文章摘要
徐 鑫,唐小军,熊 林,王 欢,李文杰,高 畅,熊四平,仇镇宁,Tan Min Han,Vo Jess Honganh,冯振卿,陈仁杰.抗EB病毒LMP2A单克隆抗体的制备及免疫学特性分析[J].南京医科大学学报,2014,(7):875~882
抗EB病毒LMP2A单克隆抗体的制备及免疫学特性分析
Preparation and identification of immunologic characterization of a monoclonal antibody against latent membrane protein 2A of EBV
投稿时间:2014-03-06  
DOI:10.7655/NYDXBNS20140705
中文关键词: EB病毒  LMP2A  单克隆抗体  免疫学特性
英文关键词: EBV  LMP2A  monoclonal antibody  immune specificity
基金项目:江苏省临床医学科技专项(BL2013038);江苏省普通高校研究生科研创新基金(CXZZ12_0563)
作者单位
徐 鑫 江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏 镇江 212013 
唐小军 南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029 
熊 林 南京医科大学第二附属医院病理科,江苏 南京 210011 
王 欢 江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏 镇江 212013 
李文杰 南京医科大学第二附属医院病理科,江苏 南京 210011 
高 畅 南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029 
熊四平 南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210030 
仇镇宁 南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210031 
Tan Min Han 新加坡生物工程和纳米技术研究院生物医疗器械和诊断中心,新加坡 138669 
Vo Jess Honganh 新加坡生物工程和纳米技术研究院生物医疗器械和诊断中心,新加坡 138670 
冯振卿 江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏 镇江 212013
南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029 
陈仁杰 南京医科大学第二附属医院病理科,江苏 南京 210011 
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中文摘要:
      目的:利用杂交瘤技术制备抗EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)单克隆抗体并分析其免疫学特性?方法:以LMP第2和第5胞外区表位串联制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,制备抗LMP2A的单克隆抗体?通过ELISA?Western blot?免疫荧光?免疫组化?流式细胞术等方法鉴定单抗的免疫学特性?结果:获得1株稳定并持续分泌抗LMP2A单克隆抗体的稳定杂交瘤细胞株,所分泌的单克隆抗体5C12-C4-A6 能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面的LMP2A蛋白?结论:本文制备了能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面LMP2A蛋白的单克隆抗体,为进一步进行鼻咽癌临床早期诊断和分子靶向治疗奠定了基础?
英文摘要:
      Objective:To produce a monoclonal antibody(mAb) against latent membrane protein 2A(LMP2A) with hybridoma technology and characterize its immune specificity. Methods:The spleen cells from BALB/c mice immunized with epitope fusion protein LMP2A were fused with SP2/0 cells to produce a monoclonal antibody against LMP2A. We further determined immuno-specificity of the purified antibody by various immunological assays such as ELISA,Western blotting assays,immunofluorescence,immunohistochemisty and FACS. Results:We successfully produced a hybridoma cell line,which continuously and stably secreted anti-LMP2A mAb. Moreover,this mAb can effectively recognize the transmembrane glycoprotein LMP2A over-expressed in nasopharyngeal carcinoma cells and tissues. Conclusion:We successfully obtained mouse anti-LMP2A mAb that can specifically recognize the transmembrane glycoprotein LMP2A in nasopharyngeal carcinoma cells. It can be potentially applied to early stage clinical diagnosis and some tumor targeted therapy.
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