文章摘要
杜岳峰,邢毅飞,曾甫清,王美玉,陆鹏,刘先艮.CXCR4-siRNA逆转录病毒载体体外靶向抑制hTERT+中瘤细胞CXCR4基因的表达[J].南京医科大学学报,2006,26(10):887~892
CXCR4-siRNA逆转录病毒载体体外靶向抑制hTERT+中瘤细胞CXCR4基因的表达
The targeted inhibition of CXCR4 gene expression for hTERT+ carcinoma cells by using retrovirus-mediated CXCR4-siRNA in vitro
投稿时间:2006-03-18  
DOI:10.7655
中文关键词: RNA干扰、趋化因子受体4、人端粒酶逆转录酶、肿瘤、转移
英文关键词: 
基金项目:国家自然科学基金(30300348)资助项目
杜岳峰  邢毅飞  曾甫清  王美玉  陆鹏  刘先艮
华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科,湖北,武汉,430022;西安交通大学第二医院泌尿外科,陕西,西安,710061
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中文摘要:
      目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并研究其在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中的表达.方法:用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的Pgensil-1质粒,以hTERT启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体PLXSN中,行限制性酶切鉴定.转染PA317病毒包装细胞,收获病毒上清分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP及人胚肺成纤维细胞MRC5和人乳腺癌细胞MCF7,RT-PCR检测CXCR4 mRNA表达.结果:限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了PLXSN/EGFP-hTERT-siCXCR4.与空载体组比较,PC-3m、LNCaP、MCF7细胞中CXCR4-siRNA对CXCR4 mRNA的48 h抑制率分别为(87.02±10.34)﹪、(61.70±9.77)﹪、(88.31±9.20)﹪.MRC5细胞中PLXSN-hTERT-siCXCR4对CXCR4 mRNA不抑制.结论:该逆转录病毒系统中hTERT启动子调控的下游RNA干扰序列可选择性地在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中表达,在hTERTMRC5细胞不表达,具有显著的靶向性.
英文摘要:
      
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