摘要:目的：研究Pellino1蛋白翻译后修饰——小泛素相关修饰物（small ubiquitin-related modifier，SUMO）修饰对肿瘤坏死因子受体相关分子-6（TNF receptor associated factor 6，TRAF6）介导的核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）信号转导的影响。方法：构建Pellino1 SUMO修饰位点突变的质粒，与TRAF6、泛素（ubiquitin，Ub）质粒共转染至HEK-293细胞中，荧光显微镜观察转染效率，免疫共沉淀的方法检测突变型Pellino1与TRAF6的相互结合作用；同时，检测Pellino1和TRAF6的泛素化修饰水平。采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导炎症反应，分提胞浆胞核蛋白，Western blot检测核因子κB的抑制蛋白α（inhibitor of NF-κBα，IκBα）的磷酸化和NF-κB P65的核转位，分析Pellino1蛋白SUMO修饰突变对TRAF6介导的NF-κB信号通路的影响。结果：与野生型Pellino1相比，SUMO修饰突变型Pellino1不仅增加Pellino1的自身泛素化修饰水平，而且可增加其与TRAF6的相互结合作用，并增强TRAF6的泛素化修饰；LPS刺激可增加IκBα的磷酸化和NF-κB P65的核转位，转染使Pellino1 SUMO修饰突变高表达可明显增强LPS诱导的NF-κB信号激活。结论：Pellino1 SUMO修饰突变，可通过增加Pellino1的自身泛素化修饰及其与TRAF6的结合，增强TRAF6的泛素化，最终促进TRAF6介导的NF-κB信号通路的激活。

摘要:目的：探讨褪黑素（melatonin，MT）对两种横纹肌肉瘤细胞系RD、RH30增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法：MT处理RD与RH30细胞系，分别通过MTT、EdU、Transwell等方法检测两组细胞的增殖、迁移与侵袭的情况。Western blot检测MT作用前后细胞Sonic Hedgehog（Shh）信号通路下游转录因子Gli1表达水平的变化。在两组细胞中分别抑制和过表达Gli1后，检测细胞增殖、迁移与侵袭的情况改变。结果：MT能有效抑制RH30细胞的增殖、迁移与侵袭，但对RD细胞并无明显作用，并且MT受体抑制剂Luzindole不改变MT对RH30增殖的抑制作用。MT处理后RH30细胞中Gli1的表达呈下降趋势，且改变Gli1表达后细胞增殖、迁移、侵袭都发生了改变。结论：MT能够显著抑制RH30细胞的增殖、迁移和侵袭能力，其作用机制与MT能够抑制RH30细胞中Gli1的表达水平有关。

摘要:目的：研究Rho激酶抑制剂ripasudil对血小板源性生长因子（platelet-derived growth factor，PDGF）-BB诱导人肺动脉平滑肌细胞（human pulmonary arterial smooth cells，HPASMCs）增殖和迁移的影响及其相关机制。方法：培养HPASMCs，随机分为control组、PDGF-BB组、PDGF-BB+ripasudil组、ripasudil组。采用CCK-8法检测细胞活力；EdU掺入法检测HPASMCs增殖；Transwell实验检测HPASMCs迁移；Real-time PCR检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2 mRNA表达；Western blot检测MMP-2蛋白表达以及肌球蛋白磷酸酶目标亚基1（myosin phosphatase target subunit 1，MYPT1）、细胞外调节蛋白激酶1/2（extracellar regulated protein kinases 1/2，ERK1/2）、p38激酶和蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/Akt）的磷酸化。结果：与control组相比，ripasudil能显著抑制PDGF-BB诱导HPASMCs增殖及迁移（P＜0.01），降低MMP-2 mRNA及蛋白的表达（P＜0.05），下调MYPT1、ERK1/2、p38及Akt的磷酸化（P＜0.05）。结论：Ripasudil抑制PDGF-BB诱导的HPASMCs增殖和迁移，可能与下调MYPT1、ERK1/2、p38及Akt的磷酸化有关。Ripasudil可能是治疗肺动脉高压的潜在药物。

摘要:目的：探讨滋养层细胞表面抗原2（Trop2）对胃癌细胞化疗耐药的影响及机制。方法：应用慢病毒转染技术将Trop2 shRNA转染至BGC823细胞株，通过嘌呤霉素筛选出稳定转染质粒的细胞株；qRT-PCR、Western blot和免疫荧光方法检测质粒干扰效率；CCK-8细胞增殖试验和流式细胞术检测柔红霉素对BGC823细胞株增殖能力和细胞凋亡的影响；qRT-PCR、Western blot检测耐药相关基因TopoⅡα的mRNA和蛋白表达变化。结果：在稳定转染Trop2 shRNA质粒的shTrop2组中，Trop2 mRNA及蛋白表达水平较对照组（未处理）和shNC组（转染空载体质粒）明显下调；在相同药物浓度下，柔红霉素对shTrop2组的增殖抑制率明显高于对照组和shNC组，shTrop2组半数抑制浓度低于对照组和shNC组（P＜0.05），shTrop2组中柔红霉素诱导的细胞凋亡率显著高于对照组和shNC组（P＜0.05）；稳定干扰Trop2表达后耐药相关基因TopoⅡα的表达显著上调。结论：Trop2通过抑制TopoⅡα的表达，可增强胃癌细胞对柔红霉素的耐药性。

摘要:目的：探讨钙结合蛋白S100A16在胃癌组织和细胞中的表达，及其对胃癌细胞SGC-7901增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法：应用免疫组织化学染色法检测S100A16在胃癌和相应癌旁组织中的差异表达。应用Western blot检测正常胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞MGC-803和SGC-7901中S100A16的表达水平。将S100A16高表达质粒和干扰质粒分别转染至人胃癌细胞株SGC-7901中，用Western blot检测各组细胞中S100A16的表达。采用磺酰罗丹明B（sulforhodamine B，SRB）比色法和克隆形成实验检测细胞的增殖能力。采用划痕实验检测细胞迁移能力，采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果：在胃癌组织及胃癌细胞中，S100A16的表达量明显高于相应癌旁组织及正常胃上皮细胞。SRB染色和克隆形成实验显示，过表达S100A16会增加SGC-7901细胞的增殖能力，敲低S100A16后增殖能力降低。划痕实验Transwell实验显示，过表达S100A16会增加SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力，敲低S100A16则会降低。免疫共沉淀实验显示在胃癌细胞SGC-7901中，S100A16与YBX-1存在结合。结论：胃癌组织及细胞中S100A16的表达明显上调，S100A16在胃癌中的异常表达可能是由于与YBX-1的相互结合，进而促进胃癌细胞增殖、迁移、侵袭从而影响胃癌的发生发展。

摘要:目的：研究羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（HMG-CoA reductase degradation protein 1，HRD1）对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响，初步探讨其潜在机制。方法：通过Western blot和免疫组织化学实验检测HRD1和乳酸脱氢酶B（lactate dehydrogenase B，LDHB）在乳腺癌组织和相应癌旁组织中的表达。用腺病毒感染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7以过表达HRD1，观察HRD1和LDHB的表达水平，MTT实验和平板克隆实验检测细胞的增殖能力，Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果：与癌组织相比，HRD1在配对的癌旁组织中高表达，LDHB则呈低表达（P < 0.05）；过表达HRD1能够显著降低MDA-MB-231和MCF-7的增殖和迁移能力，差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：过表达HRD1可以降低乳腺癌细胞的增殖和迁移能力，其机制可能是通过下调LDHB蛋白的表达实现。

摘要:目的：通过设计特异性引物，应用荧光定量PCR方法检测c-Met CAR病毒感染T细胞的效率。方法：应用基因重组技术构建c-Met CAR（GFP）逆转录病毒质粒。应用病毒包装技术制备c-Met CAR病毒与c-Met CAR（GFP）病毒，感染T细胞制备c-Met CAR-T细胞与c-Met CAR-T（GFP）细胞。Western blot检测c-Met CAR和c-Met CAR（GFP）在293T细胞中表达的外源性CD3ζ蛋白。设计特异性引物应用荧光定量PCR检测CAR病毒对T细胞的感染效率，并与流式细胞术的检测结果进行比较。结果：构建c-Met CAR（GFP）质粒，荧光显微镜可观察到c-Met CAR（GFP）质粒在293T细胞上表达绿色荧光蛋白。c-Met CAR和c-Met CAR（GFP）病毒感染的293T细胞可表达外源性CD3ζ蛋白。荧光定量PCR检测c-Met CAR与c-Met CAR（GFP）的感染效率分别为（52.1 ± 1.7）%、（55.9 ± 2.3）%。流式细胞术检测c-Met CAR（GFP）病毒感染效率为（50.7 ± 3.6）%，两种检测方法比较差异无统计学意义（P > 0.05）。结论：通过设计特异性引物，应用荧光定量PCR方法能够特异性检测 CAR病毒对T细胞的感染效率，该检测方法结果准确、安全，对CAR-T细胞的临床应用具有实用价值。

摘要:目的：通过构建转铁蛋白受体-泛素（transferrin receptor-ubiquitin，TfR-Ubi）融合蛋白，研究胞内体蛋白分选机制。方法：首先扩增小鼠泛素和人源转铁蛋白受体基因，构建HA-TfR-Ubi表达质粒，转染A431细胞后，采用Western blot验证融合蛋白的表达。在稳定表达TfR-Ubi的A431和Hrs-KO MEF细胞株中，转铁蛋白刺激，免疫荧光法观察TfR-Ubi融合蛋白在细胞内的位置。结果：成功构建HA-TfR-Ubi表达质粒，免疫荧光结果提示TfR-Ubi融合蛋白被分选到晚期内体（late endosome）/溶酶体，Hrs-KO MEF细胞中TfR-Ubi融合蛋白分选受到影响。结论：TfR-Ubi融合蛋白在胞内体被分选，证明了泛素修饰改变了转铁蛋白受体的降解方式，为胞内体分选转运装置（endosomal sorting complex required for transport，ESCRT）分选机制研究提供了实验工具。

摘要:目的：检测Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况，并观察内毒素（lipopolysaccharides，LPS）对人牙周膜成纤维细胞Del-1表达的影响，探讨其在牙周炎进展中的可能作用机制。方法：组织块法取人牙周膜成纤维细胞，用细胞免疫荧光、流式细胞术及体外管腔形成试验鉴别细胞来源，细胞免疫荧光检测Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中的表达情况；用不同浓度LPS刺激细胞，检测Del-1蛋白的表达水平，以Del-1减少最显著的LPS浓度为最佳刺激浓度，再用该浓度的LPS刺激细胞不同时间，检测Del-1及炎症因子IL-6的表达水平；用不同浓度的Del-1蛋白预刺激细胞1 h，再用最佳浓度的LPS刺激细胞24 h，检测炎症因子IL-6的表达情况；用最适宜浓度的Del-1蛋白预刺激细胞1 h，再用LPS刺激细胞10 min，检测IκBα的激活情况。结果：Del-1蛋白在人牙周膜成纤维细胞中有表达，定位于细胞的胞浆中；LPS刺激细胞时Del-1的表达水平降低，并随浓度的升高和处理时间的延长而下降，IL-6的表达与之相反；Del-1蛋白可下调LPS诱导的炎症因子IL-6的表达，抑制IκBα的磷酸化。结论：本研究首次发现Del-1可以在人牙周膜成纤维细胞中表达，且在LPS刺激人牙周膜成纤维细胞时表达量降低，Del-1蛋白可通过抑制NF-κB通路的激活，在牙周炎的发生发展中发挥拮抗作用。

摘要:目的：探讨敲低肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor receptor-associated factor 6，TRAF6）对人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament cells，hPDLCs）在低氧状态经白介素17（interleukin 17，IL-17）刺激表达骨保护素（osteoprotegerin，OPG）及核因子κB受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor-κB ligand，RANKL）的影响。方法：将hPDLCs细胞设为常氧加IL-17组、低氧加IL-17组以及单纯低氧组，每组内分为阴性对照组（TRAF6-NC组）和干扰组（TRAF6-shRNA组）。将靶向TRAF6基因的shRNA慢病毒载体（TRAF6-shRNA）感染hPDLCs，通过倒置显微镜观察病毒感染效率并用RT-PCR方法验证，用Western blot及RT-PCR方法检测分析hPDLCs低氧诱导因子（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）、OPG及RANKL的表达变化。结果：低氧加IL-17组RANKL与OPG蛋白相对表达量的比值RANKL/OPG高于常氧加IL-17组及低氧组。在低氧加IL-17条件下，与TRAF6-NC组相比，TRAF6-shRNA组RANKL表达减少，RANKL与OPG相对表达量的比值RANKL/OPG减少。结论：TRAF6参与低氧状态下IL-17刺激hPDLCs表达骨吸收分子的调控，敲低TRAF6可使低氧状态下IL-17诱导的hPDLCs表达骨吸收分子减少。

摘要:目的：探讨脂联素（adiponectin，APN）对氧化应激下大鼠髓核细胞凋亡和细胞外基质（extracellular matrix，ECM）退变的保护作用及相关机制。方法：原代培养SD大鼠髓核细胞，CCK-8法检测细胞活力，以确定APN的最适保护浓度。将细胞分为对照组、H2O2组、APN+H2O2组及Compound C+APN+H2O2组，流式细胞术检测凋亡率，Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）及带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶-5（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-5，ADAMTS-5）等蛋白的表达，RT-PCR检测Ⅱ型胶原（collagen type Ⅱ alpha 1 chain，COL2A1）、蛋白聚糖（aggrecan，ACAN）的mRNA水平，Western blot评估5′-单磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase，AMPK）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）的磷酸化水平。结果：1 μg/mL APN对200 μmol/L H2O2所致的细胞毒性起最佳拮抗作用。APN预处理显著抑制H2O2诱导的髓核细胞凋亡。相应地，Bax/Bcl-2比值及Cleaved Caspase-3 表达的增加也被APN抑制。尽管对ADAMTS-5无明显抑制作用，APN降低了H2O2诱导的MMP-13的表达。此外，H2O2对COL2A1及ACAN转录的抑制作用也被APN显著缓解。APN还促进AMPK磷酸化并抑制mTOR磷酸化，而AMPK抑制剂Compound C显著减轻了APN对mTOR磷酸化的抑制作用。APN对凋亡、分解代谢的抑制作用及其对合成代谢的促进作用也均被Compound C逆转。结论：APN通过AMPK/mTOR通路抑制H2O2诱导的大鼠髓核细胞凋亡及ECM退变。

摘要:目的：探讨应用改良方法制作的软骨细胞外基质（extracellular matrix，ECM）能否构建高质量组织工程软骨。方法：应用传统匀浆-脱细胞方法制作软骨ECM粉末，在此基础上通过物理研磨颗粒筛选获得细腻的软骨细胞外基质粉末（fine extracellular matrix，FECM）。将两种粉末通过冷冻干燥法制成ECM支架和FECM支架作为对照组和实验组。以软骨组织工程中成熟应用的聚乳酸聚羟基乙酸聚合物［poly（lactic-co-glycolic acid），PLGA］支架为阳性对照组。取等量大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）种植于ECM支架和FECM支架，同时将BMSCs诱导分化为软骨细胞后种植于PLGA支架，然后将3种细胞-支架复合物移植入裸鼠皮下，28 d后取出样本并进行相关检测。结果：FECM支架孔径均一，结构规整，其构建的组织工程软骨在大小、色泽、糖胺多糖（sGAG）分泌以及胶原沉积等方面均远优于对照组构建的组织工程软骨，与阳性对照组无明显差异。结论：由改良方法制作的FECM支架在无外源性转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）情况下可构建出高质量的组织工程软骨，具有潜在的临床应用价值。

摘要:目的：构建一种自控式缓释系统，能持续、有效地控制大鼠体内异常增高的铬、钴离子。方法：制备负载乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）的缓释系统。通过膝关节腔注射铬钴钼（CoCrMo）纳米微粒悬液构建体内铬、钴离子升高的大鼠模型。将大鼠模型随机分为4组，分别经腹腔注射生理盐水（生理盐水组）、EDTA溶液（EDTA组）、二氧化硅微球空载体溶液（空载组）及载有EDTA的自控式缓释系统溶液（载药组）。在此过程中继续注射纳米颗粒悬液，观察大鼠血清铬、钴离子浓度的变化。结果：在经过药物治疗之后，短期内EDTA组和载药组金属离子浓度均显著降低。而随着时间延长，EDTA组大鼠血清金属离子浓度迅速回升，载药组则保持相对正常，差异具有统计学意义。结论：这种自控式缓释系统能持续有效降低实验动物体内异常增高的金属离子，为治疗金对金人工关节置换术后金属离子的异常增高提供选择。

摘要:目的：探讨黄芪甲苷（astragaloside IV，AS-IV）联合依那普利治疗急性心肌梗死小鼠对心功能改善及其促血管新生的作用机制。方法：24只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术（Sham）组、对照（CTL）组、依那普利（Enalapril）组、黄芪甲苷+依那普利（AS-IV+Enalapril）组，除Sham组外，对CTL组、Enalapril组、AS-IV+Enalapril组3组小鼠均行冠状动脉左前降支结扎术构建心梗模型。对Enalapril组（Enalapril 7.5 mg/kg）、AS-IV+Enalapril组（AS+IV 10 mg/kg + Enalapril 7.5 mg/kg）小鼠分别以对应药物进行治疗。2周后行超声检查测定心功能。以HE染色观察心脏病理改变。以CD31/VEGFR3免疫荧光染色观察各组血管密度及血管新生情况。结果：与CTL组相比，Enalapril组和AS-IV+Enalapril组小鼠心功能得到明显改善，且AS-IV+Enalapril组优于Enalapril组；CD31/VEGFR3双荧光染色显示，与CTL组相比，Enalapril组和AS-IV+Enalapril组小鼠梗死边缘区血管密度增高，新生血管比率增高，且AS-IV+Enalapril组优于Enalapril组。结论：黄芪甲苷联合依那普利可有效改善急性心肌梗死后小鼠的心功能，并可促进心肌梗死边缘区血管新生。

摘要:目的：探讨miR-141调控胰腺癌细胞增殖的机制。方法：采用qRT-PCR检测正常胰腺细胞和4种胰腺癌细胞株中miR-141的表达。从Gene Expression Omnibus数据库（GEO）下载包含36例胰腺癌样本和16例正常样本的GSE71533 miR-141表达文件，分析miR-141在胰腺癌及癌旁的表达差异。Western blot 检测Bmi-1在正常胰腺细胞和4种胰腺癌细胞株中的表达。荧光素酶报告基因检测miR-141和Bm-1之间的靶向关系。通过CCK8、平板克隆形成检测Bmi-1和miR-141对胰腺癌细胞增殖能力的影响。结果：qRT-PCR显示与正常胰腺细胞相比，miR-141在胰腺癌细胞中表达下调；GSE71533数据集分析结果也显示miR-141在胰腺癌组织中下调；Western blot分析结果表明Bmi-1在胰腺癌细胞中高表达，双荧光素酶实验表明miR-141锚定在Bmi-1的3′非编码区，下调Bmi-1可以抑制胰腺癌细胞的增殖；上调miR-141可以降低Bmi-1的蛋白质表达水平，从而抑制胰腺癌细胞中细胞增殖。结论：miR-141通过靶向Bmi-1在胰腺癌中起抑制作用，在胰腺癌诊疗中具有潜在功能。

摘要:目的：通过调整腺嘌呤饮食中的磷水平，建立慢性肾脏病伴高磷血症的小鼠模型。方法：将雄性C57BL/6小鼠分为腺嘌呤饮食组（腺嘌呤0.2%，钙1.0%，磷0.6%）及其对照组（钙1.0%，磷0.6%）、腺嘌呤联合高磷饮食组（腺嘌呤0.2%，钙0.6%，磷1.0%）及其对照组（钙0.8%，磷0.6%），每组各7只。于造模前、造模4周记录体重，测血尿素氮（BUN）、钙（Ca）、磷（P）水平，4周后取肾脏组织，RT-PCR检测肾纤维化指标包括Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）、纤连蛋白（fibronectin，FN）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）以及炎症指标肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）等的表达情况。结果：与相应的对照组比，腺嘌呤饮食组4周时体重降低，血BUN明显升高，为（41.15 ± 4.59）mmol/L；Ca、P轻度升高，分别为（2.62 ± 0.16）mmol/L、（2.22 ± 0.26）mmol/L（P < 0.05）。腺嘌呤联合高磷饮食组造模4周时血BUN［（14.68 ± 3.57）mmol/L］轻度升高、P［（2.97 ± 0.29）mmol/L］明显升高（P < 0.05），血Ca水平无明显差异。RT-PCR显示腺嘌呤饮食组和腺漂呤联合高磷饮食组小鼠肾脏组织中CollagenⅠ、FN、PAI-1、TNF-α、IL-1β、ICAM-1表达水平均较相应对照组升高。结论：腺嘌呤联合高磷饮食饲喂C57BL/6小鼠4周即可建立高磷血症模型，同时伴有轻度肾功能下降、肾脏纤维化，是制备慢性肾脏病伴高磷血症小鼠模型的可行方法。

摘要:目的：观察雄激素对卵巢颗粒细胞乳酸生成的抑制作用，探讨多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）高雄激素状态下的颗粒细胞乳酸生成及其对卵泡发育的影响。方法：体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞，用不同浓度睾酮（0.1~1 000 nmol/L）处理不同时间（0~48 h）。测定培养上清液中乳酸含量，采用实时聚合酶链反应（real-time PCR）以及蛋白质印迹法（Western blot）分别检测细胞内乳酸脱氢酶A（LDHA）和乳酸脱氢酶B（LDHB）的mRNA及蛋白质表达水平。结果：人卵巢颗粒细胞系KGN细胞经1 000、100、1 nmol/L睾酮处理24 h或者1、10 nmol/L睾酮处理24及36 h后，其乳酸生成量显著减少（P < 0.05）。并且，在100、1 nmol/L睾酮处理24 h后，KGN细胞内LDHA、LDHB的mRNA及蛋白质表达水平显著降低（P < 0.05）。结论：较高浓度雄激素通过抑制卵巢颗粒细胞内LDHA、LDHB的表达从而降低乳酸生成，可能与PCOS卵泡发育障碍相关。

摘要:目的：探讨抑制巨噬细胞产生促炎性细胞因子对子宫内膜异位症孕酮拮抗的影响。方法：原代培养15例异位子宫内膜基质细胞（endometrial stromal cells，ESCs），趋化实验检测异位ESCs表达的趋化因子配体12（CXCL12）对巨噬细胞的趋化能力。脂质体法介导核因子（nuclear factor，NF）-κB诱捕寡核苷酸（oligonucleotide，ODNs）转染巨噬细胞后再用100 ng/mL脂多糖刺激培养巨噬细胞，电泳迁移率分析（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）法检测脂多糖刺激条件下巨噬细胞中NF-κB的活化水平，ELISA检测巨噬细胞白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）表达水平的变化。建立异位ESCs和巨噬细胞的共培养系统，检测通过NF-κB诱捕ODNs抑制巨噬细胞表达促炎性细胞因子对异位ESCs蜕膜化的影响。结果：异位ESCs分泌的CXCL12对巨噬细胞具有趋化作用。NF-κB诱捕ODNs能显著抑制脂多糖诱导的巨噬细胞表达促炎性细胞因子。在巨噬细胞和异位ESCs的共培养系统中，NF-κB诱捕ODNs能通过抑制巨噬细胞产生促炎性因子提高异位ESCs对孕酮的反应。结论：通过NF-κB诱捕ODNs抑制巨噬细胞产生促炎性细胞因子有可能是减轻内异症炎症反应和改善孕酮抵抗的一种方法。

摘要:目的：观察不同剂量右美托咪定（dexmedetomidine，DEX）预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法：50只健康雄性SD大鼠，随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、小剂量右美托咪定组（D1组）、中等剂量右美托咪定组（D2组）、较大剂量右美托咪定组（D3组）。Sham组仅行外科操作而不造成缺血，Sham组、I/R组于外科操作前30 min腹腔注射生理盐水1 mL，D1、D2、D3组分别于缺血操作前30 min腹腔注射DEX 50、100、200 μg/kg。各组分别于术后24、48 h检测S100β蛋白含量，术后48 h测定Bcl-2、Bax含量及脑梗死体积比。结果：与Sham组相比，D1、D2、D3组S100β、Bax蛋白含量及脑梗死体积比均升高（P＜0.05），Bcl-2含量降低（P＜0.05）；与I/R组相比，D1、D2、D3组S100β、Bax蛋白含量及脑梗死体积比均降低（P＜0.05），Bcl-2含量升高（P＜0.05）；D1、D2、D3组间相比，D3组Bcl-2含量较D1、D2组降低（P＜0.05），术后24 h S100β蛋白含量较D1、D2组升高（P＜0.05），D1、D2组间差异无统计学意义；D1、D2、D3组间术后48 h S100β、Bax蛋白含量及脑梗死体积比差异无统计学意义。结论：右美托咪定预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有神经保护作用，其机制可能与抑制细胞凋亡有关，此作用在50和100 μg/kg间无明显差异。

摘要:目的：探讨存在混杂因素时高维数据中随机森林（random forest，RF）的分析方法。方法：通过模拟实验和实例数据分析对单纯随机森林分析、增加节点候选变量为最大值以及基于广义线性模型的残差校正混杂因素的结果进行比较，以重要变量的重要性评分排序情况进行评价。结果：模拟实验表明，增加节点候选变量的方法对混杂因素的校正效果不明显，而基于广义线性模型残差的方法能有效校正混杂效应；实际数据分析结果显示单纯随机森林分析rs3754686和rs2322660分别排在第一和第二位。增加节点候选变量后rs3754686排序变化较小，而基于残差的方法校正人群分层后这两个单核苷酸多态位点（SNPs）的排序大幅度降低，从而打破乳糖酶（LCT）基因与身高之间的虚假关联。结论：随机森林分析需要考虑混杂因素问题，基于广义线性模型的残差能有效校正混杂因素，适用于高维数据的变量筛选。

摘要:目的：采用基因芯片技术检测耐药结核病菌株异烟肼耐药位点inhA-15（C-T）突变，为耐药结核病患者治疗提供指导。方法：从2014年1月1日~2016年12月31日，在江苏省连云港市结核病定点医院连续纳入涂阳结核病患者，利用基因芯片技术检测菌株利福平耐药相关基因ropB以及异烟肼耐药相关基因katG和inhA的野生型及不同突变型。以传统药敏结果为金标准，分析异烟肼耐药相关位点inhA-15（C-T）的突变。结果：共有1 356例肺结核患者纳入最终结果分析，通过基因芯片技术检测1 356例患者痰涂片标本，22例（12.2%）仅出现了inhA位点突变不伴随katG位点突变，其中耐多药结核病（multidrug-resistant tuberculosis，MDR-TB）3例占15.4%，早期广泛耐药结核（early extensive drug resistant tuberculosis，pre-XDR-TB）1例占7.7%，广泛耐药（extensively drug-resistant，XDR-TB）菌株3例占23.1%。有32例（17.7%）出现了inhA位点突变和（或）katG位点突变，其中12例（23.1%）MDR-TB患者，3例（23.1%）为pre-XDR-TB患者，3例（23.1%）为XDR-TB患者。结论：超过10%耐药结核病患者的菌株出现了inhA-15位点的单突变，说明大剂量异烟肼可以用于治疗这些耐药患者。尽管乙（丙）硫异烟胺已经广泛应用于耐多药患者治疗中，但是近20%的耐药患者对其已经产生了耐药。基因芯片技术特异性报告耐药结核病患菌株的者位点突变，将对临床用药有一定的指导作用。

摘要:目的：探讨浆液性卵巢癌高HOXA9表达的临床病理意义。方法：对178例浆液性卵巢癌患者、72例卵巢交界性肿瘤患者和69例良性卵巢肿瘤患者进行HOXA9免疫组织化学染色。HOXA9高表达与卵巢癌临床病理特征的关系采用χ2检验和Fisher精确检验。采用Kaplan-Meier法计算总生存（OS）率，用Cox比例风险模型分析预后因素与患者生存期的关系。结果：浆液性卵巢癌中HOXA9蛋白表达阳性率（75.8%，135/178）明显高于良性浆液性肿瘤（34.8%，24/69，P < 0.05）。同样，浆液性卵巢癌中HOXA9蛋白强阳性表达率（59.6%，106/178）明显高于良性浆液性肿瘤（11.6%，8/69，P < 0.05）。高级别（65.1%，71/109）卵巢癌中强阳性HOXA9蛋白表达率显著高于低级别病例（47.8%，33/69，P=0.014），同样转移卵巢癌中HOXA9蛋白强阳性表达率（72.6%，69/95）显著高于无转移卵巢癌（42.2%，35/83，P < 0.001）。关于FIGO临床分期，晚期（ⅡB~ⅢC）卵巢癌中强阳性HOXA9表达率为69.1%（65/94），而在早期（I~IIA期）病例中仅为46.4%（39/84），两者比较差异有统计学意义（P=0.003）。HOXA9强表达患者的OS率低于HOXA9弱表达患者（Log-rank=43.765，P < 0.001）。多因素分析显示，HOXA9是卵巢癌患者的独立预后因子。结论：HOXA9的表达与卵巢癌的分级和转归密切相关，可作为临床治疗有用的特异性标志物。

摘要:目的：利用超声造影成像技术评估重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome，OSAS）患者颈动脉斑块内新生血管的强化特征。方法：选择42例确诊为重度OSAS的患者为试验组，再选取33例无OSAS疾病史但有颈动脉斑块的患者为对照组。分别对两组患者进行颈动脉斑块超声造影，测量造影后颈动脉斑块的最大厚度，并对斑块内新生血管强化特征进行分级。用多导睡眠呼吸监测（polysomnograph，PSG）测得OSAS患者的睡眠呼吸暂停低通气指数（apnea-hypopnea index，AHI）和最低脉氧饱和度（minimal pulse oxyhemoglobin saturation，miniSpO2）等血氧饱和度相关指标，并与斑块内新生血管强度（intraplaque neovascularization，IPN）之间进行相关回归分析。结果：通过超声造影IPN定性分析发现，OSAS组颈动脉斑块以Ⅱ型（47.6％）为主，对照组以Ⅰ型（63.6％）为主，两组间差异具有统计学意义（P < 0.05）。OSAS组患者颈动脉斑块IPN与斑块边界呈正相关（r=0.395，P < 0.05），与miniSpO2呈负相关（r=-0.448，P < 0.01）。通过多元线性回归分析显示病例组中斑块边界、miniSpO2是IPN（R2=0.340，F=10.024，P < 0.001）的独立预测因素。结论：通过超声造影发现重度OSAS患者颈动脉斑块内新生血管具有较高的发生率，对初步评估斑块的稳定性提供相关临床价值。

摘要:目的：总结椎旁肌间隙入路（Wiltse入路）在切除椎旁肿瘤中的应用、疗效及优点。方法：以手术治疗的9例胸腰椎椎旁肿瘤患者为研究对象。9例术前均完善MR/CT检查，术中C臂机定位，采用Wiltse入路行肿瘤切除。并于术后第3天、术后3个月及9个月复查MR。平均住院时间5 d，所有患者随访4~10个月，平均随访时间8个月。结果：9例术后病理均为神经鞘瘤。症状均有明显改善。切口均一期愈合，无感染，术后复查MR肿瘤切除满意。随访患者无肿瘤复发，神经功能活动未受影响。结论：Wiltse入路充分利用肌肉间自然间隙，能更好地保护椎旁组织，减少术后并发症，提高手术疗效，值得在神经外科椎旁肿瘤等手术中运用。

摘要:目的：探讨基于图文分析软件的尿红细胞形态学参数在鉴别肾源性血尿和非肾源性血尿中的诊断价值。方法：回顾性分析明确诊断的血尿患者99例，其中肾源性血尿48例，非肾源性血尿51例。将留取的尿液离心处理后留取沉渣，相差显微镜下医学影像工作站捕捉红细胞图片，人工标定红细胞（≥100个），图文分析系统测量红细胞参数，并与患者临床诊断的符合情况进行统计分析。结果：由测得的100个尿红细胞可得出单个患者的红细胞平均半径、标准差（SD）和变异系数（CV），累计上述数据得到肾源性血尿组和非肾源性血尿组总红细胞半径均值（x）、总标准差和总变异系数，分析两组间的数据有显著性差异（P < 0.05）。在肾源性血尿组，以红细胞半径变异系数作ROC曲线，曲线下面积为0.972。结论：基于图像分析技术所得的红细胞形态学参数，初步得出的分析数据对辅助诊断肾源性血尿和非肾源性血尿具有一定参考价值。

摘要:结直肠癌是消化系统的常见疾病，近30年来发病率一直呈升高趋势，其发病机制尚不完全清楚，许多研究表明结直肠癌的发生与遗传、饮食、炎症等因素相关。目前，一些针对结直肠癌的化学预防治疗药物在临床研究中展现出了令人惊喜的效果。已证实这些药物可激活核因子E2相关因子，后者促进启动子区域含有抗氧化应激反应元件的一系列二相解毒酶和抗氧化酶基因的表达，从而保护机体免受化学致癌剂的伤害，发挥肿瘤预防作用。本文将结合激活核因子E2相关因子功能与作用机制的报道，综述其在结直肠癌化学预防治疗中的最新研究进展。

摘要:RNA结合基序4（RNA-binding motif 4，RBM4）是一个参与不同细胞生物学过程的RNA结合蛋白（RNA-binding protein，RBP），其结构包含两个RNA识别基序和一个CCHC型锌指结构。RBM4表达于多种组织，参与前体mRNA的选择性剪接、翻译控制和RNA沉默等转录后基因调控过程。RBM4具有多种生物学功能，包括维持胚胎和性腺发育、控制昼夜节律及介导细胞分化等。RBM4的表达异常可导致多种疾病的发生，特别是与肿瘤的关系密切，但具体分子机制尚需进一步研究。文章就RBM4的相关研究进展作一综述。

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