摘要:目的:针对β-连环蛋白(β-catenin)基因的不同部位,构建靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒,鉴定并筛选出最佳抑制效率的表达质粒-方法:针对β-catenin基因的不同部位设计3对短发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸片段,克隆到真核表达载体pGPU6中,构建靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1-2-3-利用脂质体转染人胃癌细胞株AGS,Western blot法检测并筛选最佳抑制效率的shRNA表达质粒-结果:3个靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1-2-3经限制性酶切和测序确实基因插入正确,Western blot法证实pGPU6-β-catenin-shRNA-3明显降低细胞内β-catenin蛋白的表达-结论:成功构建了靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA -1-2-3,并筛选出最佳抑制效率的表达质粒,为进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在胃癌中的作用奠定了基础-