目的:建立从人外周血单核细胞体外诱导培养树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法.方法:分离人外周血单个核细胞,以细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导培养获得DC,电镜及共聚焦显微镜观察其形态,流式细胞术检测细胞表面抗原,体外同种混合淋巴细胞反应检测DC刺激T细胞的增殖活性.结果:从正常外周血分离得到的单核细胞,体外经重组人GM-CSF、IL-4、TNF-α的共同诱导培养,得到大量成熟DC.形态学观察可见典型DC特征;荧光激活细胞分离器(FACS)检测表明,诱导的DC高表达HLA-DR(96%)、CD83(94.2%)、CDla(94.2%)分子,同时也高表达CD40(97.7%)、CD80(98.2%)分子.同种混合淋巴细胞反应显示,诱导的DC具有很强的激发同种T细胞增殖的能力.结论:人外周血单核细胞体外经细胞因子贯序诱导培养,可以生成大量功能成熟的DC,为进一步开展DC的基础研究和临床应用提供了可能.