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  • 1  淋巴毒素受体信号介导组织再生的研究进展
    胡诤贇,史建伟,周国平
    2022(7):1036-1042. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220719
    [摘要](103) [HTML](8) [PDF 1.34 M](388)
    摘要:
    淋巴毒素α、β及其受体(lymphotoxin alpha receptor、lymphotoxin beta receptor,LTAR、LTBR)属于肿瘤坏死因子超家族,LTBR 信号在淋巴器官发育、维持完整的淋巴结构、诱导抗病原体的免疫反应、介导器官组织的再生和肿瘤发生发展的过程中发挥了重要作用。LTBR信号主要通过非经典/经典核转录因子?κB(nuclear transcription factor?kappa B,NF?κB)通路的信号转导来诱导趋化因子和黏附分子的分泌,从而促进细胞增殖与分化。LTBR信号不仅在自身免疫系统疾病中发挥作用,而且通过不同模型展现了其抗癌与促癌的双重功效。本文将重点围绕LTBR信号在多种器官生长发育和组织受损后的再生中所发挥的作用进行综述,以期为再生医学研究提供新的视角。
    2  母体微生物群对妊娠并发症及子代发育的影响
    徐影,刁飞扬
    2022(7):1030-1035. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220718
    [摘要](20) [HTML](8) [PDF 1.18 M](45)
    摘要:
    人体微生物群与宿主构成了相互制约、相互协调的微生态平衡,对人类健康而言不可或缺。各种原因导致的微生态失衡可能是人体多种疾病的重要致病因素。近年来,对女性生殖道、肠道微生物群与疾病的研究取得了突破性进展,提示其对妊娠期糖尿病、早产及先兆子痫等妊娠并发症的发生、发展和预后可能起重要作用。此外,母体生殖道、乳汁和肠道等部位的微生物群还可能影响新生儿代谢、免疫系统和神经系统的发育和功能。本文选择女性生殖道和肠道微生物群对妊娠并发症及子代发育影响的相关研究进行综述,以期为相关研究提供新视角、新思路。
    3  m5C甲基化相关基因预测肾透明细胞癌的预后
    陈晓超,卜恒涛,梁超,李杰
    2022(7):983-993. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220711
    [摘要](28) [HTML](3) [PDF 3.15 M](60)
    摘要:
    目的:利用肿瘤基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中的数据,构建m5C甲基化相关基因组成的生存预后模型,分析与肾透明细胞癌生存有关的独立预后影响因素以预测肾透明细胞癌患者的预后。方法:从TCGA数据库下载肾透明细胞癌患者资料,从已发表的文献中获取m5C甲基化相关基因并分析其在肿瘤组和对照组间的表达差异。对这些基因进行共识聚类分析以揭示m5C甲基化相关基因与肾透明细胞癌预后之间的关系。通过单变量Cox分析和Lasso?Cox回归分析构建出生存预后模型并分析与肾透明细胞癌相关的预后影响因素,GO和KEGG富集分析进一步探索生物功能和潜在的信号通路。通过qRT?PCR验证m5C甲基化相关基因在肾透明细胞癌细胞系及组织和正常肾细胞系及组织之间的差异表达。 结果:m5C甲基化相关基因在肾透明细胞癌肿瘤组和正常组之间存在差异性表达。共识聚类分析结果显示亚群1的肾透明细胞癌患者预后优于亚群2。构建的生存预后模型将肾透明细胞癌分为高风险组和低风险组,单变量和多变量Cox分析显示分级和分期可能是肾透明细胞癌的独立预后因素,而GO和KEGG分析显示m5C?RNA甲基化修饰可影响肾透明细胞癌的进展。 此外,qRT?PCR实验也证实m5C甲基化相关基因在肾透明细胞癌肿瘤组和正常组之间表达存在差异。结论:本文构建的m5C 甲基化相关基因的生存预后模型可以预测肾透明细胞癌患者的预后。
    4  生物降解Mg增强PLA复合膜用于引导骨再生的抗菌性能研究
    王萍,王先丽,吴迪,白晶,路萌萌,汤春波
    2022(7):965-972. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220708
    [摘要](15) [HTML](3) [PDF 2.26 M](53)
    摘要:
    目的:探讨生物可降解镁(magnesium,Mg)增强聚乳酸(polylactic acid,PLA)复合膜的抗菌功能。方法:将不同比例的镁颗粒负载于聚乳酸基质中制备Mg/PLA复合膜,用于引导骨再生(guided bone regeneration,GBR)。利用扫描电子显微镜观察样品表面形貌,电子万能试验机检测复合材料力学性能变化,并测试材料24 h内于磷酸盐缓冲液中降解引起的pH变化。同时,用MC3T3?E1细胞系、L929细胞系以CCK?8法检测材料降解产物的生物相容性。用扫描电子显微镜、细菌平板计数观察大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在材料表面的生长情况。结果:10%wt和 20%wt的镁添加量增强了材料的力学强度,而Mg含量过高 (40%wt)则削弱了其对PLA机械性能的增强作用。无论是PLA还是任一复合材料的降解产物都表现出良好的生物相容性。 而且,20%wt Mg/PLA和40%wt Mg/PLA复合膜具有明显的抗菌作用,且抑菌率随着Mg含量的增加而提高。结论:一定Mg负载量的Mg/PLA复合材料对聚合物机械性能和抗菌作用有较好的改善,有望作为屏障膜材料应用于口腔组织缺损的治疗。
    5  温度/超声双重响应型相变液滴对水凝胶结构性能的调控
    赵婵,刘昊,陈洁莹,徐雪琴,胡克,段磊
    2022(7):948-956. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220706
    [摘要](15) [HTML](5) [PDF 2.27 M](44)
    摘要:
    目的:制备温度/超声双重响应型脂质相变液滴(lipid phase?change droplet,LPCD),并将其与水凝胶进行复合,通过温度或低强度聚焦超声(low intensity focused ultrasound,LIFU)调控LPCD的内核发生液?气相转变,继而调控水凝胶的结构和力学性能。方法:首先通过薄膜水化法制备出脂质膜壳的全氟己烷(perfluorohexane,PFH)相变液滴,对其在温度和LIFU调控下的形貌变化、相转变能力进行表征,同时评估液?气相变前后LPCD的超声造影能力。在此基础上将其与水凝胶进行复合,通过各项表征评估温度/超声引起的液滴相变对水凝胶内部结构、浮力和机械性能的影响。结果:LPCD在温度或超声调控下有良好的相转变能力和超声造影能力。脂质液滴相变可使水凝胶内部生成直径在微米量级的诸多气孔,浮力得到显著提高, 压缩应力和溶胀性能也有所变化。结论:脂质相变液滴?水凝胶复合材料(LPCD@Hy)是一种有潜力的智能响应型诊疗用微纳材料。
    6  ALCAT1缺失在KRAS诱导肺腺癌中的作用及机制研究
    张潇月,郑月,蒋厅,史裕光
    2022(7):932-940. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220704
    [摘要](32) [HTML](17) [PDF 2.06 M](47)
    摘要:
    目的:探究心磷脂酰基转移酶 1(cardiolipin acyltransferase 1,ALCAT1)在 Kirsten 大鼠肉瘤病毒癌基因同源物 (Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog,KRAS)诱导的肺腺癌中的作用及机制。方法:动物实验:在CC10rtta?KRAS小鼠中敲除ALCAT1基因,并使用多西环素饮食诱导肺腺癌发生,通过微计算机断层扫描(micro?computed tomography,micro?CT)以及 HE染色分析小鼠肺腺癌的发生。细胞实验:将A549细胞分为对照组、Jenu组、缺氧组、缺氧+Jenu组,通过氯化钴(CoCl2)处理模拟缺氧条件,并使用ALCAT1抑制剂Jenu抑制其酶活性;试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和乳酸水平, RT?PCR 和 Western blot 分析相关信号分子的 mRNA 转录以及蛋白表达。结果:动物实验结果显示,ALCAT1 缺失减缓小鼠肺腺癌发展,肺部肿瘤体积减小。细胞实验结果显示,Jenu显著降低缺氧条件下ROS 和乳酸的生成,并下调缺氧诱导因子 1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF1α)表达以及Akt磷酸化水平。结论:ALCAT1缺失可以抑制ROS生成并下调HIF1α表达以及Akt磷酸化水平,从而改善肿瘤糖酵解代谢,最终减缓肺腺癌的发展。
    7  宫内发育迟缓小鼠妊娠期胰岛lncRNA和mRNA的表达谱分析
    王莉,袁逸,唐艺,孙璐,袁庆新
    2022(7):921-931. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220703
    [摘要](29) [HTML](16) [PDF 1.71 M](51)
    摘要:
    目的:对正常孕鼠和宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)小鼠孕期胰岛RNA进行高通量测序分析, 筛选出差异表达的长链非编码RNA(long non?coding RNA,lncRNA)和信使RNA(messenger RNA,mRNA),为深入探讨IUGR孕鼠胰岛功能障碍的发病机制提供理论基础。方法:提取IUGR成年后孕鼠和正常孕鼠胰岛RNA并进行高通量测序,筛选出差异表达的lncRNA和mRNA,进行lncRNA和mRNA关联分析,对lncRNA相关的靶mRNA进行GO功能注释分析、KEGG通路富集分析,重点关注高差异表达且可能影响孕期胰岛功能的lncRNA。结果:IUGR孕鼠和正常孕鼠差异表达的lncRNA 1 007个, 其中483个上调,524个下调;差异表达的mRNA 50个,其中22个上调,28个下调。对差异lncRNA的靶mRNA和差异mRNA进行功能分析,GO分析示它们参与的生物学途径集中于细胞及组织过程、生物调节、代谢及应激过程;分子功能集中在整合、催化活性、转运活性、分子功能调节等方面;KEGG分析示它们主要集中在代谢、癌症、次生代谢产物的生物合成、PI3K?AKT及 MAPK 通路。对差异表达的lncRNA FTX 和Neat1进一步分析表明,IUGR 孕鼠和正常孕鼠的FTX 表达量分别较未孕时下降 (P < 0.001),而 Neat1上升(P < 0.01);FTX、Neat1表达量在IUGR孕鼠和正常孕鼠间有显著差异(P < 0.05),且表达量受糖浓度调节。lncRNA FTX与其靶mRNA均为反式(trans)作用,lncRNA Neat1与Frmd8为顺式(cis)作用,余为trans作用。结论:本研究筛选出IUGR孕鼠和正常孕鼠胰岛中差异表达的lncRNA和mRNA,lncRNA通过不同互作关系调控靶mRNA,调节糖代谢过程。
    8  解痉多肽表达性化生的发生机制及与胃癌发病关系的研究进展
    王云飞,安方梅,占 强
    2022(6):880-885. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220619
    [摘要](50) [HTML](143) [PDF 476.09 K](352)
    摘要:
    胃癌的早期诊治对患者的预后至关重要,研究胃癌前病变发生机制有望实现对胃癌的早期防治。解痉多肽表达化生(spasmolytic polypeptide expressing metaplasia,SPEM)是近年发现的重要的胃癌前病变,与胃癌的发生关系密切,但具体调控机制不详。本文着重就SPEM的发生、发展过程及与胃癌发病之间关系的研究现状做一综述,为胃癌发病机制的研究提供新思路,为胃癌早期防治提供新理论。
    9  18F⁃FDG PET/CT预测肺腺癌EGFR基因突变状态的研究进展
    夏 鹏,唐立钧,丁重阳,李天女
    2022(6):875-879. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220618
    [摘要](30) [HTML](27) [PDF 433.35 K](58)
    摘要:
    近年来原发性肺癌的靶向药物研究飞速发展,其中针对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因靶点的药物EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR?tyrosine kinase inhibitor,EGFR?TKI)对绝大多数EGFR突变型患者有很好的疗效。但EGFR?TKI对于野生型患者或者耐药性突变患者疗效甚微。因此行靶向治疗之前必须对EGFR突变状态进行检测。18F?脱氧葡萄糖(18F?fluorodeoxyglucose,18F?FDG)正电子发射型计算机断层显像/计算机体层成像(positron emission computed tomography/computed tomography,PET/CT)则可以在患者没有条件行有创性基因检测时对EGFR的突变状态进行预测评估。本文就18F?FDG PET/CT显像预测肺腺癌EGFR基因突变状态的研究进展进行综述。
    10  消融联合化疗和单纯化疗在Ⅳ期胰腺癌治疗中的临床和实验研究
    钱祝银,余建和,程 志,陈奕秋,朱一超
    2022(6):849-853. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220613
    [摘要](30) [HTML](13) [PDF 507.37 K](56)
    摘要:
    目的:比较术中消融联合化疗和单纯化疗在Ⅳ期胰腺癌治疗中的效果,并初步探讨消融联合化疗的潜在细胞学机制。方法:入选南京医科大学第二附属医院收治的Ⅳ期胰腺癌患者,分为单纯化疗组(化疗组,n=13)与术中消融联合化疗组(消融组,n=14),分析患者临床资料,对比肿瘤指标、血常规指标及术后生存期等。同时,采用Boyden小室建立人胰腺癌细胞渗透性实验模型,探究超低温冷冻对人胰腺癌细胞渗透性的影响。结果:消融组治疗后总胆红素(total bilirubin,TB)显著低于化疗组,而白蛋白(albumin,ALB)显著高于化疗组(P < 0.01)。两组CA19?9在治疗前后均没有显著差异。消融组治疗前后的白细胞数和中性粒细胞百分比均低于化疗组(P < 0.05)。消融组治疗前血小板数高于化疗组(P < 0.05)。化疗组治疗后的红细胞数显著低于治疗前(P < 0.01)。消融组治疗后的中性粒细胞百分比显著高于治疗前(P < 0.01)。消融组术后的生存期显著优于化疗组(P=0.019)。经过超低温冷冻的胰腺癌细胞渗透性显著增强(P < 0.01)。结论:术中消融联合化疗较单纯化疗对Ⅳ期胰腺癌的治疗效果更好,患者生存期延长。
    11  Liguzinediol调控心肌细胞线粒体动力学和自噬改善心肌梗死后大鼠心功能的机制
    刘子勤,李文文,吴敬珍,童 静,张晨妍,祝伟杰,刘博文,王 浩,李 育,齐 栩
    2022(6):769-779. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220602
    [摘要](43) [HTML](35) [PDF 186.55 M](120)
    摘要:
    目的:观察川芎嗪衍生物2,5?二羟甲基?3,6?二甲基吡嗪(liguzinediol,Lig)对左冠状动脉前降支结扎致心肌梗死大鼠的心功能改善作用及其潜在机制。方法:结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支复制大鼠心肌梗死模型,给予不同剂量Lig(5、10、20 mg/kg)及阳性药地高辛(0.033 2 mg/kg)治疗12周。超声心动图检测心功能;试剂盒检测心肌损伤标志物脑钠肽(brain natriuretic peptides,BNP)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;HE染色观察心肌形态;电镜检测线粒体形态;Western blot检测线粒体动力学相关蛋白的表达水平;免疫组织化学染色检测线粒体自噬相关蛋白的表达水平。复制氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)H9C2细胞模型。使用Lig干预细胞,并将自噬激动剂和抑制剂与Lig结合使用。Western blot检测线粒体自噬相关蛋白的表达;转染LC3B腺病毒检测自噬水平;荧光标记检测线粒体膜电位、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和细胞凋亡。结果:Lig各个剂量均能显著升高心肌梗死模型大鼠射血分数(ejection fraction,EF)、左室短轴缩短率(fractional shortening,FS),减小左室收缩末期内径(left ventricular dimension in systole,LVIDs)。Lig可显著降低心肌梗死模型大鼠血清BNP、LDH,并增加大鼠心脏中ATP水平。Lig改善心肌梗死大鼠心肌细胞及线粒体形态,调节心肌梗死大鼠心脏中线粒体动力学相关蛋白表达并促进自噬。在体外,Lig减少OGD模型H9C2细胞的ROS含量,促进线粒体自噬和融合,保护线粒体膜电位,减少H9C2细胞凋亡。自噬激动剂与Lig的合用部分增加了Lig对OGD模型H9C2细胞的保护作用,自噬抑制剂则可改变Lig对OGD模型H9C2细胞线粒体的调节作用及对凋亡的抑制作用。结论:Lig可促进线粒体自噬和融合,维持线粒体形态和功能完整,减少心肌细胞凋亡,改善心肌梗死大鼠的心功能。
    12  USP14调控OSBPL2蛋白去泛素化作用的实验研究
    张洪都,王红顺,王天明,姚 俊,曹 新
    2022(6):759-767. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220601
    [摘要](96) [HTML](54) [PDF 275.32 M](142)
    摘要:
    目的:研究泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin?specific peptidase 14,USP14)通过调控氧化固醇结合样蛋白2(oxysterol binding protein?like 2,OSBPL2)的泛素化水平稳定OSBPL2表达的分子机制。方法:以HeLa细胞为工具细胞,通过对USP14过表达、敲降以及活性抑制,检测OSBPL2的表达水平;采用体外过表达实验考察USP14对OSBPL2的泛素信号和泛素化水平的调控;采用免疫共沉淀(co?immunoprecipitation,Co?IP)阐明USP14与OSBPL2相互作用的具体结构域、不同结构域在蛋白相互作用中的作用以及OSBPL2的关键泛素化位点。结果:USP14与OSBPL2存在相互作用关系并稳定OSBPL2的表达而不改变其转录水平;体外过表达和Co?IP实验结果表明,USP14催化(catalytic,CAT)结构域与OSBPL2氧固醇结合蛋白相关结构域(OSBP?related domain,ORD)的相互作用降低OSBPL2的泛素化水平;类泛素(ubiquitin?like,UBL)结构域在USP14与OSBPL2相互作用中起到了促进作用;Lys209和Lys361是OSBPL2泛素化和去泛素化的关键位点。结论:USP14通过调控OSBPL2蛋白Lys209和Lys361两个位点的泛素化进而调控其泛素化水平,稳定OSBPL2蛋白的表达。
    13  二甲双胍通过调控糖代谢抑制甲状腺结节的研究进展
    赵成程,刘孙强,郑旭琴
    2022(5):740-745. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220523
    [摘要](113) [HTML](26) [PDF 498.47 K](409)
    摘要:
    甲状腺结节是指各种原因导致甲状腺内出现的一个或多个组织结构异常的团块。近年来甲状腺结节患病率不断增加,糖代谢异常可能是其重要原因之一,主要涉及胰岛素/胰岛素样生长因子1、瘦素、炎症、遗传免疫等机制。二甲双胍作内应用最广泛的抗糖尿病药物,可以通过不同信号通路发挥抑制甲状腺结节的作用。文章就此方面研究进展进行综述。
    14  嗜酸粒细胞性哮喘生物标志物的研究进展
    陈雪琴,张明顺,黄 茂,吉宁飞
    2022(5):734-739. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220522
    [摘要](61) [HTML](29) [PDF 456.52 K](267)
    摘要:
    哮喘是一种以慢性气道炎症为特点的异质性疾病,而嗜酸粒细胞性哮喘是基于气道炎症分型中最常见的一种亚型。作为诱导痰的替代生物标志物,血嗜酸粒细胞、呼出气一氧化氮、血清骨膜蛋白等被广泛应用于嗜酸粒细胞性哮喘的研究,但这些生物标志物预测嗜酸性气道炎症的能力饱受争议,联合使用或许能提高诊断的准确度。此外,随着组学技术的开展以及对疾病发病机制的深入认识,未来新型生物标志物有望应用于临床。
    15  高脂饮食影响小鼠空回肠上皮功能的差异性研究
    金 燚,俞 静,夏 凡,丁国宪
    2022(5):619-624. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220503
    [摘要](90) [HTML](45) [PDF 58.85 M](289)
    摘要:
    目的:研究高脂饮食对小鼠空肠和回肠上皮功能的不同影响。方法:8周龄C57BL/6J雄性小鼠共40只,随机分为两组,分别给予正常饮食和高脂饮食喂养3个月。留取小鼠空肠和回肠组织,HE染色观察空肠和回肠上皮绒毛、隐窝形态变化;PAS染色观察杯状细胞数量变化;分离小肠上皮隐窝单位进行体外3D类器官培养,观察类器官增殖率及类器官分化程度;荧光定量PCR检测空回肠上皮凋亡基因表达。结果:高脂饮食对小鼠空肠和回肠的绒毛长度和杯状细胞数量都无明显影响,但隐窝深度显著变浅。体外3D类器官培养结果发现,高脂饮食导致空肠上皮干细胞分化能力下降,而回肠干细胞分化能力却显著增加;两种上皮细胞的凋亡均显著减少。结论:高脂饮食导致小鼠空回肠上皮功能发生变化,而且对空、回肠上皮干细胞分化能力的影响不同。
    16  Bmal1调控T型钙离子通道对慢性心衰室性心律失常昼夜节律的影响
    俞 灏,周子皓,张南南,薛思源,钱智勇,王 垚,邹建刚
    2022(5):611-618. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220502
    [摘要](79) [HTML](39) [PDF 17.39 M](277)
    摘要:
    目的:探究生物钟基因Bmal1调控T型钙离子通道(T?type calcium channel,TTCC)对慢性心衰(chronic heart failure,CHF)室性心律失常(ventricular arrhythmia,VA)昼夜节律的影响及可能的调控机制。方法:采用主动脉缩窄术(TAC)构建C57BL/6J小鼠慢性心力衰竭模型(CHF),设定假手术对照组(CON)及TTCC抑制剂米贝拉地尔(MIB)治疗组(CHF+MIB)。使用心脏超声评估各组小鼠心功能,免疫组织化学染色(IHC)及蛋白免疫印迹法(WB)测定心肌TTCC表达。使用程序性电刺激(PES)诱发室性心律失常(VA),采用WB及实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT?PCR)检测心肌组织Bmal1、TTCC昼夜节律变化及关系。使用染色质免疫共沉淀技术(ChIP)揭示Bmal1调控TTCC的分子机制。结果:与CON组相比,CHF小鼠心脏收缩功能显著降低,心腔扩大且伴有明显心肌肥厚,心肌中TTCC表达量明显增加,行PES检测发现CHF小鼠VA发作率明显增加,且有昼夜节律差异,使用MIB可一定程度降低CHF小鼠VA的发生。Western blot及qRT?PCR结果提示CHF小鼠心肌中Bmal1及TTCC表达呈昼夜节律性变化,ChIP检测提示Bmal1可直接结合到TTCC启动子区域的E?box位点调控TTCC的转录。结论:CHF小鼠中,TTCC通道重新高表达且呈昼夜节律性,使用MIB可降低CHF小鼠VA发作,Bmal1可通过直接结合TTCC启动子区域的E?box位点调控TTCC的转录。
    17  成熟SVFs细胞与Hepa1⁃6细胞共培养模型的建立及对肝细胞脂代谢的影响
    王雨竹,张 许,李 仲
    2022(5):603-609. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220501
    [摘要](130) [HTML](67) [PDF 8.26 M](301)
    摘要:
    目的:建立小鼠成熟脂肪细胞血管基质部分(stromal vascular fraction,SVF)与小鼠肝细胞(Hepa1?6)共培养模型,研究成熟脂肪细胞对肝细胞脂质堆积以及代谢的影响。方法:从小鼠皮下脂肪分离提取原代SVF细胞,经体外分化成熟后,以Transwell小室建立成熟SVF细胞和Hepa1?6细胞间接共培养48 h体系。应用逆转录?聚合酶链反应法(RT?PCR法)检测SVF细胞PPARγ和PGC?1α等分化相关基因及Hepa1?6细胞CD36、FATP2、GPAT1等脂代谢相关基因的表达。酶法检测经共培养后的Hepa1?6细胞甘油三酯水平。结果:小鼠原代SVF细胞经诱导成熟后,出现明显较大脂滴;成熟SVF细胞中PPARγ和PGC?1α等分化标志物较未分化SVF细胞显著升高;Hepa1?6细胞甘油三酯水平明显高于未共培养组;Hepa1?6细胞GPAT1、CD36基因表达水平明显升高。结论:已成功建立成熟脂肪细胞与Hepa1?6细胞Transwell共培养模型。肝细胞与成熟脂肪细胞共培养可以诱导其脂质堆积增加,该过程可能通过上调肝细胞中CD36 和GPAT1的表达水平增加脂肪酸的吸收和甘油三酯的合成通路实现。
    18  环状RNA与支气管哮喘相关性研究
    杨贤苗,钱粉红
    2022(4):595-599. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220422
    [摘要](200) [HTML](64) [PDF 461.08 K](245)
    摘要:
    环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类特殊的非编码RNA,参与许多细胞过程,与多种疾病的发生发展相关。circRNA在先天免疫、炎症反应中发挥重要作用,已有研究表明circRNA与慢性炎症性疾病关系密切。哮喘是一种慢性气道炎症,其发病机制尚不明确。本文就circRNA与哮喘的关系进行综述。
    19  间充质干细胞来源外泌体治疗心肌梗死的研究进展
    蒋日月,邓 倾,周 青
    2022(4):588-594. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220421
    [摘要](211) [HTML](107) [PDF 500.30 K](214)
    摘要:
    大量研究表明间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)主要通过旁分泌作用抑制细胞凋亡、抑制心肌纤维化、促进血管生成、抑制免疫反应来修复心肌损伤,外泌体在其中起主要作用。外泌体是细胞分泌的天然的纳米载体,内含细胞特异性蛋白、核酸和脂质。与脂质体载体相比,还具有低免疫原性、无细胞毒性及能够穿透生物屏障等优点。目前已有多种靶向心脏的工程外泌体在动物心肌梗死模型中取得很好的疗效。本文就MSC及MSC来源外泌体促进心肌梗死后受损心肌修复的机制及研究进展作一综述。
    20  花色苷在代谢性疾病中的研究进展
    田杨杨,周 明,钱 旭
    2022(4):578-587. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220420
    [摘要](247) [HTML](109) [PDF 650.01 K](216)
    摘要:
    代谢性疾病是一类由遗传和环境等多因素引起的慢性疾病,发展缓慢,难以治愈。花色苷在降血糖、降血脂、增加胰岛素分泌、抗心血管疾病、抗癌等方面起到了良好的健康促进作用,被认为可以促进糖尿病、肥胖、癌症等疾病患者的健康。本文就花色苷在代谢性疾病的作用机制做一总结,为花色苷在代谢性疾病中的应用提供理论依据。
    21  人类抗原R在不同分期糖尿病肾病患者中的差异
    董佳馨,黄智敏,邢昌赢
    2022(4):511-517. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220408
    [摘要](228) [HTML](94) [PDF 1.72 M](243)
    摘要:
    目的:探讨人类抗原R(human antigen R,HuR)在不同分期糖尿病肾病患者中的差异。方法:选取2014年1月—2019年5月在南京医科大学第一附属医院经肾活检明确诊断的糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)患者165例以及肾脏恶性肿瘤患者16例。免疫组化法检测肾组织中HuR的表达水平。根据DKD病理分期进行分组,采用非参数检验比较各组患者HuR表达的差异。对HuR表达水平与临床指标的关系进行Spearman相关分析。结果:与肿瘤患者癌旁正常肾脏组织相比,HuR在DKD患者肾脏中表达增高,差异有统计学意义(P < 0.05)。HuR表达大多数位于肾小管上皮细胞,主要在细胞核内表达,部分在细胞质内表达。HuR在不同分期的DKD患者肾组织中表达有差异,其中Ⅱb期与Ⅲ期、Ⅱb期与Ⅳ期、Ⅲ期与Ⅳ期之间的差异有统计学意义(P < 0.05),而Ⅱa期与Ⅱb期之间差异无统计学意义。DKD患者HuR表达与年龄、血清肌酐、尿素氮、血尿酸、C反应蛋白、甲状旁腺激素呈正相关,与估算的肾小球滤过率、血红蛋白、糖化血红蛋白、1,25羟维生素D3呈负相关。结论:DKD病理分型在Ⅱb以上者HuR表达与病理分期呈正相关。HuR的表达与肾功能相关临床指标具有相关性。
    22  LDL⁃C/HDL⁃C对慢性髓系白血病患者深度分子学反应的预测价值
    徐子瑶,胡金花,孙 倩,刘文洁,洪 鸣,钱思轩
    2022(4):503-510. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220407
    [摘要](278) [HTML](81) [PDF 771.33 K](226)
    摘要:
    目的:探讨血脂水平对慢性髓系白血病慢性期(chronic myeloid leukemia?chronic phase,CML?CP)患者治疗反应的预测价值。方法:回顾性分析453例CML?CP患者的临床资料。采用全自动生化分析仪检测患者在初诊时及不同缓解阶段的血脂水平,应用Logistic回归模型进行预后相关因素分析。结果:CML患者与正常人相比表现为总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high?density lipoprotein cholesterol,HDL?C)、低密度脂蛋白胆固醇(low?density lipoprotein cholesterol,LDL?C)水平低,甘油三酯(triglyceride,TG)、TC/HDL?C、non?HDL?C/HDL?C和TG/HDL?C水平高(P < 0.001),LDL?C/HDL?C无明显差异(P > 0.05),且不同年龄段血脂谱改变与总体趋势一致,绝经期后患者表现为TG和LDL?C水平高。CML患者达到主要分子学反应(major molecular response,MMR)及深度分子学反应(deep molecular response,DMR)时血脂水平相较于初诊时明显恢复。与MMR患者相比,DMR患者表现为更低水平的LDL?C、TC/HDL?C、LDL?C/HDL?C和non?HDL?C/HDL?C(P < 0.05)。多因素Logistic回归分析表明LDL?C/HDL?C(OR=0.511,95%CI:0.330~0.793,P=0.003)、Sokal评分(P=0.016)和酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗时间(OR=1.025,95%CI:1.013~1.037,P < 0.001)与DMR显著相关。结论:初诊CML患者血脂代谢紊乱,TKI有效逆转血脂谱。血脂水平监测对于CML患者疗效评估具有重要意义,且LDL?C/HDL?C可作为MMR患者预测DMR的独立指标。
    23  老年冠心病患者生存影响因素分析
    刘 欢,张晓宇,王向明,卢 妙,查志敏,闵笑颜,庞斯斯,李秋爽,郭 妍
    2022(4):491-497. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220405
    [摘要](228) [HTML](73) [PDF 597.21 K](247)
    摘要:
    目的:分析老年冠心病患者生存的影响因素。方法:收集140例老年冠心病患者的相关资料,平均随访3.5年。探讨患者发生主要不良心脑血管事件(major adverse cardiac and cerebral events,MACCE)的影响因素,进一步分析各影响因素对MACCE的预测价值。结果:根据MACCE组与无MACCE组临床资料比较、Cox回归分析及Kaplan?Meier曲线分析结果,尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、左房内径(left atrial diameter,LAD)、心脏瓣膜钙化(cardiac valve calcification,CVC)是老年冠心病患者发生MACCE的相关影响因素。未发现1,25羟维生素D3水平与MACCE的发生相关。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线显示,联合BUN、TC、LAD、CVC预测MACCE的价值最大。结论:BUN、TC、LAD、CVC是老年冠心病患者发生MACCE的重要影响因素,而未发现1,25羟维生素D3水平与MACCE的发生相关。
    24  miR⁃192⁃5p通过靶向Notch3减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞凋亡
    吴汉章,陈 铖,谢彩蝶,吴 琳,毛慧娟
    2022(4):484-490. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220404
    [摘要](204) [HTML](82) [PDF 827.92 K](218)
    摘要:
    目的:探讨Notch3在顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK?2)损伤中的表达变化及其潜在的相关上游微小RNA(microRNA,miRNA)调控机制。方法:体外培养HK?2细胞,Western blot及实时定量PCR检测Notch3在顺铂(20 μmol/L,24 h)诱导HK?2细胞凋亡模型及正常细胞中的表达;Targetscan预测靶向Notch3的miRNA,实时定量PCR测定相关miRNA在顺铂诱导HK?2细胞凋亡模型及正常细胞中的表达;然后,将HK?2细胞分别转染阴性对照模拟物(NC mimic)及miR?192?5p模拟物(miR?192?5p mimic),并依据给予或不给予顺铂处理(20 μmol/L,24 h),分为NC mimic组、NC mimic+Cisplatin组、miR?192?5p mimic组、miR?192?5p mimic+Cisplatin组。Western blot及实时定量PCR检测Notch3的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率,研究miR?192?5p对顺铂所致肾小管上皮细胞凋亡及Notch3表达的影响;荧光素酶报告实验证实miR?192?5p与靶基因Notch3的靶向关系。结果:Notch3在顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的表达上调,同时miR?192?5p在顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的表达下调;实时定量PCR证实转染miR?192?5p模拟物后,miR?192?5p的表达量升高;过表达miR?192?5p能够减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡,同时负向调控Notch3的表达;荧光素酶报告实验结果表明miR?192?5p直接靶向作用于Notch3的3′?UTR,抑制Notch3的表达,证实Notch3是miR?192?5p的直接靶标。结论:miR?192?5p可通过直接抑制Notch3的表达而减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞凋亡。
    25  A20通过抑制自噬缓解实验性牙周炎牙槽骨吸收
    侯黎光,叶 宇,苟惠清,周 逸,徐 艳
    2022(4):476-483. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220403
    [摘要](232) [HTML](83) [PDF 3.04 M](237)
    摘要:
    目的:研究泛素编辑酶A20在抑制小鼠实验性牙周炎牙槽骨吸收中的作用并探索其潜在机制。方法:将20只小鼠随机分为4组:无牙周炎(Control)组、牙周炎及PBS注射(PBS+P)组、牙周炎及阴性对照腺相关病毒(adeno?associated virus,AAV)注射(AAV+P)组、牙周炎及A20过表达AAV(AAV?A20)注射(A20+P)组。采用丝线结扎联合局部涂菌构建C57BL/6J小鼠实验性牙周炎模型。在小鼠牙龈局部注射AAV?A20以实现A20在牙周组织的过表达。A20免疫荧光染色验证AAV?A20在局部牙周组织的转染效率。微计算机断层扫描(microcomputed tomography,Micro?CT)、苏木素伊红(haematoxylin and eosin,HE)染色及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate?resistant acid phosphatase,TRAP)染色比较各组小鼠牙槽骨吸收程度及上颌第一第二磨牙之间破骨细胞数目。免疫组织化学染色观察各组小鼠牙周组织核因子?κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor?κВ ligand,RANKL)及自噬相关因子表达。结果:与PBS+P组及AAV+P组相比,A20+P组小鼠牙周组织自噬水平降低(Beclin?1、LC3B表达下降,p62表达上升),RANKL表达下调,上颌第一第二磨牙之间TRAP阳性破骨细胞数目减少,牙槽骨吸收程度减轻。结论:A20通过负向调控自噬缓解小鼠实验性牙周炎牙槽骨吸收,有望成为牙周炎治疗的新靶点。
    26  有氧运动联合外源性脑源性神经营养因子协同增强心肌血管生成效应
    王碧蕾,夏宝妹,金 虹,王锦玉
    2022(4):466-475. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220402
    [摘要](233) [HTML](107) [PDF 1.05 M](242)
    摘要:
    目的:探讨脑源性神经营养因子(brain?derived neurotrophic factor,BDNF)对有氧运动促进心肌梗死后心肌血管生成、改善心功能的协同效应及其机制。方法:细胞实验中,利用平行板流动小室建立12 dyn/cm2的层流剪切力(laminar shear stress,LSS)以模拟运动对血管壁的生理效应。Western blot分别检测非循环流体、循环流体、循环流体加人重组BDNF蛋白(50 ng/mL)处理的人脐静脉内皮细胞HUVEC中BDNF蛋白表达水平、BDNF高亲和力受体TrkB及其下游Akt通路磷酸化水平,Transwell细胞迁移实验和小管形成实验检测HUVEC的体外血管生成能力。动物实验中,60只12周龄雄性Sprague?Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(Sham)、心肌梗死组(MIC)、心肌梗死+BDNF组(MICB)、心肌梗死+运动组(MIE)、心肌梗死+运动+ BDNF组(MIEB);造模术前及术后1周分别进行心彩超检查,随后开始为期4周的有氧运动训练,MIEB组大鼠在运动前10 min尾静脉注射人重组BDNF蛋白(0.4 μg/kg),MICB组仅注射等量BDNF;训练结束行心彩超检查后腹腔麻醉取材,免疫组化检测心肌梗死周围区血管密度。结果:循环流体产生的LSS可诱发HUVEC中BDNF蛋白表达增加,TrkB及其下游Akt通路磷酸化程度持续增强,循环流体中BDNF水平随干预时间的延长而升高。非循环流体产生的LSS可诱发HUVEC上BDNF蛋白表达增加,但TrkB及其下游Akt通路均处于未激活状态。增加循环流体中BDNF浓度可提高TrkB及其下游Akt通路活化程度,进一步提高HUVEC体外血管生成能力。心肌梗死大鼠有氧运动结合尾静脉注射BDNF较单纯注射BDNF和单纯运动组大鼠心肌血管密度显著增高、心功能改善。结论:运动通过LSS以BDNF浓度依赖性模式诱发HUVEC上TrkB持续磷酸化并激活其下游Akt信号通路,提高细胞迁移及小管形成能力;外源性补充BDNF可协同有氧训练强化运动的促心肌血管生成效应,进一步改善心功能。
    27  低强度脉冲超声对食源性肥胖小鼠脂肪细胞肥大的作用及机制研究
    李 禄,徐天华,舒环宇,赵云晰,孔祥清,孙 伟
    2022(4):457-465. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220401
    [摘要](320) [HTML](173) [PDF 1.67 M](279)
    摘要:
    目的:探究低强度脉冲超声(low?intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对食源性肥胖小鼠脂肪细胞肥大的影响及分子机制。方法:C57BL/6J雄性小鼠食用60% kcal脂肪的高脂饲料进行肥胖小鼠造模,肥胖小鼠接受10周腹股沟脂肪垫LIPUS辐照。称量小鼠及靶区脂肪重量;抽取外周静脉血检测血脂、血常规和血生化;超声波穿透路径组织(皮肤、肌肉)HE染色评估LIPUS的体内安全性;靶区脂肪HE染色观察脂肪细胞大小;甘油磷酸氧化酶?过氧化物酶法测定靶区脂肪内甘油三酯含量;qPCR分析靶区脂肪成脂分化转录因子、脂解酶及其转录因子的表达;Western blot检测成脂分化转录因子、脂解酶和脂解相关信号通路的蛋白水平。结果:当声强达到77.20 mW/cm2时,LIPUS辐照明显降低肥胖小鼠靶区脂肪重量,甘油三酯含量减少,脂肪细胞体积减小。同时,LIPUS下调靶区脂肪成脂分化转录因子的表达,激活脂解相关信号通路,上调脂解酶的表达水平。此外,初步结果表明LIPUS在该治疗剂量下具有良好的安全性。结论:LIPUS通过降低成脂分化转录因子表达,提高脂解水平,改善肥胖小鼠脂肪细胞肥大。
    28  联合消融的综合疗法在进展期胰腺癌中的应用现状与进展
    张宸恺,张 彬,顾玉青,李亚男,钱祝银
    2022(3):437-442. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220321
    [摘要](444) [HTML](116) [PDF 511.24 K](233)
    摘要:
    进展期胰腺癌预后极差,恶性程度高,生存时间极短,难以靠外科手段达到根治目的。单纯的放、化疗在进展期胰腺癌中效果有限,患者总体生存时间并不理想,因此探索进展期胰腺癌的消融治疗一直是近些年来的研究热点,其中包含了射频消融术(radio?frequency ablation,RFA)、冷冻消融术(cryoablation)、不可逆电穿孔(irreversible electroporation,IRE)、高强度聚焦超声治疗(high intensity focused ultrasound,HIFU)等诸多方式。不仅如此,消融联合放化疗以及免疫治疗等综合治疗方案,对进展期胰腺癌患者往往可以达到有效提高其生存期的目的。文章对进展期胰腺癌中以消融为主体的综合整体治疗现况及进展作一综述
    29  中国大陆戒毒药物使用现状与进展
    齐一泽,戴柔丽,吴兆京,王正德,张 磊,马腾飞
    2022(3):431-436. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220320
    [摘要](486) [HTML](157) [PDF 2.61 M](311)
    摘要:
    文章介绍了21世纪以来中国大陆吸毒人员与戒毒治疗的新态势,阐述了药物成瘾的机制和戒毒药物的使用现状,并根据现有研究进展推测药物成瘾治疗的潜在靶点。通过对成瘾治疗相关中药的介绍,阐述中医药治疗的优势与局限性,提出中医药治疗在戒毒治疗中不可忽视的作用。
    30  氢气抗肿瘤研究进展
    周高信
    2022(3):421-430. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220319
    [摘要](551) [HTML](457) [PDF 612.30 K](277)
    摘要:
    氢气是一种新型气体信号分子,有选择性抗氧化作用和抗炎效果。氢气在医学领域的研究最早是用于抗肿瘤,后续对包括脑卒中在内的多领域逾百种疾病展示出治疗潜力。肿瘤高发病率和高病死率造成了沉重的医疗负担,短期内缺乏治愈肿瘤的特效手段,如何预防肿瘤和延长肿瘤患者生存期是首要目标,氢气有望在该领域发挥作用。文章综述氢气抗肿瘤的研究进展,主要从氢气的抗癌机理、增效减毒作用、联合治疗、临床研究和给氢方式等方面进行介绍。
    31  南京市某地区大气多环芳烃污染及空气微生物多样性相关分析
    朱宇琪,吴 昊,热那古力·吾斯曼江,沈梦凡,谈依婷,李 玥,王 丽,吴 倩
    2022(3):415-420. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220318
    [摘要](442) [HTML](107) [PDF 37.34 M](307)
    摘要:
    目的:研究南京大气中多环芳烃污染水平,探究大气多环芳烃浓度与空气微生物群落的相关性。方法:采用气相色谱?质谱联用仪定量分析2019—2020年春秋季南京市大气中多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbon,PAH)的浓度;同时采用16S rRNA测序测定空气中微生物群落,对大气PAH的浓度与微生物群落进行Pearson相关性分析。结果:通过分析2019年和2020年大气PAH浓度数据发现,大气中菲Phe、荧蒽Fla和芘Pyr占主要成分,2019年秋季大气PAH浓度明显高于春季。2019年大气总PAH浓度高于2020年。在微生物门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)均为2019年和2020年的优势菌门。在微生物属水平上,芽胞杆菌属为2019年与2020年共同优势菌属。同时,PAH污染与微球菌属(放线菌门)和芽胞杆菌属(厚壁菌门)的丰度呈正相关。结论:大气PAH污染可能与空气微生物的种类和丰度的变化有关,并具有潜在的健康风险。
    32  Zfp212基因敲除小鼠模型的建立和雌性生殖表型研究
    白 雪,刘 露,胡 月,周 帅,霍 然
    2022(3):309-316. DOI: 10.7655/NYDXBNS20220301
    [摘要](882) [HTML](210) [PDF 105.69 M](498)
    摘要:
    目的:通过构建基因敲除小鼠模型探究锌指蛋白212(Zinc finger protein 212,Zfp212)对于雌性生育力的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Zfp212基因敲除小鼠;利用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光实验检测Zfp212蛋白表达、定位情况,并对Zfp212基因敲除效率进行验证;通过卵巢切片和HE染色、体外受精及早期胚胎培养和生育力测试实验对Zfp212基因敲除雌性小鼠的生殖表型进行分析。结果:Zfp212基因在卵母细胞和早期胚胎中高表达,且呈母源表达模式;基因敲除效率验证实验结果显示Zfp212敲除小鼠构建成功;Zfp212基因敲除雌性小鼠的卵泡发育、卵母细胞成熟、受精、植入前胚胎发育以及平均每窝产仔数量与对照组小鼠相比,差异均无统计学意义。结论:Zfp212基因对雌性小鼠的生育力建立不是必需的。
    33  lncRNA⁃miRNA⁃mRNA轴与心血管疾病发病相关性的研究进展
    苏忆玲,陆 齐
    2021(10):1552-1557. DOI: 10.7655/NYDXBNS20211025
    [摘要](1494) [HTML](93) [PDF 489.22 K](524)
    摘要:
    长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是从哺乳动物基因组中转录出来缺乏蛋白质编码潜力的核酸分子,主要从表观遗传学、转录调控和转录后调控3个方面实现基因表达调控,或者直接参与调节蛋白质活性。随着测序技术的进展,发现lncRNA可以充当微小RNA(microRNA,miRNA)的竞争性内源RNA,再进一步调节mRNA 的表达。目前研究证实lncRNA?miRNA?mRNA轴与心血管疾病的发病机制密切相关,文章介绍该轴在心血管疾病发病中的最新进展。
    34  动脉粥样硬化性心血管疾病高危人群胆固醇管理的临床研究进展
    孙 冰,王海昌
    2021(10):1546-1551. DOI: 10.7655/NYDXBNS20211024
    [摘要](1192) [HTML](98) [PDF 447.47 K](429)
    摘要:
    严格控制胆固醇水平可以有效减少人群心血管病事件的发生,低密度脂蛋白胆固醇升高是动脉粥样硬化性心血管疾病的独立危险因素,可作为衡量胆固醇控制水平的主要指标。传统的管理胆固醇药物包括他汀类、胆固醇吸收抑制剂、胆酸螯合剂、贝特类临床疗效确切,而新型降胆固醇药物包括前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂、微粒体甘油三酯转运蛋白抑制剂、反义寡核苷酸(ApoB?100合成抑制剂)等同样取得了不错的临床疗效。文章将对胆固醇药物特点及其不良反应进行综述,以期找出最合理的胆固醇管理方案。
    35  银杏叶提取物对瓣膜间质细胞钙化的保护作用
    刘 静,孔祥清
    2021(10):1440-1446. DOI: 10.7655/NYDXBNS20211003
    [摘要](1310) [HTML](89) [PDF 0.00 Byte](0)
    摘要:
    目的:研究银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,EGB761)对华法林诱导的主动脉瓣膜间质细胞(aortic valve interstitial cells,AVIC)钙化及成骨分化的保护作用。方法:分离猪AVIC,将不同浓度的EGB761作用于AVIC,通过茜素红染色、细胞内钙含量以及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测观察EGB761对猪AVIC钙化的作用。Real?time PCR和Western blot检测成骨分化相关基因Runt相关转录因子2(runt?related transcription factor 2,Runx2)、Msx2(msh homeobox 2)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein?2,BMP2)和磷酸化Smad1/5的表达。结果:EGB761显著抑制华法林诱导的AVIC钙化,成骨分化相关基因Runx2、Msx2、BMP2的mRNA表达减低,Smad1/5磷酸化及Runx2蛋白表达被抑制。结论:EGB761可能是通过下调Smad1/5磷酸化水平,抑制BMP2/Smad1/5/Runx2信号通路,从而缓解了AVIC钙化和成骨分化。
    36  利用可诱导表达Cas9的HeLa细胞系进行顺铂耐药性基因筛选
    陈红全,王建瑛
    2021(10):1432-1439. DOI: 10.7655/NYDXBNS20211002
    [摘要](1320) [HTML](103) [PDF 76.45 M](476)
    摘要:
    目的:利用PiggyBac转座子系统,构建可诱导表达Cas9的稳定HeLa细胞系,并针对人核受体基因构建sgRNA文库,进行顺铂耐药性基因筛选。方法:构建PB?TRE?Cas9?NLS?IRES?hrGFP?Zeo载体,与PB?CAG?rtTA以及转座酶载体一同电转到HeLa细胞中,通过药筛和挑选单克隆得到稳定细胞系;构建核受体基因sgRNA病毒文库,并感染可诱导表达Cas9的HeLa细胞系,筛选对顺铂具有抵抗性的克隆,并进行目的基因的测序鉴定。结果:挑选出可诱导表达Cas9的8E单克隆细胞株,在5个基因位点上可以进行高效编辑;感染sgRNA文库之后,挑选顺铂耐药的克隆,并鉴定出大部分克隆含有VDR sgRNA,经测序发现这些克隆中的VDR基因发生突变。结论:利用PiggyBac转座子系统,构建了可诱导表达Cas9的稳定HeLa细胞系,利用这个细胞系可以在多位点进行高效基因编辑,并可用于高通量文库筛选顺铂耐药性基因。
    37  PEI修饰的氢氧化铝纳米颗粒增强树突状细胞抗原提呈作用的初步研究
    任宏艳,康美云,王子妤,姚 琦,张璐瑶,王永韧
    2021(10):1425-1431. DOI: 10.7655/NYDXBNS20211001
    [摘要](2067) [HTML](151) [PDF 28.13 M](691)
    摘要:
    目的:探索聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)修饰的氢氧化铝纳米颗粒(HS)增强树突状细胞(dendritic cell,DC)抗原提呈的作用及其机制。方法:DC负载PEI修饰前后的HS联合卵清蛋白(ovalbum,OVA)抗原后与B3Z细胞共孵育,CPRG(chlorophenol red?β?d?galactopyranoside)方法检测DC对OVA的抗原提呈能力,Western blot检测DC中泛素化OVA蛋白的表达;以不同刺激剂[干扰素(interferon,IFN)?α、R848]与负载HS/PEI?OVA的DC混合后,收集培养上清ELISA检测白介素(interleukin,IL)?12的表达,与B3Z共孵育后CPRG方法检测不同刺激剂对HS/PEI增强DC抗原提呈的作用;DC负载HS/PEI?OVA后与OT?Ⅰ T细胞共孵育,检测OT?Ⅰ T细胞增殖;皮下接种小鼠黑色素瘤细胞B16?OVA构建小鼠黑色素瘤模型,探讨负载HS/PEI?OVA的DC疫苗体内诱导CD8+IFN?γ+T细胞比率上升及特异性T细胞分泌IFN?γ的能力。结果:与未经PEI修饰的HS相比,HS/PEI能显著增强DC对OVA抗原的提呈能力,并增加DC中泛素化OVA蛋白的表达及IL?12的分泌;IFN?α、R848均可进一步增强DC对HS/PEI?OVA的提呈作用;DC负载HS/PEI?OVA可显著促进OT?Ⅰ T细胞的增殖;DC?HS/PEI?OVA疫苗小鼠体内能诱导高效的T细胞应答。结论:HS/PEI能显著增强DC对抗原的交叉提呈,诱导高效的T细胞应答。
    38  凋亡抑制蛋白c⁃FLIP(L)调控肺纤维化过程的机制
    李 昊,张林凯,张 晶
    2021(9):1310-1314. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210906
    [摘要](1301) [HTML](158) [PDF 51.73 M](398)
    摘要:
    目的:明确凋亡抑制蛋白c?FLIP(L)在肺纤维化过程中的作用,探究其异常表达参与肺纤维化发病的分子机制。方法:构建博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,对正常鼠与模型鼠的肺组织切片进行HE和Masson染色观察病理变化,并采用免疫组化分析c?FLIP(L)及上皮?间质转化(epithelial?mesenchymal transition,EMT)标志分子E?cadherin的表达。构建表达c?FLIP(L)的稳定细胞株,qRT?PCR检测EMT标志分子E?cadherin、N?cadherin及Vimentin的mRNA表达。采用转化生长因子(transforming growth factor,TGF)?β1诱导细胞发生EMT,通过Smad报告基因检测和Western blot分析c?FLIP对TGF?β1诱导EMT发生的影响。结果:c?FLIP(L)表达水平在肺纤维化组织中明显升高,与E?cadherin表达呈负相关性。C?FLIP(L)能促进肺上皮细胞的EMT表型,并促进TGF?β1诱导的Smad信号通路激活,而敲减c?FLIP(L)表达能阻滞TGF?β1诱导的EMT进程。结论:c?FLIP(L)在肺纤维化过程中高表达能促进EMT发生,是肺纤维化病程发展的促进因素之一。
    39  铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1抑制肺巨噬细胞吞噬功能的初步研究
    林少清,舒 磊,杜兴冉,冯旰珠
    2021(9):1304-1309. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210905
    [摘要](1154) [HTML](132) [PDF 30.43 M](380)
    摘要:
    目的:探讨铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1对小鼠肺泡巨噬细胞株MH?S吞噬功能的影响。方法:通过PCR扩增、质粒构建、原核表达及蛋白纯化等过程制备重组蛋白Pec1;CCK?8法检测Pec1蛋白对MH?S细胞增殖的影响;中性红染色检测MH?S细胞的吞噬功能;荧光显微镜观察MH?S细胞对铜绿假单胞菌标准菌株PAO1灭活菌的吞噬能力。结果:成功构建重组质粒pET?30a?pec1,原核表达并纯化后得到重组蛋白Pec1,其分子量为30.5 kDa。Pec1对MH?S细胞的增殖有抑制作用,Pec1浓度越高,对细胞增殖的抑制作用越明显;Pec1能减少MH?S细胞对中性红的内吞,抑制MH?S细胞对铜绿假单胞菌灭活菌的吞噬作用。结论:铜绿假单胞菌分泌蛋白Pec1对MH?S细胞的吞噬功能有抑制作用。
    40  M1型巨噬细胞极化在内皮细胞转分化及慢性移植肾失功中的作用
    张 翔,王子杰,郑 明,韩前广,黄正楷,易小敏,陶 俊,韩志坚,谭若芸,居小兵,顾 民
    2021(9):1296-1303. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210904
    [摘要](1304) [HTML](220) [PDF 200.98 M](411)
    摘要:
    目的:探究M1型巨噬细胞极化在内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelium?to?myofibroblast transition,EndMT)及慢性肾移植失功(chronic allograft dysfunction,CAD)中的作用。方法:从GEO公共数据库中下载GSE21374转录组测序数据,并使用Cibersort软件分析CAD患者移植肾中的免疫细胞的浸润状态。收集本中心CAD患者的移植肾切除标本,使用免疫荧光、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹法(Western blot,WB)等方法观察M1型巨噬细胞在移植肾组织中的浸润情况。体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和干扰素?γ(interferon?γ,IFN?γ)诱导Raw264.7巨噬细胞向M1极化。Transwell小室构建M1型巨噬细胞和主动脉内皮细胞的共培养模型。使用PCR、WB和细胞免疫荧光观察共培养模型中内皮细胞的CD31与α?SMA的表达情况。结果:基于GEO公共数据库,发现单核?巨噬细胞明显浸润于CAD移植肾组织中(P<0.05);在本中心的CAD患者移植肾标本中,CD68(+)iNOS(+)M1型巨噬细胞亦明显浸润于肾小球及间质中,且M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA表达量明显增加(P<0.05)。在细胞共培养模型中发现,M1型巨噬细胞可明显促进内皮细胞发生EndMT过程。结论:M1型巨噬细胞明显浸润于CAD患者的移植肾组织中,并可能通过诱导内皮细胞发生EndMT促进CAD的进展。
    41  法舒地尔二氯乙酸盐对低氧性肺动脉高压大鼠的治疗作用及机制
    刘 萍,周 宏,伍雪橙,黄张建,孔 辉,解卫平
    2021(9):1281-1288. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210902
    [摘要](1265) [HTML](251) [PDF 70.45 M](404)
    摘要:
    目的:研究法舒地尔二氯乙酸盐(fasudil dichloroacetate,FDCA)对低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)大鼠的治疗作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为4组:对照(CON)组、CON+FDCA组、慢性缺氧(chronic hypoxia,CH)组、CH+FDCA组。将CH、CH+FDCA组置于(10.0 ± 0.1)%氧浓度的常压缺氧箱中持续缺氧,CON+FDCA、CH+FDCA组从缺氧第15天开始,给予FDCA 43.3 mg/(kg·d)灌胃治疗。缺氧28 d后测量大鼠右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)和右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI);采用HE、α?SMA免疫组织化学染色及Masson染色评估肺血管及右心室形态学变化。ELISA法检测大鼠肺组织中炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)?1β、IL?6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)?α含量以及肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和肌球蛋白磷酸化酶(myosin light chain phosphorylase,MLCP)水平。Western blot实验测定大鼠肺组织中ROCK1、ROCK2蛋白表达水平。结果:FDCA可以降低HPH大鼠的RVSP及RVHI,缓解右心室心肌肥大,减轻肺血管中膜肥厚程度,降低完全肌化型血管比例,抑制肺血管周围胶原沉积,并下调肺组织中炎症因子IL?1β、IL?6、TNF?α水平。此外,FDCA可显著降低HPH大鼠肺组织中MLCK水平,并升高MLCP水平,同时抑制ROCK1、ROCK2蛋白表达。结论:FDCA可抑制肺血管收缩与重构,减轻炎症反应,缓解慢性缺氧诱导的大鼠肺动脉高压,是一种治疗HPH的潜在化合物。
    42  CDDO⁃Me对缺氧诱导的肺动脉外膜成纤维细胞活化的影响
    彭丽瑶,魏桂红,黄张建,孔 辉,解卫平
    2021(9):1273-1280. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210901
    [摘要](1369) [HTML](156) [PDF 15.21 M](495)
    摘要:
    目的:探索甲基巴多索隆(bardoxolone methyl,CDDO?Me)对缺氧诱导的人肺动脉外膜成纤维细胞(pulmonary artery adventitia fibroblast,PAAF)活化的影响及其相关机制。方法:体外培养人PAAF,随机分为常氧组(21%O2)、缺氧组(1%O2)、缺氧+ CDDO?Me组和常氧+CDDO?Me组。采用CCK?8法检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移;DCFH?DA荧光探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,ELISA试剂盒检测细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量以及细胞上清液中转化生长因子(transforming growth factor,TGF)?β1、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)?α、白细胞介素(interleukin,IL)?1β表达水平;免疫荧光法观察细胞内α?平滑肌肌动蛋白(α?smooth muscle actin,α?SMA)表达以及核因子κB(nuclear factor kappa?B,NF?κB)p65核转位情况;Western blot检测细胞内α?SMA、Ⅰ型胶原蛋白、波形蛋白表达以及Smad3、p65磷酸化水平。结果:CDDO?Me(62.5、125.0、250.0、500.0 nmol/L)可以浓度依赖性地降低缺氧诱导的PAAF细胞活力的升高,并在250.0 nmol/L和500.0 nmol/L时具有显著抑制作用。CDDO?Me(500.0 nmol/L)可以抑制缺氧诱导的PAAF迁移以及肌成纤维细胞转化,恢复细胞形态,抑制缺氧诱导的PAAF中α?SMA、Ⅰ型胶原蛋白和波形蛋白表达水平的升高。在缺氧条件下,CDDO?Me(500.0 nmol/L)显著降低PAAF中ROS和MDA水平,升高GSH和SOD含量,提高细胞抗氧化应激能力。CDDO?Me(500.0 nmol/L)可以抑制缺氧诱导的PAAF中细胞因子TGF?β1的分泌,抑制TGF?β1/Smad3信号通路的激活。此外,CDDO?Me(500.0 nmol/L)还可以抑制缺氧诱导的PAAF中NF?κB(p65)的核转位及其磷酸化,并抑制其下游炎症因子TNF?α和IL?1β的表达。结论:CDDO?Me可以抑制缺氧诱导的PAAF增殖、迁移以及向肌成纤维细胞转化,提高PAAF抗氧化应激能力,并抑制TGF?β1/Smad3信号通路和NF?κB信号通路。
    43  宫内发育迟缓新生小鼠胰腺发育转录组分析
    袁 逸,戴程婷,李一卉,王 莉,袁庆新
    2021(6):785-795. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210601
    [摘要](2114) [HTML](146) [PDF 18.51 M](1099)
    摘要:
    目的:通过全转录组测序比较宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)新生鼠与正常新生鼠胰腺长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)及信使RNA(messenger RNA,mRNA)表达谱的差别,探讨IUGR胰岛发育障碍及发生成年糖尿病的潜在机制。方法:建立IUGR新生鼠及正常新生鼠模型,对两种小鼠胰腺进行全转录组测序,分别对LncRNA和mRNA数据进行基因本体论(gene ontology,GO)分析,基于京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEEG)进行富集分析,全转录组数据联合分析后挑选与胰岛发育相关、表达差异高的LncRNA进行验证。结果:IUGR新生鼠和正常新生鼠差异表达LncRNA 294个,其中上调83个,下调211个;差异表达mRNA 2 000个,其中1 711个上调,289个下调。 LncRNA靶基因及差异mRNA的GO显示:生物学途径(biological process,BP)均集中于细胞过程、生物调节及代谢过程;细胞组件(cellular component,CC)集中在细胞及器官等过程;分子功能(molecular function,MF)集中于整合、催化活性、转运活性等。KEEG富集分析显示差异表达的LncRNA靶基因及mRNA主要集中于PI3K?Akt通路、MAPK通路及Foxo通路上。对差异表达LncRNA Snhg12、Rian的验证显示,它们在IUGR鼠与正常鼠中存在明显表达差异,与测序结果一致,且受糖浓度调节。结论:本研究分析并部分验证了IUGR差异表达的LncRNA和mRNA,有助于进一步探讨IUGR新生鼠胰岛发育障碍及发生成年糖尿病的潜在机制及LncRNA在其中的作用。
    44  炎症小体AIM2在小鼠肥胖发生过程中的作用和机制研究
    刘 雪,马春梅,王冰微,杨 硕
    2021(3):317-323. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210302
    [摘要](1594) [HTML](104) [PDF 62.49 M](2350)
    摘要:
    目的:明确黑素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)在小鼠肥胖发生过程中的作用,探索其中发挥作用的细胞及其调控肥胖发生的作用机制。方法:分别对AIM2敲除小鼠和AIM2fl/flCx3cr1?Cre小鼠进行60%高脂饲料喂养建造肥胖模型,每周称重小鼠监测其体重变化,HE染色分析脂肪组织结构。葡萄糖耐受和胰岛素敏感性实验分析AIM2是否影响胰岛素抵抗。流式细胞分析巨噬细胞分型变化,荧光定量PCR法检测促炎细胞因子和抑炎细胞因子的表达变化。结果:在高脂诱导的肥胖小鼠中,AIM2表达显著下调,AIM2基因敲除小鼠体重增加,脂肪细胞显著大于野生型小鼠,并且AIM2基因敲除小鼠对胰岛素的敏感性更差。特异性地在巨噬细胞中敲除小鼠AIM2基因的AIM2fl/flCx3cr1?Cre小鼠与上述AIM2基因敲除小鼠的结果一致。在体外对骨髓来源的巨噬细胞给予特异性的分型刺激,结果证实AIM2促进巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化。结论:AIM2在小鼠肥胖发生过程中起保护作用,AIM2主要通过调控巨噬细胞极化来调节肥胖的发生。
    45  中国临床个体化用药研究发展热度下的冷思考
    陈 芸
    2021(3):313-316. DOI: 10.7655/NYDXBNS20210301
    [摘要](2332) [HTML](121) [PDF 480.75 K](1519)
    摘要:
    随着中国经济的快速发展和医疗水平的不断提高,用药的个体差异逐渐成为人们关注的热点和焦点。为促进临床合理用药,保障药物使用的安全性和有效性,个体化用药已成为精准医学研究的重要方向。然而,回溯我国个体化用药的发展历程,起步较晚,基础较弱,尚未形成完善的研究体系和机制。文章将通过分析中国临床个体化用药的研究现状,对比国内外差距,存真求实,发现短板,旨在为该领域研究的未来发展提供建议和思路。
    46  DNA微单倍型的研究现状、挑战与展望
    陈 峰
    2020(8):1081-1084. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200801
    [摘要](14658) [HTML](105) [PDF 395.29 K](6660)
    摘要:
    法医DNA在刑事侦查中发挥不可替代的作用,面对日益复杂的作案方式,法医DNA面临多重挑战,寻找有效的新型法医DNA遗传标记具有重要的应用价值和科学意义。微单倍型(microhaplotype)是一种新型法医遗传标记,它是长度较短、包含2个以上单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的多态性基因座,兼有短串联重复序列(short tandem repeat,STR)和SNP的优点,具备较高多态性和极低突变率。最新研究发现其在祖源推断、个人识别、亲权鉴定等方面具有独特优势,尤其是在混合DNA分析、降解或微量检材检测中具备巨大潜力。文章对微单倍型的概念、特点、研究进展、挑战及展望等进行介绍,希望其将来在法医学应用中发挥更大的作用。
    47  新型冠状病毒肺炎首次胸部HRCT表现及其病理学基础
    李怀花,孙晓东,杜 超,许传军,李代欣
    2020(4):485-488. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200405
    [摘要](3971) [HTML](66) [PDF 3.27 M](1175)
    摘要:
    目的:探讨新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID?19)首次胸部高分辨CT(HRCT)特征及其病理学基础,以提高对COVID?19的认识。方法:回顾性分析2020年1月25日—2月18日南京市确诊的61例COVID?19患者的首次胸部HRCT影像,对病变分布、数量、位置及形态进行统计和分析。结果:61例COVID?19患者首次胸部HRCT均存在病变,双侧肺分布55例(90.1%),单侧肺分布6例(9.9%),其中左肺分布2例(3.3%),右肺分布4例(6.6%);胸膜下分布36例(59.0%),胸膜下与中心同时分布25例(41.0%);1个病变4例(6.6%),2个及2个以上病变57例(93.4%);磨玻璃病变56例(91.8%),实性病变5例(8.2%),纤维化病变3例(4.9%),2种及2种以上的病变9例(14.8%);支气管充气征35例(57.4%),细网格征38例(62.3%),铺路石征32例(52.5%),晕征6例(9.8%),病灶中见增粗扩张的血管32例(52.4%);胸腔积液5例(8.2%),心包积液3例(4.9%),纵隔淋巴结肿大3例(4.9%),胸膜增厚7例(11.5%)。结论:HRCT是诊断COVID?19的首选影像学检查方法,其首次胸部HRCT表现具有一定的特征性,在结合流行病学、临床表现和核酸检测结果的基础上可辅助诊断COVID?19。
    48  南京地区91例新型冠状病毒肺炎患者首次入院相关实验室检查结果分析
    蔡兴龙,刘 璇,黄 玲,张永臣
    2020(4):478-484. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200404
    [摘要](4554) [HTML](71) [PDF 579.48 K](1179)
    摘要:
    目的:回顾性分析新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID?19)患者首次入院的相关实验室指标变化,为临床早期诊治提供实验室参考依据。方法:选取和分析南京市公共卫生医疗中心收治的91例COVID?19患者首次入院时实验室检查指标,包括血液常规、生化指标、炎症标志物、凝血功能和淋巴细胞亚群计数等的分布情况。结果:血液常规检查中部分患者出现白细胞总数和淋巴细胞计数降低,降低患者占比分别为21.98%和17.58%。生化指标检查中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和乳酸脱氢酶升高的比例分别为13.19%、14.29%和36.67%,在心肌酶检查中磷酸肌酸激酶升高的比例为18.37%(男)、9.75%(女),磷酸肌酸激酶同工酶、肌红蛋白和肌钙蛋白I升高的比例分别为5.68%、6.82%和19.32%。炎症指标检查中降钙素原水平整体变化不大,C?反应蛋白水平升高。凝血功能和纤溶检测中各指标无明显异常。淋巴细胞亚群检测发现CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD16/56+NK细胞和CD19+B细胞结果正常比例分别为62.07%、60.92%、65.51%、73.26%和95.35%,降低比例分别为32.18%、34.48%、27.59%、24.42%和4.65%。结论:COVID?19患者首次入院部分实验室指标出现特征性改变,可供临床初步判断,综合评估患者全身情况,结合核酸检测可提供重要参考依据。
    49  新型冠状病毒实验室检测方法及应用
    周婷婷,朱 进
    2020(4):474-477. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200403
    [摘要](4610) [HTML](69) [PDF 434.22 K](1719)
    摘要:
    随着新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus?2,SRAS?CoV?2)分离培养与基因组测序的完成,新型冠状病毒肺炎(corona virus disease,COVID?19)的确诊主要依靠RT?PCR 法检测SARS?CoV?2 核酸基因,重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)等新型常温核酸扩增技术也得到进一步应用。免疫学诊断包括胶体金和ELISA IgM 和IgG 抗体检测技术,主要用于人群的筛查和辅助诊断。基于CRISPR技术的新型诊断技术等也在进一步完善过程中。
    50  新型冠状病毒感染防控期间妇幼人群居家膳食/喂养指导建议
    中国营养学会妇幼营养分会
    2020(4):470-473. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200402
    [摘要](3331) [HTML](58) [PDF 540.54 K](1518)
    摘要:
    51  新型冠状病毒肺炎与疫情期间眼科的临床防护
    张雅纹 谢 平 胡仔仲 刘庆淮
    2020(3):327-330. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200306
    [摘要](4246) [HTML](55) [PDF 444.83 K](1332)
    摘要:
    新型冠状病毒肺炎是一种可在人与人之间传播的呼吸道疾病,该病首次出现于湖北省武汉市,由于具有高传染性,严重威胁全球公共卫生健康,2020年1月30日WHO将此次疫情定为国际突发公共卫生事件,并于2020年2月11日将新型冠状病毒肺炎命名为COVID?19(coronavirus disease 2019),国际病毒分类委员会则将分离出的病毒株命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS?CoV?2)。目前已被我国纳入乙类传染病,并按甲类传染病进行管理。为进一步提高眼科医务工作者对该病的认识,文章对SARS?CoV?2的特点、流行病学、传播途径,其他常见呼吸道病毒与眼部感染之间的关系,及应对疫情期间眼科医务工作者所需注意的防护工作进行论述。
    52  新型冠状病毒肺炎疫情期间胃癌患者临床诊治和管理策略
    吕嘉伦 汪未知 徐 皓 徐泽宽
    2020(3):322-326. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200305
    [摘要](4075) [HTML](65) [PDF 472.65 K](1257)
    摘要:
    2019年12月起武汉暴发的新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID?19)对胃癌患者的诊治造成了困难,同时也增大了医疗单位的压力。胃癌作为一种高度异质性的恶性肿瘤,在疫情期间应当针对其特点制定特殊的诊断和治疗方案,同时因地制宜进行合理的居家指导和全程管理,最大程度降低疫情对胃癌患者诊治的不良影响,使胃癌患者顺利度过COVID?19的流行期。
    53  新型冠状病毒肺炎潜在治疗药物研究进展
    周廉政 张明顺 吉宁飞 黄 茂
    2020(3):315-321. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200304
    [摘要](4312) [HTML](63) [PDF 624.36 K](1649)
    摘要:
    自2019年12月以来,新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID?19)疫情已蔓延至全国各地及部分国外地区。截至2020年2月21日,全国累计确诊人数已超7万。抗病毒药物方面,目前仍没有确认有效的药物。药物治疗已成为当前的热点话题,现结合我国已注册开展的COVID?19临床研究,将潜在有效的治疗药物及相关研究作一介绍,供临床参考和借鉴,以期临床早日用上有效药,从而提高治愈率,降低病死率,控制疫情的发展。
    54  江苏省儿童新型冠状病毒感染诊疗方案专家建议(试行第一版)
    江苏省新型冠状病毒感染肺炎医疗救治儿科专家组
    2020(3):309-314. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200303
    [摘要](3595) [HTML](70) [PDF 2.27 M](1218)
    摘要:
    55  康复医疗在COVID⁃19康复过程中的作用及启示
    励建安
    2020(3):306-308. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200302
    [摘要](3814) [HTML](59) [PDF 411.74 K](1169)
    摘要:
    新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID?19)是以肺部损害为特征,涉及全身多组织多器官的新疾病,一些患者在临床医疗过程完成后,其功能障碍可能是长期的,包括肺纤维化和累及心、肝、肾、神经和免疫系统等。康复医疗在疾病急性阶段有一定作用,对恢复期患者有突出的作用,包括改善呼吸功能、运动能力、生活自理能力、心理状态等。康复医疗不越位,也不能缺位。合理的康复方案需要进行科学研究,避免武断定论。
    56  大数据时代的临床医学研究——机遇和挑战
    沈洪兵
    2020(3):303-305. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200301
    [摘要](7212) [HTML](62) [PDF 432.48 K](3783)
    摘要:
    临床医学研究是医学发展的核心驱动力。在大数据背景下,国家高度重视、重点支持,通过顶层设计为我国临床医学研究提供制度保障和资源支撑。多组学与信息技术的飞速发展,为我国临床医学研究提供了宝贵的资源,助力临床医学研究内容的持续创新,催化临床诊疗模式的不断变革,我国临床医学研究正面临新的机遇。然而,目前我国生物医学大数据还存在存储碎片化、数据交汇机制缺乏等问题,亟需建立政府主导的数据共享机制,寻求通力合作的研究模式。在新的时代背景下,依托大数据的真实世界研究将逐渐成为临床干预的重要证据来源,我们要加强临床数据资源和生物样本资源的积累,创新研究方法,打破传统思维模式,迎接新的机遇与挑战。
    57  新型冠状病毒肺炎的抗体应对策略
    张 茜 冯振卿
    2020(2):155-159. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200202
    [摘要](3618) [HTML](61) [PDF 454.47 K](1782)
    摘要:
    迅速蔓延中国并扩散至全球的新型冠状病毒肺炎,已证明具有明显的人传染人特点,严重危害人类健康。新型冠状病毒传播性极强,由于人体内没有针对新型冠状病毒的特异性抗体,该病毒对人类健康和世界公共卫生安全已构成重大威胁。目前还没有疫苗和抗病毒特效药物用于新型冠状病毒肺炎的防治,因此,基于抗体的检测和临床治疗措施就显得尤为重要。文章从新型冠状病毒肺炎的抗体检测诊断、中和抗体及亚单位疫苗研发等方面进行综述评价,旨在聚焦新型冠状病毒肺炎的抗体应对策略,为新型冠状病毒肺炎的疫情防控提供新思路。
    58  冠状病毒疫苗研究进展及2019新型冠状病毒疫苗研发展望
    张明顺 吉宁飞
    2020(2):151-154. DOI: 10.7655/NYDXBNS20200201
    [摘要](5290) [HTML](62) [PDF 460.65 K](2340)
    摘要:
    2019新型冠状病毒传染性强,危重症发生率高,亟需有效的防控手段。疫苗接种是保护易感者,阻断传染性疾病传播的重要措施。文章总结了2002年SARS冠状病毒和2012年MERS冠状病毒疫苗灭活疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗研究进展。结合冠状病毒疫苗研究进展、牛痘苗的历史经验以及2019新型冠状病毒的特点,展望了2019新型冠状病毒疫苗研发的可能途径。
    59  心脏传导系统起搏的临床应用现状与展望
    王昆鹏 秦朝彤 石 璐 侯小锋
    2019(6):806-810. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190604
    [摘要](2477) [HTML](67) [PDF 426.69 K](1519)
    摘要:
    传统右心室部起搏会恶化心功能、增加死亡率。希氏束起搏利用了心脏特殊传导系统,可以使双心室同步激动,是最生理性的起搏方式。多个临床研究已证实希氏束起搏是可行的、安全的和有效的。左束支区域起搏是在生理性起搏的进一步探索中提出的全新的起搏方式,克服了希氏束起搏成功率低,感知和阈值不佳的问题,展现出良好应用前景。文章就希氏束起搏和左束支区域起搏的临床应用研究进展做一综述。
    60  永久性希浦系起搏——同步化治疗的新方向
    苏 蓝 黄伟剑
    2019(6):802-805. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190603
    [摘要](2622) [HTML](59) [PDF 16.81 M](1045)
    摘要:
    希浦系统起搏作为目前公认的真正生理性的起搏方式,造福了许多患者,但其手术难度和长期安全性仍让许多医生感到担忧。随着技术的革新,文章提出了原创的“4D技术”,使既生理又安全的传导束起搏得以实现。文章通过对2例经典病例的解读,解答了希浦系统起搏手术过程中经常遇到的3个问题:如何精确选择起搏部位,起搏部位应该多远更好,以及起搏点过病变部位如何判断,为临床医师提供了系统的参考。
    61  希浦传导系统的解剖及其临床意义
    杜安絜 钱智勇 邹建刚
    2019(6):797-801. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190602
    [摘要](2649) [HTML](54) [PDF 485.98 K](2006)
    摘要:
    希氏束为房室结的延续,其在室间隔肌部的顶端开始分为左右束支。希氏束主干穿透中心纤维体延伸为左束支,走行于无冠窦和右冠窦交界的下方,其分支呈带状外观分布于心内膜下。右束支较为细长,走行于节制索上。临床研究发现,希浦系统起搏对于房颤伴心衰、心肌病伴左束支传导阻滞等患者具有很好的疗效,对心室起搏依赖的患者进行希浦系统起搏也能保持良好的心室同步性。文章从希浦系统的解剖学特征及其对临床应用的指导意义进行综述。
    62  左束支起搏的现状与困惑
    李玉秋 陈柯萍
    2019(6):793-796. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190601
    [摘要](3326) [HTML](63) [PDF 446.27 K](2445)
    摘要:
    左束支起搏时激动沿传导系统下传,保持了较好的电和机械同步,是比较生理性的起搏方式。对于阻滞部位位于希氏束以下的患者,左束支起搏可以越过阻滞部位起搏,是目前起搏领域研究的热点。左束支起搏作为一项新技术,尚处于临床探索阶段,左束支起搏的定义、标准及术式还有待规范,如何筛选合适的适应证也是亟待解决的问题,长期有效性和安全性尚需大规模临床试验验证。
    63  重组腺病毒过表达Notch1受体胞内结合域(NICD1)外源性激活Notch信号通路
    廖军义 杜婷婷 黄 伟 何通川 徐 伟
    2019(3):320-325. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190302
    [摘要](2721) [HTML](68) [PDF 14.43 M](1257)
    摘要:
    目的:构建Notch1受体胞内结合域(Notch1 intracellular domain,NICD1)的重组腺病毒AdNICD1,探讨外源性过表达AdNICD1对Notch信号通路激活的影响。方法:利用高保真PCR(high fidelity PCR,Hi?Fi PCR)扩增NICD1编码区,并通过Gibson Assembly方法将其克隆至腺病毒载体中,经过菌落PCR、测序鉴定后,在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,再次通过质粒PCR鉴定,然后运用PacⅠ酶切线性化后用重组腺病毒载体转染过表达pTP基因的人胚肾293细胞(human embryo kidney 293 cell line,HEK293)中进行包装,收取病毒后使用过表达pTP基因的HEK293细胞扩增重组腺病毒AdNICD1。运用AdNICD1感染脂肪来源的间充质干细胞(immortalized multipotent adipose?derived mesenchymal stem cells,iMAD),检测病毒感染效率;通过Q?PCR检测NICD1和Notch下游基因表达情况;利用Western blot检测NICD1在蛋白水平的表达情况。结果:成功构建过表达NICD1的重组腺病毒并有效感染iMAD;利用AdNICD1可明显增加NICD1在基因和蛋白水平的表达,并激活Notch信号下游基因的表达。结论:成功构建过表达NICD1的重组腺病毒,并有效激活Notch信号通路。
    64  利用CRISPR/Cas9技术建立RelB敲除小鼠模型
    徐 帜 孙文博 张妍妍 许 勇 唐金海
    2019(3):313-319. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190301
    [摘要](2793) [HTML](48) [PDF 16.90 M](1414)
    摘要:
    目的:利用CRISP/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠中的RelB基因,为核因子(nuclear factor,NF)?κB转录因子蛋白家族的RelB基因与肿瘤转移等方面的研究提供RelB基因敲除实验动物模型。方法:利用基因编辑技术CRISPR/Cas9系统,设计并构建针对目的基因RelB第4外显子sgRNA,同时利用T7 RNA聚合酶体外转录Cas9 mRNA。取C57BL/6小鼠受精卵体外注射sgRNA和Cas9 mRNA后,进行胚胎移植,实现靶基因敲除。待小鼠出生后提取DNA并进行PCR鉴定,获得F0代,后与野生型交配后繁殖,取样提取DNA,测序分析鉴定后获得F1代小鼠,并在蛋白质水平和基因组水平分别验证敲除效果。结果:获得了4个在RelB基因突变的首建鼠,并得到了稳定遗传的RelB基因敲除小鼠。基因组测序结果示,敲除实验组中RelB的mRNA出现无义突变,令其mRNA翻译终止。与对照组相比,敲除实验组检测不到RelB蛋白表达。同时,Western blot结果显示,NF?κB家族中其他成员RelA、p50和p52的蛋白表达不受影响。结论:成功获得特异性敲除RelB的C57BL/6小鼠,为RelB在肿瘤转移、耐药中的研究提供了重要工具。
    65  m6A识别蛋白Ythdf1在精子发生中的作用研究
    刘媛媛 宋小玲 王仿竹 齐美杰 沈 彬
    2019(2):171-175. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190202
    [摘要](2929) [HTML](57) [PDF 120.24 M](1406)
    摘要:
    目的:构建YTH N6甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTH N6?methyladenosine RNA binding protein 1,Ythdf1)的基因敲除小鼠,研究其在小鼠精子发生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9敲除技术及原核注射技术构建Ythdf1基因敲除小鼠模型,通过免疫荧光、HE染色对敲除小鼠睾丸及附睾进行形态学分析,通过交配实验进行生殖力测试,研究Ythdf1基因对雄性小鼠精子发生的影响。结果:RT?PCR结果显示,Ythdf1在1~8周龄雄鼠睾丸中均有表达;成功构建Ythdf1基因敲除小鼠;成年敲除小鼠精子发生、附睾及生育力均无异常。结论:在正常饲养情况下,敲除Ythdf1基因对雄性小鼠精子发生无影响。
    66  人脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及其溶血性能研究
    杨玮杰 李佳曌 陈良键 张 婧 刘凯鲁 张 驰 肖 月 李 晶
    2019(2):165-170. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190201
    [摘要](2944) [HTML](54) [PDF 33.77 M](1572)
    摘要:
    目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;制备人红细胞悬液,加入不同浓度外泌体,进行溶血试验,用试管法观察并用紫外分光光度法测定计算溶血度。结果:分离获得的外泌体特异富集蛋白CD9、CD81、Alix,不含有高尔基体蛋白Gm130;透射电镜下可见其呈杯盘状结构,粒径直径为40~120 nm;脐带干细胞外泌体对人血的溶血率小于5%。结论:HUCMSC分泌的外泌体具有外泌体的经典结构及典型特征,不引起人血溶血反应,为未来脐带干细胞外泌体作为载体进行药物递送提供了实验依据。
    67  AGAP2⁃AS1调控Ras/MAPK信号通路促进结直肠癌细胞的增殖
    王庆源 彭 稳 李 杰 顾奇偶 傅 赞
    2019(1):16-20. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190103
    [摘要](2421) [HTML](58) [PDF 6.92 M](1769)
    摘要:
    目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)AGAP2?AS1对结直肠癌细胞增殖能力的影响及其相关机制。方法:采用 qRT?PCR 检测 50 例结直肠癌组织和正常肠黏膜组织中 AGAP2?AS1 的表达水平;采用 siRNA?AGAP2?AS1 小干扰序列转染至人结直肠癌细胞系 DLD?1和HT29 细胞中,qRT?PCR 检测细胞转染效率,CCK8 实验和平板克隆形成实验检测 AGAP2?AS1 对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞周期分布的变化;Western blot 检测 MAPK 通路相关蛋白(Ras、Raf?1、MEK、ERK)的表达。结果:与正常肠黏膜上皮组织相比,AGAP2?AS1 的 mRNA 表达水平在结直肠癌中明显上调;下调 AGAP2?AS1 表达后,DLD?1 和 HT29 细胞增殖能力降低,细胞周期阻滞于G0/G1期,Ras、p?Raf?1、p?MEK 和p?ERK 蛋白表达水平明显降低。结论:AGAP2?AS1 通过调控 Ras/MAPK 通路促进结直肠癌细胞的增殖。
    68  大鼠MIP⁃1α基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及其IRF⁃8结合元件的初步鉴定
    钱宝梅 王文博 罗 灿 张 婧 赵 聃 王迎伟 邱 文
    2019(1):10-15. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190102
    [摘要](2329) [HTML](52) [PDF 3.51 M](1487)
    摘要:
    目的:构建大鼠巨噬细胞炎性蛋白?1α(macrophage inflammatory protein?1α,MIP?1α)基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,并观察在人胚肾细胞(HEK?293T)中过表达干扰素调节因子?8(interferon regulatory factor?8,IRF?8)对MIP?1α基因启动活性的影响,同时筛选其可能的IRF?8结合元件。方法:采用PCR技术,扩增出大鼠MIP?1α基因启动子序列,将MIP?1α基因启动子插入到荧光素酶报告基因载体pGL3?basic中,构建MIP?1α基因启动子全长荧光素酶报告质粒(pGL3?MIP?1α?FL)。将上述pGL3?MIP?1α?FL和本课题组已构建的大鼠IRF?8过表达质粒(pIRES2?IRF?8)共转染HEK?293T细胞,检测细胞内荧光素酶活性,确定IRF?8对MIP?1α基因的启动作用。同时,应用生物信息学软件预测MIP?1α基因启动子上IRF?8的结合元件,并据此构建3个MIP?1α基因启动子截短的荧光素酶报告质粒(pGL3?MIP?1α?1~3)。将上述MIP?1α基因启动子全长和各截短的荧光素酶报告质粒和IRF?8过表达质粒共转染HEK?293T细胞,再测定荧光素酶活性,初步确定IRF?8的结合元件。结果:菌液PCR及核酸测序证实,上述pGL3?MIP?1α?FL(-1 400~+94 nt)质粒构建成功。将pGL3?MIP?1α?FL和pIRES2?IRF?8共转染HEK?293T后发现,过表达IRF?8可显著增加MIP?1α基因启动子活性。应用生物信息学软件预测发现MIP?1α基因启动子上IRF?8的结合元件(-1 157~-1 144nt、-740~-734 nt、-683~-670 nt、-365~-359 nt、-249~-236 nt),并据此构建3个MIP?1α基因启动子截短的荧光素酶报告质粒,即pGL3?MIP?1α?1(-453~+94 nt)、pGL3?MIP?1α?2(-352~+94 nt)和pGL3?MIP?1α?3(-3~+94 nt)。将pGL3?MIP?1α?FL、pGL3?MIP?1α?1~3和pIRES2?IRF?8共转染HEK?293T后发现,pGL3?MIP?1α?3的启动活性显著低于pGL3?MIP?1α?FL、pGL3?MIP?1α?1和pGL3?MIP?1α?2。提示IRF?8可能结合在大鼠MIP?1α基因启动子的-352~-3 nt区域的IRF?8结合元件(-249~-236 nt)上。结论:本实验成功构建了大鼠MIP?1α基因启动子全长及截短荧光素酶报告质粒,并初步筛查出IRF?8在MIP?1α基因启动子上的可能结合元件,为后续研究奠定了基础。
    69  9种不同心血管风险的临床药物对hERG钾通道的作用
    孙红云 邢红艳 赵 琪 王淑颜 宋 征 李 华 汪溪洁
    2019(1):1-9. DOI: 10.7655/NYDXBNS20190101
    [摘要](4033) [HTML](57) [PDF 38.88 M](1939)
    摘要:
    目的:在GLP实验室评估膜片钳检测临床用药物对hERG(human ether?à?go?go related gene)钾通道作用的差异性和重复性,研究9种致尖端扭转型室速(TdP)风险的临床用药物(高风险临床用药物:苄普地尔、奎尼丁、索他洛尔;中风险临床用药物:昂丹司琼、西沙比利、特非那定;低风险临床用药物:雷诺嗪、维拉帕米和美西律)对hERG钾通道的阻断作用。方法:采用全细胞膜片钳技术记录不同浓度的苄普地尔、奎尼丁、索他洛尔、昂丹司琼、西沙比利、特非那定、雷诺嗪、维拉帕米和美西律作用于外源稳定转染表达hERG钾通道的HEK293细胞(hERG?HEK293稳态细胞)后hERG电流(IKr)的变化,研究上述临床用药物对IKr作用的浓度依赖性及半数抑制浓度(IC50)。结果:9种临床用药物对hERG?HEK293细胞上IKr作用具有浓度依赖性,且高风险临床用药物苄普地尔和奎尼丁的IC50值分别为98.32 nmol/L和1.95 μmol/L,索他洛尔的IC50值大于300 μmol/L;中风险临床用药物昂丹司琼、西沙比利和特非那定的IC50值分别为0.94 μmol/L、39.10 nmol/L和128.58 nmol/L;低风险临床用药物雷诺嗪、维拉帕米和美西律的IC50值分别为9.94 μmol/L、235.49 nmol/L和65.56 μmol/L。本实验所得临床用药物IC50值基本与文献相符。结论:临床用药物致TdP风险与hERG通道的阻滞作用密切相关,但hERG通道阻断不等同于TdP风险,还与心脏上表达的多种离子通道有关,某些临床用药物可以通过阻断钠通道和钙通道而降低风险。本研究结果提示本方法所得数据可靠,为国内GLP实验室进行hERG钾通道评价研究提供了参考依据,可用于药物心脏毒性评价。
    70  长链非编码 RNA BANCR在胃癌中表达及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响
    崔 鹤 居晓斌 叶 琴 潘 猛 周惠英
    2018(12):1674-1678. DOI: 10.7655/NYDXBNS20181202
    [摘要](2206) [HTML](61) [PDF 17.14 M](1319)
    摘要:
    目的:检测长链非编码RNA BANCR在胃癌组织中的表达,并探讨其对胃癌细胞迁移、侵袭生物学行为的调控作用与相关机制。方法:采用荧光定量PCR(QPCR)和TCGA?STDA数据库分析胃癌组织和癌旁组织中BANCR的表达水平,采用小干扰RNA(siRNA)技术敲低胃癌细胞MKN28 BANCR的表达,采用Transwell、QPCR检测MKN28细胞的迁移、侵袭情况以及肿瘤细胞转移相关标志物的表达水平变化。结果:胃癌组织中BANCR的表达水平呈明显上调。敲低BANCR表达后,MKN28细胞的迁移、侵袭能力被抑制,转移相关分子CDH1的表达量显著增加,而Vimentin的表达量显著降低。此外,敲低BANCR下调ZEB1表达,同时干扰miR?203能部分恢复ZEB1的表达水平。结论:BANCR在胃癌组织中呈高表达,其可能通过调节miR?203?ZEB1?CDH1轴促进胃癌细胞迁移和侵袭。
    71  正电荷载基因纳米微泡的超声成像及靶向杀伤肝癌细胞的研究
    王 玲 李 嘉 卢航青 高 启 丁粉干 袁晨燕 张东生
    2018(12):1667-1673,1700. DOI: 10.7655/NYDXBNS20181201
    [摘要](2382) [HTML](59) [PDF 17.54 M](1497)
    摘要:
    目的:制备载基因纳米微泡并探讨其体内外超声成像和靶向杀伤肝癌细胞的效果。方法:采用薄膜水化?机械震荡法制备磷脂为壳膜、六氟化硫(suphurhexafluoride,SF6)气体为核心的正电荷纳米微泡,再偶联甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)启动子的单纯疱疹病毒胸苷激酶(simplex herpes virus thymidine kinase,HSV?TK)质粒DNA制备载基因纳泡。对其形态、平均粒径、zeta电位、DNA结合力、基因转染进行检测;然后对其体内外超声成像特性进行考察;最后采用CCK?8和流式细胞(FCM)分析检测载基因纳泡联合超声靶向微泡击破(ultrasound?targeted microbubble destruction,UTMD)技术对BEL?7402和SMCC?7721细胞的杀伤作用。结果:电镜显示纳泡呈圆球形壳核结构;平均水合粒径约为667 nm,带正电;琼脂糖凝胶电泳显示质量比≥5时,纳泡可有效结合质粒DNA;体内外超声显示载基因纳泡具有良好的超声对比增强特性;RT?PCR检测显示纳泡联合UTMD能使HSV?TK在AFP阳性肝癌细胞内表达。CCK?8 和FCM分析显示载基因纳泡+UTMD组能显著抑制BEL?7402细胞的增殖和诱导其凋亡,与其他组相比差异具有显著性(P < 0.05)。结论:具有良好超声成像功能的载基因纳泡能够高效靶向杀伤AFP阳性的肝癌细胞。
    72  金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraPL⁃Lectin特异性抗体的制备及其功能分析
    岳 岩 郑 峰 曹清心 王怡雯 周婷婷 王长军
    2018(11):1494-1498. DOI: 10.7655/NYDXBNS20181102
    [摘要](1851) [HTML](60) [PDF 7.34 M](1371)
    摘要:
    目的:制备金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraPL?Lectin单克隆抗体,并分析其体外功能。方法:以USA300基因组为模板,PCR扩增SraPL?Lectin基因序列,克隆到pET28a表达载体中,0.1 mmol/L IPTG 25 ℃诱导6 h,镍柱亲和层析纯化SraPL?Lectin?His蛋白。以纯化的SraPL?Lectin?His重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,采用常规融合技术制备杂交瘤细胞,间接ELISA法、Western blot法筛选和鉴定阳性杂交瘤细胞株。扩大培养阳性细胞株后注射小鼠腹腔,收集腹水,经Protein G柱纯化anti?SraPL?Lectin单克隆抗体。以不同终浓度的单克隆抗体预先孵育A549细胞和注射小鼠腹腔,涂板计数单克隆抗体阻断细菌黏附、侵入和感染的能力。结果:成功构建了SraPL?Lectin?pET28a重组表达载体,经镍柱纯化后获得高纯度的重组蛋白,获得稳定分泌单克隆抗体的细胞株,小鼠腹水经Protein G柱纯化后获得纯度高达95%以上的特异性抗体,效价1∶32万。终浓度100 ng/mL单克隆抗体预先孵育A549细胞2 h,能够显著降低金黄色葡萄球菌对A549细胞的黏附和侵入。提前1 d向小鼠腹腔注射1 μg anti?SraPL?Lectin单克隆抗体,能够显著降低小鼠血液中的金黄色葡萄球菌数量。结论:本研究制备的anti?SraPL?Lectin单克隆抗体能够阻断金黄色葡萄球菌对宿主细胞的黏附和侵入,为将SraPL?Lectin作为防控金黄色葡萄球菌感染药物靶点的研发奠定了基础。
    73  C225偶联磁性白蛋白纳米球的制备、表征及联合磁流体热疗体外靶向抗肺癌的研究
    王 玲 高 启 李 嘉 丁粉干 袁晨燕 张东生
    2018(11):1487-1493,1505. DOI: 10.7655/NYDXBNS20181101
    [摘要](2089) [HTML](67) [PDF 9.50 M](1461)
    摘要:
    目的:制备抗表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)单抗西妥昔(C225)偶联的磁性白蛋白纳米球,对其表征并联合磁流体热疗观察其体外抑制肺癌细胞的效果。方法:化学共沉淀法制备Fe3O4磁性纳米粒,去溶剂化?交联法制备磁性白蛋白纳米球(magnetic albumin nanospheres,MANs),然后用双功能交联剂N?琥珀酰亚胺?3?(2?吡啶二硫代)丙酸酯[N?succinimidyl?3?(2?pyridyldithio)propionate,SPDP]将C225偶联其上制备C225?MANs。纳米球的形态、平均粒径、zeta电位、抗体结合率、含铁量、细胞靶向性及磁热动力学均被表征。最后采用CCK?8及流式细胞(flow cytometry,FCM)分析检测C225?MANs介导的体外双靶向磁流体热治疗肺腺癌细胞GLC?82的效果。结果:透射电镜显示制备的C225?MANs为球形,Fe3O4纳米粒被封装其内,Fe含量约2.0 mg/mL;平均水合粒径约为140 nm,带负电;在输出电流20 A、输出频率200 kHz的交变磁场作用下,不同Fe含量的C225?MANs能在 60 min内升温到39.3 ℃~52.0 ℃,且加热30 min后温度能保持恒定。FCM荧光检测显示抗体结合率为79.74%。免疫荧光实验和细胞MRI成像证实C225?MANs能够靶向GLC?82细胞。CCK?8与FCM分析显示双靶向联合治疗组的细胞增殖率明显低于其他治疗组,而凋亡率明显高于其他治疗组(P < 0.05)。结论:C225?MANs对肺腺癌细胞GLC?82具有良好的靶向效应,且双靶向磁流体热疗联合分子靶向治疗在体外能有效抑制肺癌细胞。
    74  右心导管检查在左心疾病相关性肺动脉高压中的应用
    李江津 邹建刚
    2017(3):271-274,327. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170303
    [摘要](3975) [HTML](53) [PDF 607.05 K](2401)
    摘要:
    左心疾病相关性肺动脉高压是最常见的肺动脉高压类型,即2型肺动脉高压。准确判断肺动脉高压对其诊断、治疗和预后判断有重要指导意义。右心导管检查是诊断肺动脉高压的金标准,近年来右心导管检查逐渐应用于左心疾病相关性肺动脉高压的临床研究。本文就右心导管检查在左心疾病相关性肺动脉高压中的应用进展进行综述。
    75  围产期心力衰竭——中国二胎时期面临的挑战
    杨晨蝶 金 玮
    2017(3):267-270. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170302
    [摘要](3411) [HTML](68) [PDF 595.67 K](1439)
    摘要:
    围产期心力衰竭是指发生在妊娠第28周至产后1周的心力衰竭,由多种病因引起,主要分为心脏基础疾病与非心脏基础疾病,前者以先天性心脏病、风湿性心脏病为主,后者包括妊娠期高血压(尤其是先兆子痫)、围产期心肌病等,诊断时需加以鉴别。围产期心衰的治疗需要强大的多学科团队共同参与,根据不同的病因对症处理,且需兼顾孕妇及胎儿的安全。围产期心衰是中国二胎时期面临的一个重要挑战,有待更为深入的研究。
    76  心电学参数在心力衰竭预后评估中的应用
    王 凯 王慧敏 吴倩芸 李新立
    2017(3):261-266. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170301
    [摘要](4211) [HTML](57) [PDF 733.38 K](1830)
    摘要:
    心力衰竭(heart failure,HF)是心血管疾病的终末期表现和最主要的死因。对其进行危险度分层及死亡率的预测,一直是备受关注的临床研究领域。心电学参数以无创、简单、可靠等优点逐渐展现了广阔的应用前景。本综述旨在分析QRS时限、心室晚电位、T波电交替、窦性心率震荡、心率减速力与连续心率减速力、室性早搏与非持续性室速等心电学参数在评估HF患者预后中的应用价值及最新研究进展,有助于我国临床工作者更加准确地评估HF患者病情,并及时采取相应的干预性治疗。
    77  可穿戴设备的现状及未来发展方向
    秦 钦 李 潍 朱松盛 李建清
    2017(2):149-153,230. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170203
    [摘要](3319) [HTML](50) [PDF 315.70 K](2569)
    摘要:
    穿戴式技术是当前重要的研究热点,可以应用于医院内患者实时监测和家庭健康护理领域,具有广泛的应用前景和巨大的市场潜力。穿戴式技术对设备的可穿戴性和数据传输的可靠性?安全性提出了更高要求,技术发展中存在一些需要深入研究和解决的问题。文章对穿戴式技术的研究现状和产业化进展进行了综述,并对穿戴式技术的未来研究和发展前景进行了展望。
    78  基于封闭式卡盒的现场病原体检测系统的设计与实现
    廖 佩 陈 慧 邬燕琪 方壹乐 陈 柱 邓 燕 何农跃
    2017(2):139-148. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170202
    [摘要](4065) [HTML](61) [PDF 10.02 M](1536)
    摘要:
    目的:设计操作简单?成本低?便携和易于实现自动化等特点的小型化现场病原体检测系统,实现在传染病疫情爆发现场对传染病病原体的快速检测。方法:设计一款封闭式病原体检测卡盒,可进行一体化病原体核酸检测,并创新性地采用3D打印技术对该卡盒进行迭代设计和制造。在此基础上,研发与之配套的全自动便携式核酸检测系统,整套系统可自动化完成病原体核酸的单重检测或多重检测。结果:在卡盒和全自动便携式核酸检测系统设计完成后,分别对其进行各项性能的测试,如卡盒的气密性和移液性能,混匀性能等,测试结果均能满足病原体核酸检测的要求。以百日咳杆菌为代表,将整套系统应用于实际的病原体核酸检测,实验结果表明该卡盒系统可自动化完成核酸检测。结论:该系统能够成功地完成现场传染病从样本输入到结果输出的自动化一体化检测过程,实验结果准确可靠。
    79  基于微气泡的超声分子影像探针及其研究进展
    段 磊 张宇璠 顾 宁
    2017(2):129-138. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170201
    [摘要](3995) [HTML](78) [PDF 1.52 M](2394)
    摘要:
    微气泡是超声成像的传统造影剂,从而也成为超声分子成像中最重要的一类探针载体,多模态?多功能?智能化是微气泡类分子探针的发展趋势。近年来一批设计新颖?功能多样的微气泡类分子探针陆续出现,文章在阐述传统微气泡分子探针发展状况的基础上,对融合多种成像方式的多模态微气泡分子探针?诊疗一体化的多功能微气泡分子探针?由特殊病理环境触发的刺激响应型超声分子探针及组织穿透力更强的纳米尺度超声分子探针,在设计思路及研究现状等方面进行了综述。
    80  天然型调节性T细胞在胸腺内的分化发育机制
    汪 瀚 翟 原
    2017(1):15-19. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170103
    [摘要](3348) [HTML](109) [PDF 566.40 K](1798)
    摘要:
    调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)是一群胸腺来源的具有免疫抑制功能的T淋巴细胞,其与自身免疫疾病的发生、外周免疫耐受以及抗感染免疫、肿瘤免疫、移植免疫、变态反应等许多病理性免疫过程有着极其重要的关系。天然型调节性T细胞(natural Treg, nTreg)或称胸腺调节性T细胞(thymus regulatory T cell, tTreg)是调节性T细胞群中很重要的一个亚群。本文将对这一主要亚群及其分化、发育、增殖等过程和相关调控机制进行综述。
    81  调节性T细胞(Treg)中miRNA信号通路的研究进展
    陆云杰 高 骥 王学浩
    2017(1):10-14. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170102
    [摘要](4188) [HTML](53) [PDF 489.94 K](2153)
    摘要:
    CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)在维持机体免疫平衡中起着不可或缺的作用。在目前的医学临床研究中,适量输注Treg细胞被证明是一种治疗移植物抗宿主疾病(graft-versus-host disease, GVHD)的有效方式。因此,如何通过适当的方法增强Treg细胞的免疫抑制功能、增殖能力及体内存活时间成为基础和临床免疫学研究学者们非常关注的一个课题。microRNAs (miRNAs)是一类能够对mRNA进行负调节从而抑制靶蛋白表达的非编码RNA,目前有数个miRNA被证明能够直接或间接影响Treg细胞功能。在此我们对这些miRNA信号通路与Treg细胞之间的关系作一综述,为将来的基础和临床研究提供新的思路。
    82  Foxp3+调节性T细胞分化发育及其功能稳定性研究进展
    赵启航 梁 瑞 李 丹 李 斌
    2017(1):1-9. DOI: 10.7655/NYDXBNS20170101
    [摘要](5551) [HTML](65) [PDF 1.37 M](3106)
    摘要:
    Foxp3+调节性T细胞(Foxp3+Treg)是一类能抑制免疫系统攻击机体自身组织的一类CD4+T细胞亚群,其关键性表型特征在于表达Forkhead家族转录因子Foxp3。Foxp3在CD4+调节性T细胞的分化、发育和功能稳定的过程中发挥着重要功能。Foxp3蛋白水平变化导致的调节性T细胞功能稳定性改变与人类多种重大免疫相关疾病如感染性疾病、自身免疫病、过敏性疾病、肿瘤发生与转移、移植排斥等密切相关。研究Foxp3+调节性T细胞分化发育和功能稳定性的分子机制,将为相关免疫疾病治疗提供新思路新靶点。
    83  Trop2过表达对人胃黏膜上皮细胞GES-1迁移能力的影响及机制
    饶月丽 沈 定 陈伟民 许冬亚 赵 薇 丁贵鹏 严 杰
    2016(11):1300-1305. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161104
    [摘要](2793) [HTML](69) [PDF 3.09 M](1175)
    摘要:
    目的:观察Trop2过表达对人胃黏膜上皮细胞GES-1迁移能力的影响,并对其作用机制进行初步探讨?方法:real-time PCR和Western blot检测GES-1细胞中Trop2 mRNA和蛋白的表达水平;构建过表达Trop2质粒及空载对照质粒并转染GES-1细胞,检测转染效率;细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测过表达Trop2后GES-1细胞迁移能力的变化情况;Western blot检测过表达Trop2后GES-1细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子[上皮细胞标志E-钙黏附蛋白(E-cadherin),间皮细胞标志纤维连接蛋白(fibronectin)?波形蛋白(vimentin)]的变化情况?结果:相比胃癌细胞株BGC823和MGC803,Trop2在GES-1细胞中的mRNA和蛋白表达水平均较低;过表达Trop2的质粒转染GES-1后,Trop2的mRNA表达水平与未转染组相比提高(6.18 ± 0.52)倍,而空载对照组和未转染组相比无明显变化,蛋白水平的变化情况和mRNA相似;细胞划痕实验表明,转染72 h后,过表达组细胞迁移率达到95%,空载对照组细胞迁移率为50%,两组相比差异有统计学意义(P﹤0.05);Transwell迁移实验发现,转染24 h后,过表达组穿膜细胞数为(87 ± 6)个,而空载对照组为(41 ± 6)个,两组相比差异有统计学意义(P﹤0.05);Western blot检测过表达Trop2后,随着Trop2蛋白表达量增高,GES-1细胞E-cadherin表达下调,fibronectin和vimentin表达上调?结论:Trop2过表达可以提高胃黏膜上皮细胞的迁移能力,其机制与Trop2促进胃黏膜上皮细胞EMT有关?
    84  锌α2糖脂蛋白通过调节ATP水平影响大肠癌HT-29细胞的侵袭能力
    胡 俊 李 原 黄培林 魏 青 常立功 胡明玥 周玲娜 申 霞 燕 丹
    2016(11):1295-1299. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161103
    [摘要](3633) [HTML](54) [PDF 5.01 M](1289)
    摘要:
    目的:锌α2糖脂蛋白(zinc-alpha-2-glycoprotein 1,ZAG)是新近发现的具有复杂功能的蛋白,ZAG参与受精?脂代谢及免疫调节等多种细胞生物学行为,本研究探讨ZAG在大肠癌演进过程中的作用?方法:本研究构建ZAG干扰质粒,并转染入HT-29结肠癌细胞株,免疫印迹与逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测转染前后ZAG表达的变化;检测转染前后细胞三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量的变化,以了解ZAG对细胞代谢的影响;利用小室实验检测转染前后HT-29细胞侵袭能力的变化?结果:ZAG干扰质粒成功转染入HT-29细胞并筛选出稳定转染细胞株;转染后的HT-29细胞ATP水平上调,且转染后的HT-29侵袭能力增强?结论:研究结果提示ZAG可能通过调节ATP水平增强大肠癌HT-29细胞的侵袭能力,为大肠癌治疗提供了有价值的新靶点?
    85  肝癌中TLR3信号分子与自噬相关基因表达的相关性及临床意义
    李云龙 王 梅 付鲁渝 刘淑岩 王桂兰 陈 莉
    2016(11):1285-1294. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161102
    [摘要](3803) [HTML](69) [PDF 10.98 M](1432)
    摘要:
    目的:研究肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)及信号分子含TIR结构域的转接蛋白(TIR-domain-containing adaptor protein including IFN-β,TRIF)表达与细胞自噬相关蛋白Beclin1和LC3表达的相关性及临床意义,并探讨相关机制?方法:收集与随访101例HCC病例,构建肝组织芯片?HE染色判断HCC的组织分化,免疫组化染色检测HCC组织中Ki-67?TLR3?TRIF? LC3 和Beclin l的表达,应用TUNEL方法检测肿瘤细胞凋亡信号?统计学分析其临床病理因素和预后?结果:本组HCC中TLR3和TRIF表达呈正相关(ρ=0.640,P < 0.001),其高表达分别与肿瘤HbsAg感染?硬化背景?细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及患者5年总生存率呈正相关,与肿瘤细胞增殖?血管浸润?Edmondson分级和TNM分期呈负相关?Beclin1和LC3表达呈显著正相关(ρ=0.587,P < 0.001),两者高表达分别与肿瘤脉管浸润?Edmondson分级?TNM分期?肿瘤细胞增殖呈正相关,与AI和预后呈负相关?并且TLR3?TRIF分别与LC3 和Beclin1的表达呈负相关(P均<0.001)?结论:HCC中TLR3及其信号分子TRIF表达,细胞自噬相关基因Beclin1和LC3的表达分别通过调控细胞增殖?凋亡和自噬来影响肿瘤的生物学行为和预后?HCC组织中Beclin1介导的自噬途径与TLR3信号凋亡通路存在交叉,两条通路异常可能是HCC发生?进展的机制之一?
    86  精准医学之个体化肿瘤医学的现状与未来
    冯振卿
    2016(11):1283-1284. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161101
    [摘要](3286) [HTML](53) [PDF 221.97 K](1613)
    摘要:
    87  内镜微创切除进展、困难与挑战
    周平红 蔡明琰
    2016(10):1161-1165. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161003
    [摘要](1999) [HTML](54) [PDF 5.18 M](1395)
    摘要:
    自内镜黏膜下剥离术(ESD)引进国内之后,内镜切除领域得到了飞速的发展。ESD作为治疗早期胃肠道肿瘤的首选治疗得到了认可。本文对内镜切除领域的新进展进行了总结,包括ESD?隧道内镜技术?内镜全层切除技术及其对应的缝合技术,并总结和展望了面临的困难和挑战。
    88  超声内镜在胰胆疾病治疗中的应用
    金震东 郭杰芳
    2016(10):1157-1160. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161002
    [摘要](2216) [HTML](50) [PDF 246.37 K](1068)
    摘要:
    近年来,随着线阵式彩色多普勒超声内镜的问世及穿刺器械设备的发展,以超声内镜引导下穿刺为基础的介入性超声内镜已逐渐发展成为一种成熟的微创性治疗。目前,超声内镜介入治疗已被广泛应用于临床。文章就超声内镜在胰胆疾病治疗中的应用进展进行综述。
    89  经内镜逆行胰胆管造影术的过去、现在与未来
    缪 林 李全朋
    2016(10):1153-1156. DOI: 10.7655/NYDXBNS20161001
    [摘要](1946) [HTML](56) [PDF 288.10 K](1300)
    摘要:
    90  基于TCGA数据库挖掘肺腺癌预后相关的甲基化位点和基因
    王 可 赵荣仙 杨素莲 孟 瑜 魏 晟
    2016(6):665-669. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160605
    [摘要](6226) [HTML](80) [PDF 251.15 K](2811)
    摘要:
    目的:通过对TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库的数据挖掘,扫描全基因组范围内的肺腺癌预后相关的甲基化位点?方法:采用2016年4月从TCGA网站下载的肺腺癌预后数据及基于Illumina Methylation 450芯片的全基因组甲基化数据,经过数据连接,纳入同时有临床预后信息和甲基化数据的肺腺癌患者232例?采用Cox比例风险模型分析各位点甲基化水平对肺腺癌总生存率的影响,并评估其与对应基因mRNA表达的相关性,进一步评估mRNA表达对肺腺癌预后的影响?结果:纳入的232例肺腺癌患者的平均年龄为(64.823 ± 9.300)岁,平均生存时间为(20.217 ± 17.067)个月?本研究发现肺腺癌预后相关最显著的甲基化位点为位于基因EHBP1区域的cg03955927(P=1.98×10-7),对应的HR值及95%可信区间为0.605(0.501~0.731)?筛选的肺腺癌预后关联性最强的前20个甲基化位点中,17个位点的高甲基化水平为肺腺癌预后的保护因素,其他3个为危险因素?5个甲基化位点的甲基化水平与对应基因的mRNA表达相关,其中cg12013757对应的KRI1基因的mRNA表达与肺腺癌的预后有关(HR:1.316,95%CI:1.109~1.561,P=0.001 6)?结论:本研究通过对TCGA数据库的挖掘,初步发现KRI1基因的甲基化位点的甲基化水平对肺腺癌的预后有影响,可以作为为肺癌预后的生物标志物进一步研究?
    91  基于核磁共振的食管鳞癌血清代谢组学研究
    唐小虎 童 雷 杨 明
    2016(6):659-664. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160604
    [摘要](3691) [HTML](83) [PDF 623.66 K](1267)
    摘要:
    目的:食管鳞癌是一种在我国高发的恶性肿瘤,不易被早期发现且缺乏临床早期诊断分子标志物?因此,本研究拟使用基于核磁共振的血清代谢组学方法来寻找食管鳞癌相关的代谢分子标志物?方法:使用基于核磁共振的代谢组学方法比较了发现组(29例食管鳞癌患者和31例正常人)血清样本中代谢物的差异,进而在验证组(20例食管鳞癌和21例正常人)中验证了相关结果?使用主成分分析?最小二乘法得到了和食管鳞癌相关的代谢组学指纹图谱?结果:利用人工神经网络,我们发现脯氨酸和谷氨酰胺为食管鳞癌相关血清代谢标志物,并使用聚类分析对这两个标志物进行验证?这两个代谢物含量分析结果显示,脯氨酸和谷氨酰胺在食管鳞癌患者血清中的含量显著低于正常人?结论:基于核磁共振的血清代谢组学方法是一种潜在的食管鳞癌早期诊断方法?
    92  Hedgehog信号通路基因启动子区多态性与广西地区人群肝细胞癌易感性的关系
    邱模勤 杨 丹 于祥远 秦林原 贝春华 王倩倩 谭盛葵 曾小云 仇小强 余红平
    2016(6):653-658. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160603
    [摘要](2435) [HTML](79) [PDF 296.46 K](1292)
    摘要:
    目的:探讨Hedgehog(Hh)信号通路基因启动子区多态性与广西地区人群肝细胞癌遗传易感性的关系?方法:采用以医院为基础的病例对照研究,以1 041例肝细胞癌患者和1 074例非肿瘤对照者为研究对象,应用Sequenom Mass Array基因分型技术检测Hh信号通路基因启动子区的9个潜在功能性多态性位点的基因型,并分析各多态性位点与肝细胞癌易感性的关系?结果:在调整年龄?性别?吸烟?饮酒以及HBV感染等因素后,携带STK36 基因rs34237608 AG基因型者罹患肝细胞癌的风险降低(OR=0.67,95%CI=0.47~0.95;P=0.025);GG基因型与肝细胞癌易感性之间的关系无统计学意义(P > 0.05);在显性模型下,rs34237608位点AG/GG基因型可降低罹患肝细胞癌的风险(OR=0.67,95%CI=0.48~0.95;P=0.025)?本研究未发现其他候选位点多态性与肝细胞癌易感性有统计学意义?结论:STK36 基因rs34237608位点多态性可能与广西人群肝细胞癌易感性有关联?
    93  外周血相对端粒长度与头颈部鳞癌死亡风险的关联研究
    余成啸 许冲全 王礼华 马红霞
    2016(6):648-652. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160602
    [摘要](2192) [HTML](64) [PDF 250.91 K](1091)
    摘要:
    目的:探讨中国汉族人群中端粒长度与头颈部鳞癌患者死亡风险的关联?方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测241例头颈部鳞癌患者外周血DNA端粒相对长度,结合临床信息和随访资料,进行端粒长度与头颈部鳞癌死亡风险的关联分析?通过Kaplan-Meier方法和Log-rank检验比较生存时间差异,COX比例风险回归模型估计风险比(hazard ratio,HR)及95%CI?结果:将头颈部鳞癌病例按照端粒长度的三分位数分为3组后,端粒长度由短至长的第1?2和3组的平均生存期显著增加(分别为40.46?41.76和46.18个月,趋势性P=0.009)?与相对端粒长度<1.19的患者相比,相对端粒长度>1.49的患者死亡风险显著降低(HR:0.40,95%CI:0.20~0.80)?分层分析结果表明,较长的端粒长度与头颈部鳞癌患者死亡风险的关联在<62岁的患者?女性?不吸烟者以及不饮酒者中更为显著?结论:端粒长度可能与头颈部鳞癌患者的预后存在一定关联,还需要其他更大样本的研究进一步验证?
    94  端粒长度与肿瘤发生发展的研究进展
    解翠薇 薛文杰 杜江波 靳光付
    2016(6):641-647. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160601
    [摘要](2308) [HTML](59) [PDF 1.11 M](1734)
    摘要:
    端粒是染色体末端维持染色体完整和基因组稳定的重要串联重复序列结构?端粒长度可通过多种方法进行定量或相对定量检测,反映机体在细胞水平的衰老程度和健康状态?端粒酶能够以自身模板序列催化合成端粒并使之延长?端粒在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用,端粒长度可作为一类分子标志物指示肿瘤发生发展风险?近年来,许多研究对端粒长度及其相关因素与多种肿瘤发生发展的关系进行了探讨,发现其在不同肿瘤中可能发挥不同作用?本文对国内外相关领域的研究进展进行了梳理和汇总?
    95  Toll样受体4活化增强乳腺癌细胞株MCF-7侵袭力的研究
    王 涛 王 波 温会燕 颜 洁 何春燕 朱雪明 杨 欢
    2016(5):533-538. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160505
    [摘要](2502) [HTML](40) [PDF 1.69 M](1327)
    摘要:
    目的:研究Toll样受体4(TLR4)在人类乳腺癌MCF-7细胞株中的表达及在肿瘤增殖和转移中的作用?方法:脂多糖(LPS) 刺激MCF-7细胞株,RT-PCR?Real-time PCR?FCS 和 Western blotting 检测TLR4在mRNA和蛋白水平表达变化;MTT检测细胞增殖;RT-PCR 和 real-time PCR检测基质金属蛋白酶(MMP-2)?MMP-9 和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA表达并用ELISA检测培养上清中其蛋白表达水平;Western blot检测TLR4信号传导通路下游蛋白MyD88的表达;CBA测定细胞培养上清的炎性细胞因子;划痕实验检测癌细胞的生物学侵袭力?结果:实验表明,LPS刺激MCF-7细胞株能明显上调TLR4 mRNA和蛋白表达(P < 0.05)?MTT结果显示,LPS对癌细胞增殖没有影响?LPS激活TLR4后,MMP-2?MMP-9和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达均明显上调 (P < 0.05)?划痕实验表明,LPS能显著增强MCF-7细胞株的划痕愈合能力?此外,LPS能诱导TLR4信号通路下游MyD88蛋白表达的显著上调(P < 0.05),IL-6的分泌增多(P < 0.05)?结论:LPS能明显增强MCF-7细胞株TLR4的表达,增强癌细胞的侵袭力?
    96  血清核仁素检测在结肠癌中的临床应用
    王晓明 卢小东 严 枫 万 杰 莫冬萍
    2016(5):529-532. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160504
    [摘要](2279) [HTML](65) [PDF 269.86 K](1180)
    摘要:
    目的:探讨核仁素(nucleolin)在结肠癌患者血清中的水平与临床意义?方法:用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测172例结肠癌患者?24例直肠癌患者和80例健康体检者血清中核仁素含量,并分析血清核仁素水平与结肠癌患者临床病理特征之间的关系?结果:结肠癌患者血清中核仁素含量为(228.9 ± 212.4)pg/mL,直肠癌患者为(115.1 ± 34.5)pg/mL,健康对照组为(101.13 ± 32.4)pg/mL?结肠癌患者血清核仁素水平明显高于健康对照组(P < 0.001),直肠癌患者与健康对照组间差异无统计学意义(P > 0.05)?在结肠癌检测中,血清核仁素敏感性为91.9%?特异性为83.8%,癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)敏感性为68.6%?特异性为85.0%?浸润型结肠癌患者中血清核仁素水平明显高于隆起型和溃疡型(P < 0.05)?结肠癌患者血清核仁素水平与年龄?性别?肿瘤大小?分化程度?浸润程度?淋巴结转移?远处转移?TNM分期?Ducks分期均无相关性(P均 > 0.05)?结论:结肠癌患者血清核仁素检测敏感性和特异性较高,敏感性优于CEA,特异性与CEA相当,对结肠癌的诊断有潜在应用价值?
    97  胃癌患者血清miR-486的表达水平及其意义
    王丽丽 申娴娟 张金业 鞠少卿
    2016(5):524-528. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160503
    [摘要](2187) [HTML](80) [PDF 333.25 K](1175)
    摘要:
    目的:探讨胃癌患者血清miR-486的表达水平及其辅助诊断的价值?方法:收集经病理确诊的100例胃癌患者?30例胃息肉患者及50例健康对照者的血清标本?采用荧光定量PCR方法定量检测血清miR-486的表达水平,用化学发光法检测CEA?CAl99?CA724的含量?采用Mann-Whitney U检验比较不同组间血清miR-486水平的差异,采用χ2检验分析胃癌患者血清miR-486水平与其临床病理特征之间的关系?采用Spearman相关性分析胃癌患者血清miR-486水平与CEA?CA199及CA724的关系,应用ROC曲线及AUC(95%CI)评估它们作为诊断指标的诊断效能?结果:胃癌?胃息肉患者和健康对照者血清miR-486的含量分别为0.454(0.225,0.653)?0.121(0.083,0.166)和0.063(0.013,0.119);胃癌患者血清miR-486的含量显著高于胃息肉患者和健康对照者,差异均具有统计学意义(P均 < 0.001);而胃息肉患者与健康对照者血清miR-486的含量差异无统计学意义(P > 0.05)?胃癌患者血清miR-486的表达水平在不同年龄?性别?胃癌部位无统计学差异(P > 0.05),在分化程度(P=0.046)?TNM分期(P=0.013)?淋巴结是否转移(P=0.006)差异均有统计学意义?胃癌患者血清miR-486含量与CEA(r=0.213,P=0.034)?CA724(r=0.297,P=0.003)有相关性,与CA199(r=0.037,P=0.714)无相关性?胃癌组与健康对照组比较,血清miR-486的AUC 0.839,95%CI为0.774~0.904?结论:胃癌患者血清miR-486含量显著高于胃息肉患者和健康对照者,miR-486可能是胃癌辅助诊断的一个重要生物学指标?
    98  负性分子B7-H4在乳腺癌组织中的表达及其临床意义
    虞培娟 朱 旬 严茹红 洪 荫 朱雪明 傅丰庆 张学光
    2016(5):520-523. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160502
    [摘要](2339) [HTML](57) [PDF 4.32 M](1313)
    摘要:
    目的:探讨负性分子B7-H4在乳腺癌组织中的表达情况及其与临床病理参数之间的关系?方法:通过免疫组织化学技术分析68例乳腺癌组织和30例良性纤维瘤中B7-H4的表达情况,并结合临床资料统计分析B7-H4表达与乳腺癌患者临床特征之间的关系?结果:免疫组织化学结果显示,乳腺癌组织中B7-H4的阳性率为75%,明显高于纤维瘤组织(17%)(P < 0.05),并与雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达呈负相关?与人类表皮生长因子2(human epidermal growth factor receptor2,HER-2)呈正相关,而在年龄?肿瘤大小?病理类型等其他变量之间不存在显著差异?结论:乳腺癌组织中B7-H4异常表达,与乳腺组织良性病变存在差异(P < 0.05),并与ER?HER-2的表达相关,提示B7-H4分子在乳腺癌的发生发展过程中起了重要作用?
    99  DNA修复基因单核苷酸多态性与乳腺癌发病风险的相关性
    刘 贤 林 康 孙慧玲 许 桃 王书奎
    2016(5):513-519. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160501
    [摘要](2356) [HTML](68) [PDF 276.59 K](1119)
    摘要:
    目的: 探讨南京地区DNA修复基因的5个单核苷酸多态性位点(rs1800975?rs11615?rs2228000?rs2228001?rs238406) 与乳腺癌的发病风险?病理特征及激素受体水平的相关性?方法:共纳入乳腺癌病例和健康对照各350例?用MassARRAY时间飞行质谱技术分析5个单核苷酸位点的多态性;免疫组化方法检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)?孕激素受体(progesterone receptor,PR)及人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,HER-2)表达水平?Logistics回归模型分析不同基因型与乳腺癌发生?病理特点和相关激素受体(ER?PR?HER-2)水平的关系?结果: rs11615TC/TT和rs2228000TT基因型与乳腺癌发病明显相关,且亚组分析提示rs1800975AA和GA基因型分别与绝经期乳腺癌?ER阴性乳腺癌发病相关?此外,rs2228000T等位基因与PR?乳腺癌HER-2阳性亚型相关,且rs11615与乳腺癌ER?PR阳性均相关?rs2228001与T3期乳腺癌?PR?HER-2阴性均相关?结论: rs2228000TT和rs11615TC/TT可增加乳腺癌患病风险?对于不同基因位点,肿瘤病理特点及ER?PR?HER-2的表达水平与乳腺癌的发生或预防有关?
    100  肺毛细血管楔压与心脏再同步化治疗慢性心衰疗效的相关性分析
    葛培兵 陶宁超 朱 睿 邱垣皓 王权鹏 王 垚 张海峰 张 浩 周艳丽 侯小锋 李新立 邹建刚
    2016(4):411-415. DOI: 10.7655/NYDXBNS20160406
    [摘要](2462) [HTML](88) [PDF 280.46 K](1192)
    摘要:
    目的:探讨右心导管肺毛细血管楔压 (pulmonary capillary wedge pressure,PCWP)与心脏再同步化治疗(cardiac resynchronization therapy,CRT)慢性心衰疗效的相关性。方法:入选拟行心脏再同步化治疗的慢性心衰患者,术前1周内进行右心导管检查,测定肺毛细血管楔压;根据CRT术后患者心功能变化分成CRT有反应组与无反应组。术后6个月内左室射血分数(LVEF)提高超过5%,纽约心功能分级(NYHA)降低1级或1级以上者定义为CRT有反应;通过受试者工作曲线分析PCWP对CRT反应性的预测价值。应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同水平PCWP患者主要心血管不良事件的差异。结果:35例CRT患者中有反应24例,无反应11例;有反应组PCWP(11.9 ± 7.0)mmHg,无反应组PCWP(21.7 ± 9.1)mmHg,两组间差异有统计学意义(P=0.006)。以PCWP 12.0 mmHg为最佳分界点时,Youden指数最大,预测CRT反应性的敏感度为90.9%,特异度为58.3%。相对于PCWP>12.0 mmHg组,PCWP≤12.0 mmHg组CRT术后心功能?左室内径和PCWP更佳。Kaplan-Meier 生存曲线表明PCWP≤12.0 mmHg组患者比PCWP>12.0 mmHg组患者无主要心血管不良事件的生存时间长,但未达到统计学差异(P=0.079)。结论:术前右心导管检测PCWP对CRT反应性有较好的预测价值。术前PCWP低的患者无主要心血管不良事件的生存时间长。