文章摘要
程 虹,金庆文,姚 娟,邓晓萱,万 琪,丁新生,季晓辉.血管内皮生长因子在大肠杆菌中表达?提纯及功能测定[J].南京医科大学学报,2008,28(1):33~36
血管内皮生长因子在大肠杆菌中表达?提纯及功能测定
Expression,purification,and characterization of VEGF in E. Coli
投稿时间:2007-09-09  
DOI:10.7655
中文关键词: 血管内皮生长因子  PET-32a(+)表达载体  Neuropilin-1
英文关键词: VEGF  PET32a expression vector  Neuropilin-1
基金项目:
作者单位
程 虹 南京医科大学第一附属医院神经内科,江苏 南京 210029 
金庆文 南京医科大学第一附属医院神经内科,江苏 南京 210029 
姚 娟 南京医科大学第一附属医院神经内科,江苏 南京 210029 
邓晓萱 南京医科大学第一附属医院神经内科,江苏 南京 210029 
万 琪 南京医科大学第一附属医院神经内科,江苏 南京 210029 
丁新生 南京医科大学第一附属医院神经内科,江苏 南京 210029 
季晓辉 南京医科大学微生物教研室,江苏 南京 210029 
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中文摘要:
      目的:利用细菌表达系统合成大量重组血管内皮生长因子(VEGF)蛋白?方法:将VEGF165 cDNA克隆于表达载体PET-32a(+)后转染BL-21株表达重组VEGF蛋白,用分离His蛋白的层析柱提纯重组VEGF蛋白?结果:重组VEGF蛋白经氨基酸序列测定证实?Western blot测定发现His蛋白?功能测定发现重组VEGF蛋白可阻断细胞表面Neuropilin-1的表达?结论:上述表达系统制备大量具有生物活性的重组VEGF蛋白
英文摘要:
      Objective:To make recombinant vascular endothelial growth factor(VEGF) in E.Coli. Methods:The VEGF cDNA was cloned and put into the bacterial expression system PET32a(Novagen) in frame with histidine tag. After introducing into the BL21 (DE3) E coli host,recombinant VEGF165 protein was produced and purified by denaturing condition on the His-bind resin. Results:The recombinant protein was confirmed by AA sequencing. The reconstituted VEGF165 was recognized by its receptor Neuropilin-1 and could obstruct the expression of Neuropilin-1 in cell curface. Conclusion:pET32a/human VEGF165 expression vector was transfected into E.coli BL21(DE3) and produced a lot of functional recombinant human VEGF165.
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