文章摘要
吴升华,陆超,董玲,周国平,陈子庆.脂氧素A4受体样蛋白基因的克隆与转染及其在Hela细胞的表达[J].南京医科大学学报,2005,25(7):
脂氧素A4受体样蛋白基因的克隆与转染及其在Hela细胞的表达
  
DOI:10.7655
中文关键词: 脂氧素A4受体样蛋白、真核表达载体、克隆、转染、Hela细胞
英文关键词: 
基金项目:
吴升华  陆超  董玲  周国平  陈子庆
南京医科大学第一附属医院儿科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院儿科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院儿科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院儿科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院中心实验室,江苏,南京,210029
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中文摘要:
      目的:构建脂氧素A4受体样蛋白(LRLP)基因的真核表达载体,克隆后转染Hela细胞,观察LRLP基因在Hela细胞中的表达.方法:应用PCR方法,以小鼠睾丸cDNA为模板,扩增出LRLP基因片段,插入质粒pGEM-T中,转化入大肠杆菌JM109.扩增阳性重组质粒,经酶切后纯化并测序鉴定目的片段.构建含绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP/LRLP,转化入大肠杆菌JM109扩增,酶切后再测序鉴定目的片段,抽提质粒后瞬时转染Hela细胞,置激光共聚焦显微镜下照像.结果:测序鉴定表明,克隆的LRLP序列与GenBank中LRLP原序列100%符合,激光共聚焦显微镜下见Hela细胞中LRLP基因表达.结论:成功地构建了真核表达载体pEGFP/LRLP,并转染了Hela细胞.
英文摘要:
      
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