文章摘要
顾镭,邢美芬,季晓辉,孙志达,杨晓帆,王慧娟,张明顺.脐血CD34+造血干细胞来源的树突状细胞体外培养体系的优化[J].南京医科大学学报,2006,26(10):913~917
脐血CD34+造血干细胞来源的树突状细胞体外培养体系的优化
Improvement of the culture system in vitro for dendritic cells derived from cord blood CD34+ hematopoietic precursor cells (HPC)
投稿时间:2006-02-16  
DOI:10.7655
中文关键词: 脐血、CD34+HPC、树突状细胞、体外培养
英文关键词: 
基金项目:江苏省自然科学基金(BK2004148)资助项目
顾镭  邢美芬  季晓辉  孙志达  杨晓帆  王慧娟  张明顺
南京医科大学微生物与免疫学系,江苏,南京,210029
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中文摘要:
      目的:优化脐血CD34+造血干细胞(HPC)来源的树突状细胞(DCs)诱导培养方法,为体外研究CD34+HPC诱导产生功能性树突状细胞(DCs)的影响因素奠定基础.方法:淋巴细胞分离液(Ficoll)分离获得脐血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD34+HPC,并用流式细胞术鉴定CD34+HPC纯度;比较GT(GM-CSF+TNF-α)方案和GTI(GM-CSF+TNF-α+IL-4)方案及GTI方案中TNF-αt和IL-4不同时段加入对诱导培养产生的DCs成熟的影响;通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型及3H-TdR检测DCs激发异体T细胞增殖能力.结果:免疫磁珠阳性分选CD34+HPC纯度可达90﹪以上;将CD34+HPC按GT方案和GTI方案进行培养,均可诱导产生DCs,但经GT方案诱导的DCs CD14表达较高,CD80、CD86、CD83、CD1a表达不如经GTI方案诱导的高;而GTI方案中,以TNF-α0 h加入、IL-4 48 h加入诱导培养的DCs各表型表达相对较佳,并具有激发异体T细胞增殖能力.结论:CD34+HPC经过合适的培养体系能够诱导分化为功能性DCs,以GM-CSF与TNF-α 0h加入、IL-4 48 h加入的GM-CSF+TNF-α+IL-4方案更为可取.
英文摘要:
      
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