南京医科大学创新基金资助项目（MC0005），江苏省医学重点人才基金资助项目（RC2002058）
目的：体外比较不同浓度硫贲妥钠、咪唑安定对成年人Ｔｈ０细胞分化的影响。方法：采集２０例健康志愿者外周静脉血，进行全血和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）培养。每一份血样均用于下列各组研究：①空白对照组（Ｃ组）；②不同浓度硫贲妥钠组［４ μｇ／ｍｌ（Ｔ１组）、２０ μｇ／ｍｌ（Ｔ２组）和４０ μｇ／ｍｌ（Ｔ３组）］；③不同浓度咪唑安定组［５０ ｎｇ／ｍｌ（Ｍ１组）、１５０ ｎｇ／ｍｌ（Ｍ２组）和５００ ｎｇ／ｍｌ（Ｍ３组）］。培养的全血和ＰＢＭＣｓ均用相应浓度药物预先作用２４ ｈ，然后加入相应的刺激剂。刺激后检测胞内细胞因子（ＩＦＮ-γ＋／ＩＬ-４＋）和细胞膜表面趋化因子受体（ＣＣＲ５＋／ＣＣＲ３＋）含量评估Ｔｈ０细胞的分化情况。结果：分别与Ｃ组和Ｔ１组相比较，Ｔ２、Ｔ３组的Ｔｈ１细胞亚群比例均明显降低（Ｐ ＜ ０．０５）；与Ｔ１组相比较，Ｔ３组的Ｔｈ２细胞亚群比例明显降低（Ｐ ＜ ０．０５）。咪唑安定各组Ｔｈ１、Ｔｈ２细胞亚群的比例无显著改变。结论：硫贲妥钠对Ｔｈ１细胞分化有明显抑制作用，使Ｔｈ０细胞向Ｔｈ２方向分化；咪唑安定对Ｔｈ０细胞分化无明显影响。
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｉｏｐｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｍｉｄａｚｏｌａｍ ｏｎ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｈｅｌｐｅｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎ ａｄｕｌｔｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｖｅｎｏｕｓ ｂｌｏｏｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ２０ ｍｉｄｄｌｅ-ａｇｅｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｄｏｎｏｒｓ． Ｉｎ ｅａｃｈ ｖｏｌｕｎｔｅｅｒ，２０ ｍｌ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｗａｓ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ７ ｇｒｏｕｐｓ：ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，３ ｔｈｉｏｐｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐｓ（４ μｇ／ｍｌ，２０ μｇ／ｍｌ， ４０ μｇ／ｍｌ），３ ｍｉｄａｚｏｌａｍ ｇｒｏｕｐｓ（５０ ｎｇ／ｍｌ， １５０ ｎｇ／ｍｌ， ５００ ｎｇ／ｍｌ）． Ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ａｎｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ（ＰＢＭＣｓ） ｗｅｒｅ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｉｏｐｅｎｔａｌ ａｎｄ ｍｉｄａｚｏｌａｍ ｆｏｒ ２４ ｈ， ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｉｔｈｏｕｔ ａｎｙ ｄｒｕｇｓ． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｓｔｉｍｕｌａｎｔｓ- ｐｈｏｒｂｏｌｍｙｒｉｓｔａｔｅ＋ｌｏｎｏｍｙｃｉｎ＋ｇｌｏｇｉｓｔｏｐ ｗｅｒｅ ａｄｄｅｄ ｔｏ ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ａｎｄ ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ（ＰＨＡ） ｗａｓ ａｄｄ ｔｏ ＰＢＭＣｓ． Ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ｗａｓ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｆｏｒ ａｎｏｔｈｅｒ ４ ｈ ａｎｄ ＰＢＭＣｓ ｗｅｒｅ ｉｎｃｕｂａｔｅｄ ｆｏｒ ａｎｏｔｈｅｒ ４８ ｈ． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ Ｔ-ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＩＦＮ-γ（ａｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ Ｔｈ１ ｃｅｌｌｓ） ａｎｄ ＩＬ-４（ａｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ Ｔｈ２ ｃｅｌｌｓ） ｉｎ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ｕｓｉｎｇ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＣＲ５＋（ａｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ Ｔｈ１ ｃｅｌｌｓ） ａｎｄ ＣＣＲ３＋（ａｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ Ｔｈ２ ｃｅｌｌｓ） ｉｎ ＰＢＭＣｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｉｎ ｔｈｉｏｐｅｎｔａｌ ２０ μｇ／ｍｌ， ４０ μｇ／ｍｌ ｇｒｏｕｐ， ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ Ｔｈ１ ｃｅｌｌｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ． Ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｉｏｐｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐｓ， ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ Ｔｈ１ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｉｇｈ-ｄｏｓｅ ｏｒ ｍｉｄｄｌｅ-ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｌｏｗ-ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ， ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ Ｔｈ２ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｉｇｈ-ｄｏｓｅ ｗａｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｌｏｗ-ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ． Ｉｎ ｍｉｄａｚｏｌａｍ ｇｒｏｕｐ， ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｈａｎｇｅ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｏｐｅｎｔａｌ ｃａｎ ｉｎｈｉｂｉｔ Ｔｈ１ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｈｉｆｔ ｔｈｅ ｂａｌａｎｃｅ ｔｏｗａｒｄｓ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ Ｔｈ２-ｌｉｋｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｌｙ． Ｍｉｄａｚｏｌａｍ ｈａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ Ｔｈ１ ａｎｄ Ｔｈ２ ａｃｔｉｖｉｔｙ．
邹 蓉,陈 平,金文杰,黄亚辉,钱燕宁.体外比较硫贲妥钠、咪唑安定对成年人Ｔｈ０细胞分化的影响[J].南京医科大学学报（自然科学版）,2007,(6):602-605
