文章摘要
孙勇,孙曙光,吴炜,张勇,吕尚军,王林,彭曦,汪仕良.人解痉多肽原核表达载体的构建及诱导表达[J].南京医科大学学报,2008,28(12):1537~1540
人解痉多肽原核表达载体的构建及诱导表达
Construction of human spasmolytic polypeptide expression vector and inductively expression in E.coli
投稿时间:2008-06-20  
DOI:10.7655
中文关键词: 人解痉多肽  大肠杆菌  诱导表达
英文关键词: human spasmolytic polypeptide  E.coli  inductive expression
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30570844)
作者单位
孙勇 中国人民解放军第97医院烧伤整形科,江苏 徐州〓221004 
孙曙光 中国人民解放军第97医院烧伤整形科,江苏 徐州〓221004 
吴炜 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤?烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400038 
张勇 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤?烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400038 
吕尚军 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤?烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400038 
王林 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤?烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400038 
彭曦 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤?烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400038 
汪仕良 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤?烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400038 
摘要点击次数: 1314
全文下载次数: 128
中文摘要:
      目的:构建人解痉多肽(hSP)原核表达载体,表达重组hSP,为功能研究奠定基础?方法:通过RT-PCR获得hSPcDNA片段,将目的基因插入原核表达载体pET32a,得到重组载体pET32a-hSP?IPTG诱导表达后行SDS-PAGE分析及Western Blot检测?结果:经测序及PCR证实,hSPcDNA准确插入原核表达载体pET32a中,诱导表达后SDS-PAGE分析证明hSP的分子量约为32 kD,Western-blot分析表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性?结论:上述结果表明成功构建出原核表达载体pET32a-hSP,获得重组hSP,并为深入研究hSP奠定了基础?
英文摘要:
      Objective:To construct E.coli expression vector of human spasmolytic polypeptide(hSP),express recombinant hSP and underlie the base of function analyses. Methods:The hSP gene encoding mature peptide was amplified by reverse transcriptase polymerase chain reaction,and then inserted into the expression vector pET32a. Recombinant plasmid pET32a-hSP was transformed into the E.coli Origami B(DE3). Recombinant proteins were assayed with SDS-PAGE and Western blot. Results:It was proved that the fragment amplified was inserted into the expression vector pET32a correctly by PCR and gene sequencing. Tricine SDS-PAGE analyse proved that the molecular weight of hITF was about 32 kD and Western blot demonstrated that the expression proteins have much good antigenicity and specificity. Conclusion:hSP E.coli expression vector was successfully constructed and recombinant hSP was expressed. This research lay foundations for the further function studying of hSP.
查看全文   查看/发表评论  下载PDF阅读器
关闭