文章摘要
徐璐,朱进,仇镇宁,李玉华,张建平,孙景军,丁贵鹏,王子露,冯振卿,管晓虹.肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定[J].南京医科大学学报,2005,25(7):
肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定
Cloning,expression and characteristics determination of human melanoma antigen MAGE-A9
  
DOI:10.7655
中文关键词: 黑色素瘤抗原、MAGE-A9、RT-PCR、基因克隆、基因表达
英文关键词: 
基金项目:
徐璐  朱进  仇镇宁  李玉华  张建平  孙景军  丁贵鹏  王子露  冯振卿  管晓虹
南京医科大学病理学系,南京,210029;南京医科大学医学分子生物学研究所,南京,210029;南京医科大学医学分子生物学研究所,南京,210029;南京医科大学病理学系,南京,210029;南京医科大学第二附属医院普外科,南京,210011;南京医科大学病理学系,南京,210029;南京医科大学病理学系,南京,210029;南京医科大学病理学系,南京,210029;南京医科大学病理学系,南京,210029;南京医科大学医学分子生物学研究所,南京,210029
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中文摘要:
      目的:扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9(melanoma antigen A9)cDNA,构建原核表达载体,制备抗MAGE-A9单抗,观察其在肝细胞癌中的表达.方法:从人肝癌组织提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-A9 cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达.重组蛋白经L-Arabinose诱导表达纯化后,制备抗MAGE-A9单抗,免疫组化检测MAGE-A9在肝细胞癌中的表达和定位.结果:获得MAGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致.成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,SDS-PAGE分析其相对分子质量为35kD.获得抗MAGE-A9单抗,MAGE-A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21%(8/39),主要表达于胞浆,未见肿瘤异质性,统计学分析MAGE-A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性.结论:有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE-A9抗原,且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性,MAGE-A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点.
英文摘要:
      
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