职业暴露人群抗体滴度有显著影响-结论:江苏省职业暴露人群H5N1禽流感抗体滴度普遍较低-男性抗体滴度低于女性,广东株抗原与禽流感病毒现有流行株较为接近-

摘要:目的:探讨后腹腔镜联合经尿道等离子电切术行肾盂癌根治术治疗肾盂癌的临床疗效-方法:回顾性分析安徽医科大学第一附属医院泌尿外科2008年6月~2012年6月间20例肾盂癌患者住院病例资料-采用后腹腔镜技术行根治性肾输尿管全长切除,联合经尿道等离子电切术切除输尿管开口周围膀胱黏膜-观察患者手术并发症-膀胱内出血-术后肿瘤复发情况-结果:20例手术均成功,无中转开放手术,无大出血-尿瘘并发症-术中出血量-手术时间-术后肛门恢复通气时间-术后开始下床时间及术后住院时间分别为(113.7 ± 59.9)ml-(172.6 ± 23.9)min-(26.4 ± 12.4)h-(28.1 ± 12.6)h及(6.70 ± 0.8)d-所有患者获随访30~60个月,未见穿刺孔,未见膀胱外-腹膜后种植转移,1例膀胱肿瘤复发- 结论:后腹腔镜联合经尿道等离子电切术行肾盂癌根治术治疗肾盂癌,有效安全,创伤小,不增加膀胱内复发风险,术后恢复快,并发症少-

摘要:目的:回顾性分析肠系膜上动脉栓塞(superior mesenteric artery embolization,SMAE)的多层螺旋CT(multi-slice CT,MSCT)的影像特征,探讨MSCT对本病的诊断价值-方法:搜集2009年8月~2013年3月期间21例SMAE患者的临床及影像资料,分析SMAE的发生部位-范围-狭窄程度-血栓CT值等影像特点,并观察腹腔间接病变特点-结果:21例患者中,均急诊行MSCT检查,初步诊断为SMAE-其中,17例经外科手术取栓治疗,4例经肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA)造影检查并行导管抽栓联合局部溶栓治疗,术后均证实为SMAE-MSCT直接征象:平扫显示所有患者血栓形成部位,血栓CT值为40~60 Hu,平均52 Hu,较正常血管37 Hu高;增强扫描后,8例SMA主干部分充盈缺损,缺损对侧见点状-椭圆形或弧形增强影,诊断为SMA不全栓塞-13例SMA主干截断,强化的SMA主干突然变为低密度,诊断为SMA完全性栓塞-MSCT间接征象:8例肠壁增厚7.0~12.8 mm,平均10.1 mm,增强扫描延迟强化-1例少量腹水-结论:MSCT能够清晰地显示SMA的形态及管腔内充盈情况,可快速-无创-准确地诊断SMAE,同时对病变肠道管壁-管腔-肠系膜及腹水的表现也能充分显示,为治疗及评估预后提供重要信息,值得临床推广应用-

摘要:目的:通过回顾无锡市人民医院5例双肺移植治疗特发性肺动脉高压(idiopathic pulmonary artery hypertension,IPAH)的临床资料,并结合国内外相关文献,探讨肺移植治疗IPAH的适应证-术式选择-手术并发症以及围术期处理-方法:IPAH受者5例,男2例,女3例,年龄14~30岁,术前均为重度肺动脉高压,WHO心功能评级Ⅲ~Ⅳ级,在全麻体外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)支持下行序贯式双肺移植术-结果:5例患者中4例术后需延长ECMO使用,时间12~20 h不等;所有患者术后早期均出现不同程度的急性左心功能不全,机械通气延迟撤离,住重症监护病房时间延长-最终5例患者均康复出院,随访至今,心肺功能良好,长期生活质量佳-结论:肺移植目前仍然是IPAH唯一的治疗选择,双肺移植是IPAH当前首选的手术方法-围术期常规应用ECMO支持技术,可大大提高手术的安全性-

摘要:目的:探讨microRNA-194(miR-194)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响及其可能的作用机制-方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌耐药细胞A549/DDP及其亲本细胞株A549中miR-194的表达差异,并在A549/DDP细胞中转染miR-194-inhibitor后检测miR-194的表达变化;应用MTT法-克隆形成实验-流式细胞术检测转染后A549/DDP细胞对DDP的敏感性-细胞增殖能力及凋亡变化;Western blot检测转染后A549/DDP细胞中Bax和Bcl-2的表达变化-结果:miR-194在耐药细胞A549/DDP中的表达量显著高于其亲本细胞株A549(P < 0.05),A549/DDP在转染miR-194-inhibitor 24 h后miR-194的表达水平较对照组显著下降(P < 0.05)-抑制miR-194表达后,相对于对照组,DDP对转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)减低(P < 0.05),转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞增殖能力减弱,经DDP处理后凋亡细胞增多(P < 0.05)-Western blot结果显示,与对照组相比,转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低-结论:miR-194可能通过抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白表达而增加A549/DDP细胞对DDP的耐药性,抑制miR-194的表达可逆转A549/DDP细胞的耐药性-

摘要:目的:制备全人源抗狂犬病病毒scFv-Fc融合抗体,并分析其结合活性-方法:构建全人源抗狂犬病病毒scFv-Fc融合抗体原核表达载体,优化表达并纯化全人源抗狂犬病病毒scFv-Fc融合抗体-以纯化的灭活狂犬病病毒包板,对纯化的抗体进行结合活性分析-结果:构建全人源抗狂犬病病毒scFv-Fc-pColdⅡ原核表达载体,经测序分析正确后,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,在加入浓度为0.5 mmol/L IPTG时,scFv-Fc融合抗体的表达较高,其分子量大小为57 000-纯化后的scFv-Fc融合抗体在1∶512的条件下仍可以较好地结合狂犬病病毒-结论:构建全人源抗狂犬病病毒scFv-Fc-pColdⅡ原核表达载体,表达并纯化了scFv-Fc融合抗体,为研发狂犬病暴露后预防治疗性抗体药物奠定了基础-

摘要:目的:利用3130遗传基因测序仪的电泳图谱分析江苏人群D21S11-D6S1043-Penta E-PGA-D2S1338-D11S51-D19S433-D12S391-CSF1PO-D3S1358-Penta D-VWA-D13S317-THO1-TPOX-D8S1179-D16S539-D5S818-D7S820 19个STR基因座多态性分布,并计算该19个基因座的基因频率-个体鉴别能力-无偏倚期望杂合度-多态性信息总量和非父排除率-方法:利用 PCR扩增,产物通过3130测序仪毛细管电泳-读出数据后用分析软件进行分析-结果:19个STR位点中Penta E的个体鉴别能力值和非父排除率值最高,19个STR位点的累积非父排除率达0.9999以上-结论:通过大量的样本实验和等位基因频率的统计,得出了更加客观的等位基因多态性数据,为江苏地区亲权鉴定的判定提供更加客观的依据-