摘要:目的: 克隆幽门螺杆菌(H.polyri,HP)的Tipα基因,构建含有Tipα的重组载体,在大肠杆菌表达并纯化以获得Tipα蛋白-方法:从HP的26695菌株扩增位于HP0596的Tipα基因,将Tipα基因与pET28a载体(His标签)同时经BamHI和XhoI酶切-纯化及连接后,构建含有Tipα的重组载体pET28a-Tipα,重组载体转化至大肠杆菌并表达,表达产物以Ni-NTA 亲和层析纯化,Western blot进一步鉴定-结果:克隆Tipα基因,经测序证实与Genbank对比,二者同源性为100%-大肠杆菌表达产物,纯化后SDS-PAGE显示相对分子量为23 ku-Western blot证实纯化产物与抗Tipα抗体特异性结合-结论:成功克隆并表达出HP的Tipα蛋白,为进一步研究Tipα的功能奠定基础-