• 2018年第2期文章目次
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    • CRISPR/Cas9介导的猪Six1和Six4基因敲除细胞系的建立

      2018(2):143-148. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180201

      摘要 (1985) HTML (52) PDF 6.74 M (3885) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:利用干细胞囊胚互补技术再生同种或异种动物器官已得到验证,其重要的前提是需要构建出相应的器官缺失动物模型。本文拟通过CRISPR/Cas9基因编辑技术建立猪Six1单基因和Six1/Six4双基因敲除猪细胞系,为构建肾脏发育缺陷和缺失猪模型奠定重要的研究基础。方法:选取猪Six1基因和Six4基因第一外显子为敲除靶点,分别设计并合成单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),将其插入含有Cas9骨架的PX330质粒,分别构建Six1基因和Six4基因敲除打靶载体PX330-sgRNA1和PX330-sgRNA4;用T7EN1酶验证打靶载体敲除效率后,将高效打靶载体与含G418抗性的质粒(pCMV-tdTomato)共转染原代猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts,PFFs)中,并通过药物筛选获得单克隆细胞群落,随后对单克隆细胞进行基因型鉴定。结果:分别成功构建Six1和Six4基因的Cas9/sgRNA表达载体。转染Six1基因打靶载体经药物筛选后,利用PCR方法鉴定所获得的Six1基因敲除单克隆细胞系48个,其中Six1-/-细胞系21个。通过同样方法同时转染Six1基因和Six4基因打靶载体,经药物筛选后共获得44个单克隆细胞系,其中Six1-/- Six4-/-细胞系为13个。结论:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术可高效获得Six1单基因敲除细胞系和Six1/Six4双基因敲除细胞系,为构建肾脏发育缺陷猪动物模型提供了基础,并有助于研究Six1和Six4基因在猪肾脏发育中的功能。

    • 人/猪OSBPL2同源性比较及猪PFFs靶基因敲除细胞系的建立

      2018(2):149-154. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180202

      摘要 (2030) HTML (46) PDF 20.38 M (1782) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:基于CRISPR/Cas9技术构建猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts,PFFs)OSBPL2敲除细胞系,为构建小型猪致聋基因缺陷动物模型奠定重要的前期工作基础。方法:首先通过生物信息学方法对人与猪OSBPL2基因共线性和同源性进行分析,预测并模拟人与猪OSBPL2蛋白质二级、三级结构。其次,设计合成靶向猪OSBPL2第5、6外显子设计单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),以pX330质粒为载体,构建含有Cas9骨架的重组载体,转染至猪PFFs中,G418药物筛选阳性单克隆细胞。最后,T7EN1酶切实验检测靶向效率,序列分析检测单克隆细胞基因型。结果:生物信息学分析结果表明人与猪的OSBPL2在染色体上具有较好的共线性关系,蛋白质氨基酸同源性高达88%,且具有相似的功能结构域。成功构建打靶OSBPL2基因的Cas9/sgRNA表达载体,转染PFFs细胞,药物筛选获得OSBPL2基因双敲的单细胞克隆并测序证实了基因突变型。结论:人和猪OSBPL2基因具有高度的同源性。构建成功的Cas9/sgRNA表达载体在PFFs中预期实现了OSBPL2基因编辑并获得基因双敲的单细胞克隆,为后续OSBPL2基因敲除猪模型构建提供了必需的实验材料。

    • 小鼠PNPLA7敲降重组腺病毒的构建及其生物学功能的初步研究

      2018(2):155-160. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180203

      摘要 (2252) HTML (71) PDF 9.04 M (3458) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:构建小鼠PNPLA7基因的敲降重组腺病毒,检测PNPLA7敲降重组腺病毒对小鼠肝脏PNPLA7蛋白的敲降效率及对肝脏甘油三酯含量的影响。方法:将对照siNC以及敲降PNPLA7的siRNA设计为shRNA并插入到pshuttle-CMV-silence穿梭质粒中,挑选克隆并测序鉴定,测序成功后将质粒进行PmeⅠ线性化,转入含有腺病毒骨架pAdeasy的BJ5183感受态细胞中进行同源重组,重组成功后的质粒经PacⅠ线性化转染293A细胞进行腺病毒包装,得到Ad-shNC对照腺病毒以及Ad-shPNPLA7敲降腺病毒。通过尾静脉注射腺病毒7 d后根据免疫印迹实验检测小鼠肝脏中PNPLA7敲降效率,同时利用Folch提脂方法提取并检测小鼠肝脏中甘油三酯含量。结果:成功获得对照腺病毒Ad-shNC以及敲降腺病毒Ad-shPNPLA7。通过尾静脉注射进行小鼠肝脏PNPLA7敲降,结果显示Ad-shPNPLA7腺病毒可成功降低PNPLA7的蛋白表达,敲降PNPLA7后引起肝脏甘油三酯含量上调。结论:小鼠PNPLA7的敲降腺病毒构建成功,敲降PNPLA7引起肝脏中甘油三酯含量升高。

    • 斑马鱼胚胎发育过程中内源性多肽的表达及与眼发育的相关研究

      2018(2):161-165. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180204

      摘要 (1602) HTML (49) PDF 2.25 M (1997) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究斑马鱼发育过程中内源性多肽的表达规律以及与眼发育的相关性。 方法:分别收集0、48 h斑马鱼胚胎进行多肽质谱分析,筛选发育过程中的差异多肽,利用生物信息学方法分析差异多肽对应的前体蛋白及前体基因,从中筛选与眼发育相关的内源性多肽。结果:研究共筛选得到差异多肽232条。理化特性分析发现分子量均分布在2 000 Da以下,等电点主要以弱酸和弱碱性为主,中性极少。生物信息学发现Vitellogenin(VTG)、Titin(TTN)基因编码的前体蛋白富集较多与胚胎发育和眼发育相关的差异多肽。信号通路分析(ingenuity pathway analysis,IPA)发现差异多肽的分子功能和生理系统功能与胚胎发育相关,差异多肽富集信号通路包括轴突介导的信号通路、FAK信号通路和MAPK信号通路,这些信号通路与眼发育密切相关。结论:斑马鱼胚胎期发育过程中内源性差异多肽理化特性稳定,与胚胎发育密切相关,并可能通过相关信号通路来影响眼发育,将为眼发育提供新的研究思路,为机制研究奠基基础。

    • 含人SOX18基因真核表达载体的构建及其重组蛋白诱导血管内皮细胞增殖的研究

      2018(2):166-170. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180205

      摘要 (1599) HTML (52) PDF 5.65 M (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:构建含人SOX(SRY related high mobility group box)18的重组表达质粒,并研究其对血管内皮细胞增殖能力的影响。方法:通过RT-PCR技术从血管内皮细胞中扩增SOX18编码基因序列,将其插入真核表达载体pSecTag-2B构建重组表达质粒pST-SOX18,分别转染人胚肾上皮细胞HEK293T和血管内皮细胞,通过免疫印迹技术检测SOX18的蛋白表达情况;进一步通过CCK-8实验检测SOX18对血管内皮细胞增殖能力的影响。结果:成功构建重组质粒pST-SOX18,重组蛋白能够在HEK293T和血管内皮细胞中表达;SOX18的过表达促使血管内皮细胞合成血管内皮生长因子(VEGF),促进血管内皮细胞增殖。结论:SOX18重组蛋白能够促进血管内皮细胞增殖。

    • JNK介导的Bcl⁃2磷酸化调控神经细胞缺氧缺糖再复氧复糖所致的自噬性细胞死亡

      2018(2):171-179. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180206

      摘要 (2070) HTML (61) PDF 37.53 M (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨自噬在神经细胞缺氧缺糖再复氧复糖损伤过程中的机制。方法:通过改良Takei和Endo的方法分离培养Sprague-Dawley大鼠皮层神经细胞并鉴定。培养至7 d后,将细胞随机分为4组,均培养细胞至0.5、2.0、6.0及12.0 h:①空白对照组;②实验组:即缺氧缺糖再复氧复糖组;③JNK抑制剂处理对照组:JNK特异性抑制剂SP600125处理神经细胞0.5 h;④JNK抑制剂预处理预处理+实验组:应用JNK特异性抑制剂SP600125预处理0.5 h后进行缺氧缺糖再复氧复糖。结果:噻唑蓝(MTT)结果示神经细胞的活性在实验组中随复氧复糖时间的延长而逐渐下降;JNK抑制剂预处理+实验组在12 h才出现明显降低(P < 0.05)。电镜结果表明:实验组在0.5 h及2.0 h时,神经细胞内可见大量自噬泡及自噬溶酶体形成,6 h时自噬泡数量短暂降低后,在12 h又可见新“自噬潮”和大量已排空的自噬泡;JNK抑制剂预处理+实验组中,自噬泡在0.5 h和2.0 h时大量形成,随后随着复氧复糖时间的延长而逐渐减少。实验组和JNK抑制剂预处理+实验组,LC3Ⅱ蛋白表达在6 h前无差异,均表现为先增高再降低;而实验组LC3Ⅱ蛋白表达量在12 h却再次增加,JNK抑制剂预处理+实验组则持续降低。实验组JNK、Bcl-2的磷酸化水平及Beclin-1的蛋白表达量均随着复氧复糖时间的延长而逐渐增加;而在JNK抑制剂预处理+实验组,仅在12 h时才增加(P < 0.05)。同时,Bcl-2/Beclin-1复合物在实验组呈逐渐分离的趋势,JNK抑制剂则明显抑制了这种分离。结论:JNK/ Bcl-2/ Beclin-1信号的调节可能是缺氧缺糖后复氧复糖诱导神经细胞自噬性细胞死亡的机制之一。

    • 低浓度过氧化氢诱导人黑素细胞提早衰老

      2018(2):180-184. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180207

      摘要 (2143) HTML (55) PDF 10.67 M (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:本研究旨在探讨氧化应激在人表皮黑素细胞衰老中的作用。方法:以不同浓度的过氧化氢(0、200、400、600、800、1 000 μmol/L)处理人黑素细胞5 d后,检测分析其细胞活力和凋亡。通过评估衰老相关指标β-半乳糖苷酶染色、细胞增殖、细胞周期分析、E-钙黏素以及衰老基因表达等改变,探讨低浓度过氧化氢(0~400 μmol/L)对黑素细胞衰老进程的影响。结果:与对照组比较,当过氧化氢浓度为200 μmol/L和400 μmol/L时,细胞活力和凋亡未见显著性改变;高浓度的过氧化氢(600~1 000 μmol/L)可以明显诱导黑素细胞凋亡;400 μmol/L的过氧化氢则可使黑素细胞出现以细胞树突缩短、增殖减慢、β-半乳糖苷酶蓝染率增加、细胞周期阻滞于G2期、E-钙黏素表达降低及衰老相关蛋白p53和p21的表达增加等改变。结论:400 μmol/L浓度的过氧化氢刺激能诱导黑素细胞提早衰老。

    • 脂氧素A4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE⁃12的保护作用

      2018(2):185-190. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180208

      摘要 (2051) HTML (64) PDF 26.82 M (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨脂氧素A4(LipoxinA4, LXA4)对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用及机制。方法:体外传代培养MLE-12细胞,随机分为:空气组、高氧组、高氧+LXA4组、高氧+转化生长因了(TGF)-β1中和抗体组、高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组。倒置相差显微镜下观察各组MLE-12形态学变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、肌腱蛋白C(tenascin-C)、TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的mRNA水平。Western blot检测TGF-β1/Smads信号(TGF-βR1、Smad2、Smad3、Smad4、p-Smad2 和p-Smad3)蛋白表达。结果:①细胞形态:高氧组MLE-12明显失去原有正常细胞形态,细胞变圆,核固缩;药物干预组正常细胞数增多,大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似;②细胞外基质(extracellular matrix,ECM)mRNA表达:LXA4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的collagenⅠ和tenascin-C mRNA的表达量升高(P < 0.05),其中高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组作用最为显著(P < 0.05);③TGF-β1/Smads信号mRNA和蛋白含量:LXA4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的mRNA水平以及下调TGF-β1/Smads信号相关蛋白的表达量(P < 0.05),其中高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组细胞的表达量下调最为显著(P < 0.05)。结论:LXA4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护可能与调控TGF-β1/Smads信号以及collagenⅠ和tenascin-C的表达有关。

    • PDCD4在雄鼠生殖细胞中的表达研究

      2018(2):191-194,265. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180209

      摘要 (1734) HTML (62) PDF 11.46 M (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:验证程序性细胞死亡因子4 (programmed cell death 4,PDCD4)在小鼠雄性生殖细胞中的表达。方法:RT-PCR检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸的基因表达情况;Western blot法检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸中蛋白表达水平;免疫荧光法检测PDCD4在雄性生殖嵴以及在不同周龄小鼠睾丸的定位情况。结果:RT-PCR和Western blot结果均显示PDCD4在0周龄小鼠睾丸中开始有表达,并持续表达至成年;免疫荧光显示PDCD4在胚胎期雄性小鼠生殖细胞中也有表达;在出生后0周和1周龄小鼠睾丸中,PDCD4特异表达于精原细胞;在2周龄小鼠睾丸中,PDCD4分布于精原细胞和精母细胞;而在3、4和5周龄小鼠睾丸组织中,PDCD4主要分布于精原细胞、精母细胞与圆形精子细胞。结论:PDCD4分布于胚胎期和出生后各阶段生精细胞,这为进一步研究PDCD4在精子发生中的作用打下基础。

    • Wnt信号通路与mCRC含伊立替康化疗疗效及预后的易感性研究

      2018(2):195-200. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180210

      摘要 (2377) HTML (48) PDF 2.02 M (2524) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨Wnt信号通路关键基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与转移性结直肠癌(metastatic colorectal cancer,mCRC)含伊立替康化疗疗效及预后的相关性。方法:筛选Wnt信号通路上的关键基因,对110例含伊立替康化疗的mCRC患者进行SNPs分型。运用Logistic和Cox回归法分别分析SNPs不同基因型对疗效及预后的影响。结果:LRP6 rs10772542 C等位基因患者的疾病控制率(disease control rate,DCR)相对于T等位基因更低(OR=2.49,95%CI=1.28~4.83,P=0.007)。LEF1 rs749414 G等位基因的无进展生存期(progression-free survival,PFS)相对于T等位基因更长(HR=0.55,95%CI=0.40~0.78,P=0.001);WNT7B rs10448605 T等位基因的PFS相对于C等位基因更短(HR=1.65,95%CI=1.13~2.41,P=0.009);而WNT2 rs2239957 C等位基因的总生存期(overall survival,OS)相对于G等位基因更长(HR=0.54,95%CI=0.35~0.85,P=0.007)。结论:Wnt信号通路上的LRP6、LEF1、WNT7B和WNT2基因多态性与mCRC含伊立替康化疗疗效及预后之间存在明显的相关性。

    • 多光子显微成像技术用于诊断结直肠疾病可行性的初步研究

      2018(2):201-205,238. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180211

      摘要 (1387) HTML (63) PDF 9.67 M (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:通过多光子显微成像技术(multiphoton microscopic imaging,MPM)观察并初步建立结直肠组织的镜下特点,探讨MPM用于肠道疾病的诊断价值。方法:回顾性分析100个经病理证实为正常、增生性息肉、腺瘤、腺癌的离体新鲜组织的MPM图像,初步总结 MPM诊断结直肠疾病的特点。结果:通过观察比较各类型的MPM图片,发现从隐窝开口、腺体结构、腺上皮细胞及胶原纤维可对结直肠疾病进行MPM诊断。正常、增生性、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变和癌变组织的细胞核面积平均值各为(32.14 ± 1.96)μm2、(32.69 ± 2.34)μm2、(55.40 ± 4.63)μm2、(71.83 ± 5.30)μm2、(85.90 ± 11.50)μm2,正常上皮细胞与增生性上皮细胞的细胞核面积无统计学差异(P=0.517),其余各两组细胞核面积之间均有统计学差异(P< 0.001)。结论:多光子显微成像技术可以无损、实时、高分辨率地对结直肠疾病进行分类及分级诊断,未来有望与内镜整合,成为新一代光学诊断技术。

    • 发作性头痛与慢性头痛患者神经心理学与注意功能影响的初步研究

      2018(2):206-210. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180212

      摘要 (1528) HTML (51) PDF 633.82 K (2067) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨发作性头痛与慢性头痛患者注意功能影响的临床表现及其可能的作用机制。方法:通过纳入18例发作性头痛(episodic headache,EH)患者、20例慢性头痛(chronic headache,CH)患者和21例健康对照人群,分别进行神经心理学评估,包括简易精神状态评估量表(mini mental state exam,MMSE)、蒙特利尔认知评估量表中国北京版(Beijing Chinese version of Montreal Cognitive Assessment,MoCA-C)、数字广度测试(digit span test,DS)、额叶功能评定量表(frontal assessment battery,FAB)、医院焦虑抑郁量表(hospital anxiety and depression subscales,HADS)和匹兹堡睡眠量表(Pittsburgh sleep quality index,PSQI)和注意力网络测试(attention networks test,ANT),并进行对比分析。结果:CH组的MoCA-C(P值均< 0.001)、DS(P=0.002或P=0.004)、HADS(焦虑:P < 0.001或P=0.002;抑郁:P < 0.001或P=0.001)、PSQI(P < 0.001或P=0.001)评估结果均与健康对照组或EH组存在显著差异。CH组和健康对照组的FAB评估结果亦存在显著差异(P=0.021)。ANT测试结果显示3组间的警觉、定向效率和正确率无显著差异,但CH组的平均反应时间较健康对照组或EH组明显延长(P=0.002或P=0.035),执行控制效率较健康对照组明显降低(P=0.042)。结论:头痛损害注意功能,而CH组损害更明显,主要表现为CH患者执行注意力相关任务的平均反应时间延长、执行控制功能降低,提示CH损害了注意网络-执行功能,该功能的损害可能是头痛损害注意功能的关键机制之一。

    • 3.0T MRI扩散加权成像表观扩散系数直方图与乳腺浸润性导管癌分子亚型的相关性研究

      2018(2):211-216. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180213

      摘要 (2119) HTML (54) PDF 13.16 M (2343) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨磁共振扩散加权成像(diffusion-weighted imaging,DWI)表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)直方图多参数与乳腺癌分子亚型的相关性。方法:回顾性分析本院2014年3月—2016年3月期间具有完整病理及术前MRI资料的182例浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)女性患者,术前行常规乳腺MRI平扫、扩散加权成像(b=50、800 s/mm2)及动态增强扫描(dynamic contrast-enhanced MRI,DCE-MRI),利用Firevoxel软件在DWI图上(b=800 s/mm2)绘制肿瘤每一层面感兴趣区(region of interest,ROI),记录整个肿瘤体积的ADC直方图参数,包括ADC最小值(ADCmin)、ADC10、ADC平均值(ADCmean)、ADC中位数(ADCmedian)、ADC90、ADC最大值(ADCmax)、偏度系数、峰度系数,并同时生成ADC直方图。对不同亚型各ADC值进行Levene’s检验验证方差齐性,方差齐时采用两样本t检验,方差不齐时采用Mann-Whitney U检验。使用 Kruskal-Wallis或ANOVA检验比较IDC不同亚型与ADC值之间的关系。结果:除ADCmin以外,其他ADC参数在不同分子亚型IDC中均有统计学差异,在HER-2阳性组、Luminal A组、三阴性组、Luminal B组中降序排列,如ADC90平均值在4组中分别为1.501×10-3、1.401×10-3、1.330×10-3、1.223×10-3 mm2/s,任何两组间有明显的统计学差异(HER-2阳性组和Luminal A组,Luminal A组和三阴性组,三阴性组和Luminal B组比较P值分别为0.019、0.035、< 0.001)。结论:除ADCmin以外,不同ADC参数和乳腺癌分子分型有明显相关性,HER-2阳性组不同ADC参数值均高于其他组。

    • 64排螺旋CT检查前饮水与未饮水对胃癌术前TN分期准确性的影响

      2018(2):217-221. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180214

      摘要 (2309) HTML (55) PDF 2.59 M (2393) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:评估64排螺旋CT对胃癌术前TN分期的诊断价值以及水充盈法对术前TN分期准确性的影响。方法:采用回顾性分析的方法,比较120例胃癌患者(饮水组60例,未饮水组60例)术前CT的TN分期与术后病理TN分期。结果:饮水组CT诊断的T分期结果与术后病理结果呈高度一致性(Kappa=0.714),未饮水组CT诊断的T分期结果与术后病理结果呈中度一致性(Kappa=0.506),并且两组T分期总体准确率比较具有显著性差异(P=0.039);饮水组CT诊断的N分期结果与术后病理结果呈高度一致性(Kappa=0.640),未饮水组CT诊断的N分期结果与术后病理结果呈中度一致性(Kappa=0.510),并且两组N分期总体准确率比较差异无统计学意义(P=0.426)。结论:64排螺旋CT检查对胃癌的术前分期有较高的临床应用价值,检查前饮水能够提高胃癌术前T分期的准确性,对临床胃癌治疗方案的选择具有一定指导意义。

    • 酪氨酸激酶抑制剂治疗未达最佳疗效慢性髓系白血病患者联合自噬抑制剂羟氯喹的临床研究

      2018(2):222-224. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180215

      摘要 (2016) HTML (44) PDF 466.45 K (2251) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗慢性髓系白血病慢性期(CML-CP)患者疗效未达最佳状态(警告或失败)时联合硫酸羟氯喹(简称:羟氯喹)的疗效及不良反应。方法:15例TKIs治疗不满意的CML-CP患者被纳入研究。中位年龄为49(24~66)岁,其中男8例,女7例;Sokal积分:低危4例,中危7例,高危4例。9例为尼洛替尼一线治疗,其中1例9个月后因治疗失败更换为达沙替尼;6例为伊马替尼一线治疗,3~62个月后因疗效不佳全部更换为二代TKIs。联合治疗前,TKIs中位治疗时间为19(6~115)个月,疗效评估10例警告,5例治疗失败。羟氯喹治疗剂量为100 mg 1 d 3次。结果:TKIs联合羟氯喹中位治疗时间为8(6~12)个月。14例(93.3%)患者BCR-ABL转录本水平较前下降,其中9例(60%)在联合治疗2~8个月达到主要分子学反应(MMR),中位维持MMR时间为3(1~10)个月。联合治疗仅有1例出现消化道反应。随访到2016年12月,中位病程时间为29.3(13.8~157.5)个月,15例患者均无疾病进展。结论:羟氯喹可增强TKIs治疗慢性髓系白血病的疗效,耐受性好。

    • 心尖肥厚型心肌病的临床特征和预后及左室造影的诊断价值

      2018(2):225-229. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180216

      摘要 (1505) HTML (48) PDF 1.53 M (2673) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:研究心尖肥厚型心肌病(apical hypertrophic cardiomyopathy,AHCM)患者的临床特征及预后,并评价左室造影在其中的诊断价值。方法:回顾性分析105例同时接受超声心动图和左室造影检查的住院患者的临床资料;分析其临床特征,并比较超声心动图和左室造影对其诊断的价值;进一步对该类患者进行随访,分析其预后。结果:共纳入105例AHCM患者,男性占61%,平均年龄58岁;主诉多为胸闷胸痛;59.0%患者合并高血压;34.3%的患者被诊断合并有冠状动脉粥样硬化;常合并心律失常室早、房早、房速;84.8%的患者的心电图可见多导联T波倒置。以左室造影为诊断标准,经胸超声心动图在AHCM的诊断符合率仅为36.9%。有随访数据的89例(84.8%)患者,平均随访(4.1 ± 2.2)年,有2例患者发生心血管源性死亡,另有29例(32.6%)患者在随访期间因心血管原因再入院。结论:AHCM在临床上有一定发病率,但预后通常良好。AHCM常以胸闷胸痛为主要症状,可合并高血压、冠状动脉狭窄及各类房、室性心律失常;心电图多有典型的V3~V5导联T波深倒;超声心动图诊断AHCM易漏诊,左室造影对诊断AHCM较超声心动图更可靠,同时又能调查冠脉情况,故对于冠脉造影阴性的T波异常患者应常规加做左室造影以排查有无AHCM可能。

    • 加速康复外科理念在腹腔镜下保留肾单位围手术期的临床应用

      2018(2):230-232. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180217

      摘要 (1992) HTML (50) PDF 547.75 K (1989) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨加速康复外科(enhanced recovery after surgery, ERAS)在促进腹腔镜下保留肾单位手术患者术后康复中的应用价值。方法:选取2015年12月—2017年3月在本院接受腹腔镜下保留肾单位手术的258例患者,随机分为ERAS组(138例)和对照组(120例),ERAS组按照ERAS方案进行围手术期处理,对照组接受传统的围手术期处理,对比两组患者术后肠鸣音恢复时间、首次排气时间、首次排便时间、拔除导尿管时间、拔除引流管时间、术后住院时间、住院费用和并发症发生率等情况。结果:与对照组相比,ERAS组患者的肠鸣音恢复时间、首次排气时间、首次排便时间、拔除导尿管时间、拔除引流管时间、术后住院时间均显著缩短(P < 0.05),平均住院费用显著减少(P < 0.05),并发症发生率明显减少(P < 0.05)。结论:应用ERAS方案可加速腹腔镜下保留肾单位手术患者术后康复,缩短住院时间,降低住院费用,减少并发症发生率。

    • 实时B超辅助输尿管软镜钬激光碎石术治疗肾盏憩室结石

      2018(2):233-235. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180218

      摘要 (1700) HTML (49) PDF 26.50 M (1712) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨实时B超辅助输尿管软镜钬激光碎石术治疗肾盏憩室结石的安全性及有效性。方法: 回顾性分析2015年1月—2016年6月本科使用B超引导下输尿管软镜钬激光碎石术治疗15例肾盏憩室结石患者资料。男9例,女6例,年龄35~65岁,平均46岁,均为单侧肾盏憩室结石。结石位于肾上极13例,中部2例。全麻下行输尿管软镜钬激光碎石术,留置输尿管扩张鞘,置入软镜达肾盂,B超引导下寻及憩室开口,使用钬激光切开憩室颈部或闭锁的颈口,予以钬激光碎石,结石碎屑冲出或使用套石篮取出。结果:本组15例均在术中成功置放输尿管扩张鞘,进镜成功率100%。结合B超术中寻找目标肾盏憩室,其中3例肾盏憩室开口针尖样,2例肾盏憩室完全闭锁,在B超实时定位下使用钬激光切割开狭小或闭锁的肾盏黏膜后见结石,憩室内部分结石呈鱼籽样,部分结石呈块状。Ⅰ期手术成功碎石14例,结石均排尽或残余结石< 4 mm,无需进一步处理,1例结石负荷大,Ⅱ期再次软镜碎石成功。术中、术后均未出现大出血,术后无感染性休克发生。术后随访1~3个月,未见结石残留及复发。结论:实时B超辅助输尿管软镜治疗肾盏憩室结石安全、有效,可作为憩室结石的首选治疗方法。

    • 同期房颤外科消融的围术期安全性研究——基于倾向值匹配分析

      2018(2):236-238. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180219

      摘要 (1465) HTML (45) PDF 491.83 K (2132) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:评估在施行其他心脏外科手术的同时加行房颤射频消融手术的安全性。方法:回顾分析2015年2月—2016年4月在本中心行心脏外科手术的204例房颤患者的病历资料,使用倾向值匹配分析的方法分析消融组与非消融组在永久起搏器安装、术后住院时间和术后心包纵膈引流量等安全性指标方面的差异。结果:经匹配,消融组142例和非消融组39例入选,两组患者在术后ICU转出时间、住院时间、心包纵膈引流量以及左室射血分数等安全性指标方面均无显著差异。结论:随着技术的发展,在其他心脏外科手术同期加行房颤射频消融手术不增加围术期风险。

    • 乳腺癌组织中microRNA⁃145表达情况及预后价值

      2018(2):239-241,246. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180220

      摘要 (1683) HTML (55) PDF 558.08 K (1792) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨microRNA-145(miR-145)在乳腺癌组织中表达的预后价值。方法:采用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测60例乳腺癌患者癌组织和邻近正常组织中miR-145、胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF1R)mRNA、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)mRNA水平。采用Spearman等级相关分析法检验miR-145与患者临床病理特征之间相关性,采用Kaplan-Meier曲线法分析乳腺癌患者无病生存期(disease-free survival,DFS),并用Log-rank法和Cox回归分析法进行检验。结果:乳腺癌组织中miR-145水平为4.15 ± 1.37,低于邻近正常组织(5.66 ± 1.59,P< 0.001)。乳腺癌组织中miR-145水平与患者临床病理特征之间无相关性(P>0.05)。乳腺癌组织中miR-145水平与IGF1R mRNA(r=-0.455,P=0.003)、IRS-1 mRNA(r=-0.357,P=0.005)水平呈负相关。Kaplan-Meier曲线显示miR-145低表达组患者DFS低于高表达组患者(P=0.011)。单变量、多变量Cox回归分析显示肿瘤大小(P=0.015)、肿瘤分期(P=0.001)、人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)(P=0.050)、miR-145(P=0.001)是独立预后因素。结论:乳腺癌组织中miR-145水平下调,且是乳腺癌独立的正性预后因子。

    • 弥散加权成像对比常规序列在多发性骨髓瘤分级诊断中的意义

      2018(2):242-246. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180221

      摘要 (1732) HTML (44) PDF 12.67 M (2027) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨磁共振全身弥散加权成像与常规T1T2加权序列(T1WI和T2WI)在多发性骨髓瘤的检出率和对病灶的敏感性上的差异,评估WB_DWI对多发性骨髓瘤分期诊断的价值。方法:收集48例经临床资料确诊的多发性骨髓瘤患者的全身磁共振影像资料,包括常规T1WI、T2STIR序列和功能成像WB_DWI序列。在两组序列上分别统计每例患者病灶累及的区域个数。依照Durie-Salmon PLUS 分级系统,使用两组序列分别对每例样本进行分期。以临床分期为金标准,比较两组方法分期的一致符合率。结果:4例在T1T2加权图像上及弥散图像上均未见明显异常,余44例在两组序列上发现大小数目不等的异常信号,两者检出率均为91.7%。在发现病灶的44例中,T1T2加权图像共发现肿瘤累及的区域1 063个,弥散图像共发现肿瘤累及区域1 442个,在对病灶的敏感性上,DWI序列要优于T1WI、T2WI序列(P < 0.001,Wilcoxon’s 非参数秩和检验)。以临床分期为金标准,T1T2加权序列和弥散序列对患者分期的一致符合率分别为54.5%和68.1%,弥散序列对患者分期准确率高于常规T1WI、T2WI序列(P < 0.05,McNemar’s χ2检验)。结论:磁共振全身DWI序列可以提高磁共振对多发性骨髓瘤肿瘤负荷的检出率,对多发性骨髓瘤的分期诊断具有重要意义。

    • 抗抑郁剂治疗对伴有抑郁和焦虑症状的慢性阻塞性肺疾病患者肺功能的影响

      2018(2):247-250. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180222

      摘要 (1735) HTML (42) PDF 564.04 K (2176) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:观察抗抑郁剂治疗对合并有抑郁和焦虑症状的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能的影响。方法:COPD合并抑郁和焦虑的患者141例,分为对照组和治疗组。对照组只进行呼吸专科治疗,治疗组呼吸专科治疗的同时,以米氮平、艾司西酞普兰进行抗抑郁治疗,对比3组研究对象治疗前后肺功能的变化。结果:3组患者治疗后肺功能均有改善,而抗抑郁治疗组肺功能改善显著(P< 0.05),和对照组相比,米氮平组、艾司西酞普兰组前后评分改善明显。结论:抗抑郁治疗能促进COPD患者肺功能改善,进而改善患者生活质量,加强预后。

    • 黄斑区视网膜血管密度在健康人群及视网膜中央静脉阻塞患者中的特点研究

      2018(2):251-254. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180223

      摘要 (1637) HTML (40) PDF 1.17 M (3114) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:采用OCT血管成像系统(OCTA)测量不同年龄健康人黄斑区视网膜血管密度,探讨其与年龄之间的关系。同时对视网膜中央静脉阻塞(CRVO)患者黄斑区视网膜血管密度的特点进行观察分析。方法:①240例健康志愿者按年龄分为4组:A组18~30岁,B组31~45岁,C组46~60岁,D组61~75岁,每组60例,均行双眼OCTA扫描,测取视网膜血管密度值进行统计学分析,观察视网膜血管密度和年龄的关系;②回顾性分析2016年1月—2017年6月在本院确诊的缺血型和非缺血型CRVO患者各32例(32眼),年龄45~60岁,OCTA分别测量患眼与健眼黄斑区3 mm直径范围视网膜血管密度,分析CRVO患者黄斑区视网膜血管密度的特点。结果:①不同年龄健康人黄斑区3 mm直径范围视网膜血管平均密度:A组(53.35 ± 2.00)%;B组(52.13 ± 1.78)%;C组(51.15 ± 2.31)%;D组(50.01 ± 2.29)%。各年龄组间比较差异均有统计学意义(P均< 0.05),黄斑区视网膜血管密度与年龄呈显著负相关(r=-0.492,P < 0.05)。②非缺血型CRVO者黄斑区整体范围平均视网膜血管密度:患眼(44.73 ± 3.24)%、健眼(51.24 ± 2.45)%,患眼与健眼的整体范围及各象限视网膜血管密度均存在统计学差异(P < 0.05);缺血型CRVO者黄斑区整体范围平均视网膜血管密度:患眼(39.46 ±2.51)%、健眼(51.06 ± 2.45)%,患眼与健眼的整体范围及各象限血管密度均存在统计学差异(P < 0.05);缺血型与非缺血型CRVO者患眼的整体范围及各象限血管密度均存在统计学差异(P < 0.05)。结论:健康人群黄斑区视网膜血管密度与年龄增长呈负相关,这可能与一些年龄相关性黄斑血管性疾病的发生发展有关。CRVO患眼的黄斑区视网膜血管密度较正常降低,缺血型较非缺血型下降更为明显,黄斑区视网膜血管密度的OCTA检查可以作为疾病发展的一种监测手段。

    • 洁、刮治术联合盐酸米诺环素软膏治疗牙周脓肿的临床效果

      2018(2):255-256. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180224

      摘要 (1948) HTML (47) PDF 422.57 K (2176) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:比较洁、刮治术及洁、刮治术联合盐酸米诺环素软膏治疗伴根分叉病变牙周脓肿的临床疗效。方法:将60例伴Ⅱ度或Ⅲ度根分叉病变的牙周脓肿患者随机分为2组,分别采用洁、刮治术(对照组)和洁、刮治术联合应用盐酸米诺环素软膏的方法(实验组)进行治疗,检查并记录患者治疗前、治疗后第3、7天的疼痛程度,脓肿大小,松动度和牙龈指数,采用SAS 6.12软件包对检查结果进行统计学分析。结果:2种方法治疗后第3、7天与治疗前相比,各指标均有显著改善(P < 0.01);与对照组相比,实验组在治疗后第3天疼痛程度改善更为明显(P < 0.05),治疗后第7天,实验组脓肿大小和牙龈指数改善明显(P < 0.05)。结论:洁、刮治术联合盐酸米诺环素软膏能快速有效的改善伴根分叉病变的牙周脓肿的症状和牙周炎症。

    • 生酮饮食治疗婴儿痉挛症31例临床分析

      2018(2):257-259. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180225

      摘要 (1610) HTML (54) PDF 541.72 K (2360) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨生酮饮食(ketogenic diet,KD)对婴儿痉挛症(infantile spasms,IS)患儿的短期临床疗效及预后影响因素。方法:回顾分析南京医科大学附属儿童医院于2013年1月—2016年5月31例确诊IS并使用KD治疗患儿的临床资料,统计开始KD前、开始1周、3个月及6个月的痉挛发作频率,应用SPSS数据处理软件进行数据处理。结果:31例中男22例,女9例,年龄7个月~6岁不等,病程2个月~5年。患儿开始KD前及开始1周后平均每日发作次数即有减少,开始KD治疗3个月后,保留率74.2%,总有效率为39.1%。6个月后保留率58.1%,总有效率为61.1%,有效率随时间的延长增加,保留率减少。统计结果认为是否有病因、发病年龄、病程、开始KD的年龄、是否曾使用皮质醇类药物均不是KD治疗预后的影响因素。31例进行KD的患儿均未发现有严重的需要停止KD的不良反应。结论:对于IS患儿KD是一种相对安全有效的治疗方法。

    • 15例儿童病毒性脑炎伴胼胝体压部孤立性病变的临床及影像学随访研究

      2018(2):260-262. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180226

      摘要 (1673) HTML (52) PDF 2.42 M (2661) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:探讨儿童病毒性脑炎伴胼胝体压部孤立性病变的临床与影像学特征,提高对此类疾病的认识。方法:回顾性分析15例儿童病毒性脑炎伴胼胝体压部孤立性病变的临床资料、实验室检查、影像学资料及随访情况。结果:15例中男9例,女6例,年龄1岁7个月~13岁1个月,9例伴有发热、头痛、呕吐,2例伴有嗜睡,3例有癫痫发作,1例昏迷、机械通气。15例头颅MRI均存在胼胝体压部孤立性病变,表现为斑片状或椭圆形长T1、长T2信号、Flair及DWI高信号、ADC低信号,余脑实质未见异常。14例临床症状于7~10 d缓解,头颅MRI复查胼胝体压部病变于2个月内消失。1例机械通气患儿始终昏迷、复查头颅CT提示两侧丘脑、大脑脚及局部中脑密度减低,放弃治疗后失访。结论:儿童病毒性脑炎伴胼胝体压部孤立性病变临床症状轻重不一,临床表现为发热、头痛、癫痫发作、嗜睡,甚至昏迷;大多症状轻微,临床症状在10 d内消失,胼胝体压部孤立性病变一般在2个月内消失,预后良好;少数症状严重,危及生命,颅内病变除胼胝体压部外,进一步累及丘脑等部位。

    • 婴儿功能性便秘的诊断和治疗流程探讨

      2018(2):263-265. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180227

      摘要 (1757) HTML (52) PDF 534.93 K (2680) 评论 (0) 收藏

      摘要:随着社会发展和环境因素变化,婴儿功能性便秘的发生率越来越高,但目前还没有特别针对婴儿便秘的诊疗规范。文章根据国内外文献指南,结合国内特点,探讨一个相对合理的婴儿功能性便秘诊断和治疗流程,指导临床诊疗,排除器质性便秘,为未来推出婴儿便秘的诊断和治疗指南奠定基础。

    • 以单侧胸腔积液为主要表现的大动脉炎1例并文献复习

      2018(2):266-268. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180228

      摘要 (1750) HTML (54) PDF 3.83 M (2779) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:通过分析1例以单侧胸腔积液为主要表现的大动脉炎(Takayasu arteritis,TA)患者的临床资料并复习相关文献,提高对该疾病的认识。方法:根据该患者的诊治经过,72岁男性患者,因“反复咳嗽咳痰伴胸闷气喘2年,加重1月余”入院,胸部CT提示左侧胸腔积液,查体示左侧肱动脉搏动稍弱,双上肢收缩压差>10 mmHg,影像学提示肺动脉、肾动脉、颈动脉、锁骨下动脉等管腔狭窄,诊断TA。经激素等治疗后胸腔积液逐渐吸收,呼吸衰竭得以纠正。结果:本例患者主要以单侧渗出性胸腔积液为首发,予激素等治疗后症状缓解。结论:以单侧胸腔积液为首发表现的TA易误诊为感染、肿瘤等肺部疾病,积极完善相关检查明确诊断并治疗可改善预后。

    • 腹壁转移性碰撞癌1例报告及文献复习

      2018(2):269-271. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180229

      摘要 (1573) HTML (54) PDF 3.25 M (1894) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 慢性阻塞性肺疾病稳定期患者循环内皮祖细胞水平的Meta分析

      2018(2):272-276. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180230

      摘要 (1777) HTML (51) PDF 671.76 K (2079) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:采用Meta分析综合评价慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期患者循环内皮祖细胞(circulating endothelial progenitor cells,cEPCs)水平的变化规律。方法:利用计算机检索Pubmed、Embase、Web of science数据库,收集国内外发表的有关COPD稳定期患者cEPCs水平的文献,经质量评价后按制定标准纳入文献,应用Stata14软件进行分析。结果:共纳入12项研究,包括550例研究对象。分析结果显示,COPD稳定期患者cEPCs水平明显低于对照组,结果合并后标准化均数差(standardized mean difference,SMD)为-1.38,95% 可信区间(confidence interval,CI)为-2.01~ -0.74,Z=4.23(P < 0.001)。亚组分析提示采用流式细胞计数cEPCs,COPD稳定期患者cEPCs水平显著低于健康人水平;而采用外周EPCs集落计数法发现COPD稳定期患者cEPCs数量与健康人之间无明显统计学差异。以敏感性分析、漏斗图法和剪补法分析表明结果稳定、可信。结论:COPD稳定期患者cEPCs水平较正常人显著降低,可能会减弱COPD内皮修复功能,特别是在采用流式细胞计数cEPCs时。

    • 对混合性毛玻璃样结节和单纯性毛玻璃样结节的临床Ⅰ期非小细胞肺癌患者进行淋巴结转移率比较的Meta分析

      2018(2):277-282. DOI: 10.7655/NYDXBNS20180231

      摘要 (1870) HTML (44) PDF 680.62 K (2103) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的:比较单纯性毛玻璃样结节(pure ground-glass opacity,Pure-GGO)和混合性毛玻璃样结节(mixed ground-glass opacity,Mixed-GGO)的临床Ⅰ期非小细胞肺癌患者肺门淋巴结与纵隔淋巴结的转移率,用以指导清扫毛玻璃样结节(ground-glass opacity,GGO)患者淋巴结的手术方式。方法:使用主要数据库(Science Direct、PubMed、Springer Link和Wiley Online Library),收集临床Ⅰ期非小细胞肺癌Pure-GGO和Mixed-GGO患者的相关病例对照研究,对已出版的文献进行系统综述;使用STATA 12.0从已出版的文献中提取数据进行Meta分析。Meta分析的结果用优势比(OR)及其相应的95%置信区间(CI)表示。结果:从3篇病例对照研究包括总计736例患者中提取数据。进行比较后发现,两组患者在总淋巴结转移率上没有显著性差异(OR=3.66,95%CI:0.68~19.58,P=0.13),在肺门淋巴结转移率上也没有显著性差异(OR=4.22,95%Cl:0.77~23.19,P=0.10),但是有研究OR高达20.18(95%CI:0.94~432.12)。两组患者的纵隔淋巴结转移率没有显著差异(OR=1.10,95% CI:0.19~6.32,P=0.92)。结论:虽然结果显示两组患者在肺门淋巴结和纵隔淋巴结的转移率方面没有统计学差异,但是仍不能排除Mixed-GGO患者的肺门淋巴结转移情况